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1、研究目的:觀察脊柱結(jié)核不同病灶組織中總RNA的產(chǎn)量和質(zhì)量。
實(shí)驗(yàn)研究方法:30例脊柱結(jié)核患者均行徹底清除病灶術(shù),術(shù)后用無(wú)菌的EP管收集患者的膿液、死骨、肉芽、病灶壁、硬化骨(所有組織標(biāo)本均用無(wú)菌剪刀、咬骨剪等器械剪碎),立即選取各種組織標(biāo)本50mg液氮冷凍后用研缽徹底研碎,加入 Trizol試劑1ml進(jìn)行總RNA的提??;再選取30例冰凍一年的脊柱結(jié)核不同病灶組織標(biāo)本,也用同樣的方法進(jìn)行總RNA的提取,應(yīng)用ND-100分光光度儀
2、檢測(cè)不同病灶組織中的總RNA的產(chǎn)量和質(zhì)量,同時(shí)用1%的瓊脂糖凝膠電泳分別檢測(cè)所提取總RNA的完整性。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:新鮮的脊柱結(jié)核不同病灶組織標(biāo)本中,膿液組織中含有的總RNA量大且質(zhì)量好,其次為肉芽組織,含有總RNA量最少的為硬化骨,所有提取的總RNA經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳以后條帶清晰完整且28S:18S的亮度為2:1。冰凍一年的不同病灶組織標(biāo)本中膿液組織的總RNA量最大且各種組織的總RNA經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳后完整且28S為18S亮度的2
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