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文檔簡介
1、目的:探討殼寡糖預處理對大鼠腸缺血再灌注損傷(I/R)回腸組織NF-κB表達的影響并探討其可能的機制,為殼寡糖用于防治腸道缺血再灌注損傷提供實驗依據(jù)。
方法:⑴采用成年健康雄性SD大鼠40只。⑵利用夾閉腸系膜上動脈(SMA)的方法建立腸缺血再灌注損傷模型,依據(jù)夾閉及開放再灌注的時間可分別建立輕度和重度缺血再灌注模型。⑶再灌注后處死大鼠,立即取出回腸組織大體觀察;部分組織用10%甲醛固定,常規(guī)石蠟切片,HE染色后光鏡下觀察;部分
2、組織立即置于-70℃冰箱保存留用于免疫組化法測定NF-κB蛋白的表達及實時定量PCR檢測。
結果:①HE染色后光鏡下觀察可見,假手術組(A組)大鼠腸絨毛完整,形態(tài)正常;重度缺血再灌注組(B組)可見絨毛結構破壞,可見固有層毛細血管暴露、出血及炎性細胞浸潤;輕度缺血再灌注組(C組)病理改變較重度缺血再灌注組(B組)輕(P<0.01);殼寡糖預處理的重度及輕度缺血再灌注組(D組及E組)腸絨毛病理改變分別較重度及輕度缺血再灌注組(B組
3、和C組)明顯減輕(P值均<0.05)。②NF-κB蛋白表達情況:假手術組(A組)腸黏膜中僅見少量棕黃色顆粒(0.136±0.005),胞核未見NF-κB表達;重度缺血再灌注組(B組)腸黏膜棕黃色顆粒增多(0.218±0.015),陽性顆粒數(shù)和染色強度明顯高于假手術組(A組)(P<0.01),且有明顯的核轉位;輕度缺血再灌注組(C組)腸黏膜 NF-κB表達(0.170±0.003)較重度缺血再灌注組(B組)弱(P<0.01);殼寡糖預處理
4、的重度缺血再灌注組(D組)(0.181±0.010)和殼寡糖預處理的輕度缺血再灌注組(E組)(0.156±0.004)的回腸黏膜NF-κB表達分別弱于重度缺血再灌注組(B組)和輕度缺血再灌注組(C組)(P值均<0.05)。③NF-κB mRNA表達情況:重度缺血再灌注組(B組)(0.702±0.053)和輕度缺血再灌注組(C組)(0.547±0.053)NF-κB mRNA表達值均高于假手術組(A組)(0.371±0.052)(P值均<
5、0.01);殼寡糖預處理的重度缺血再灌注組(D組)(0.605±0.052)和殼寡糖預處理的輕度缺血再灌注組(E組)(0.467±0.111)NF-κB mRNA表達值均低于重度缺血再灌注組(B組)和輕度缺血再灌注組(C組)(P值均<0.01)。
結論:⑴與對照組比較,殼寡糖預處理組腸道粘膜損傷明顯減輕,提示殼寡糖對缺血再灌注腸黏膜有保護作用。⑵殼寡糖預處理組NF-κB mRNA及NF-κB蛋白表達水平均低,提示殼寡糖對大鼠回
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