雙醋瑞因?qū)顷P(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨退變過程中結(jié)締組織生長因子(CTGF)表達的影響.pdf

1、背景：骨關(guān)節(jié)炎(OA)是最常見的一種關(guān)節(jié)炎并且是致殘的主要原因。目前關(guān)于骨關(guān)節(jié)炎的病因尚未完全清楚，治療目的主要是減輕疼痛、改善運動和功能。雙醋瑞因是近年來治療 OA的新藥，其能抑制軟骨降解，促進軟骨修復(fù)，從而具有保護軟骨的作用。臨床應(yīng)用雙醋瑞因治療骨關(guān)節(jié)炎已取得了良好的效果，但其治療的確切機制尚不清楚。
　　目的：本研究的目的是將不同濃度的雙醋瑞因作用于體外 IL-1β誘導(dǎo)的大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中，觀察其對關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的影響及其可能

2、的作用機制，為雙醋瑞因在臨床上的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　方法：
　?。?）體外培養(yǎng)SD大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞，HE染色和II型膠原免疫熒光染色鑒定軟骨細(xì)胞，rhIL-1β刺激軟骨細(xì)胞制備體外OA模型。
　?。?）實驗分成正常對照組、模型組（10ng/ml rhIL-1β）和實驗組（不同濃度雙醋瑞因+10ng/ml rhIL-1β）。
　?。?）利用①MTT比色法觀察軟骨細(xì)胞的增殖情況；②Annexin V-FITC/P

3、I雙染細(xì)胞，流式細(xì)胞術(shù)觀察軟骨細(xì)胞凋亡率；③應(yīng)用 Western Blot和RT-PCR從蛋白質(zhì)和mRNA兩水平檢測結(jié)締組織生長因子的表達。以上實驗均重復(fù)三次。
　　結(jié)果：
　　（1）原代軟骨細(xì)胞呈多角形,胞質(zhì)均勻，HE染色成紅色；免疫熒光染色后陽性部位呈現(xiàn)黃綠色。
　?。?）MTT法結(jié)果顯示:與正常對照組比較，雙醋瑞因能促進軟骨細(xì)胞MTT增殖活性以濃度為10-5M更明顯，IL-1β作用后各實驗組軟骨細(xì)胞增殖能力下降，

4、但與正常對照組比較濃度為10-4M和10-5M雙醋瑞因仍能促進軟骨細(xì)胞MTT增殖活性。
　?。?）軟骨細(xì)胞凋亡的檢測結(jié)果顯示：與正常對照組對比加rhIL-1β的模型對照組能夠顯著促進軟骨細(xì)胞的凋亡。而加雙醋瑞因組軟骨細(xì)胞凋亡率明顯減少，與模型對照組比較有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　（4）Western Blot檢測結(jié)果顯示：IL-1β能夠降低 CTGF的表達，與正常組比較有統(tǒng)計學(xué)差異，濃度為10-5M雙醋瑞因能夠顯著促進 IL-1β誘