天麻提取物對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、隨著人口老齡化的加劇，腦血管疾病已成為一個倍受社會關(guān)注的問題，據(jù)世界衛(wèi)生組織調(diào)查表明，腦血管意外引起的死亡率占所調(diào)查的57個國家死亡總?cè)藬?shù)的11.3％，僅次于癌癥和心肌梗死，而缺血性腦血管損傷是腦血管疾病最主要的病種，在我國，其死亡率僅次于惡性腫瘤，嚴(yán)重危害人類的健康。目前相應(yīng)治療藥物的開發(fā)以鈣拮抗劑、抗血小板藥、溶栓劑等為主，但療效仍不能令人滿意。近代藥理學(xué)研究表明天麻具有擴張血管，增強血管彈性，改善基底動脈供血的作用，臨床亦報道天麻

2、可以明顯改善與腦供血不足有關(guān)的老年癡呆的癥狀。我們前期的研究表明：天麻總提物及天麻乙酸乙酯提取物能抑制細(xì)胞外Ca2+內(nèi)流和細(xì)胞內(nèi)Ca2+釋放，而Ca2+超載是缺血性腦血管損傷的重要機制之一，故本研究通過復(fù)制大鼠腦缺血再灌注損傷模型，探討天麻總提物和天麻乙酸乙酯提取物(合稱天麻提取物)對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。 方法：1.天麻的提取與分離應(yīng)用乙醇提取，乙酸乙酯萃取的方法，制備實驗用藥。2.大鼠腦缺血再灌注損傷模型的復(fù)制參照Lo

3、nga、Kuga等及國內(nèi)報道的方法，采用頸外動脈插入線栓法造模。利用神經(jīng)病學(xué)檢查和TTC染色法判斷大鼠造模是否成功。3.天麻提取物對腦缺血再灌注損傷模型大鼠神經(jīng)病學(xué)的影響參照經(jīng)修改的Bederson評分法作為評分標(biāo)準(zhǔn)。4.天麻提取物對腦缺血再灌注損傷模型大鼠體質(zhì)量的影響體質(zhì)量下降的比率=(術(shù)前體重-術(shù)后體重)/術(shù)前體重×100％ 5.天麻提取物對腦缺血再灌注損傷模型大鼠血清中SOD和MDA的影響采用化學(xué)比色法檢測血清SOD活性和MDA含

4、量。6.天麻提取物對腦缺血再灌注損傷模型大鼠腦指數(shù)和腦組織內(nèi)水分含量的影響采用干濕重法測定腦組織內(nèi)水分含量。腦指數(shù)=腦濕重/體質(zhì)量(mg/g)。7.天麻提取物對腦缺血再灌注損傷模型大鼠腦梗塞體積的影響采用TTC染色，Motic Images Plus 2.0顯微圖象分析系統(tǒng)計算梗塞體積。8.天麻提取物對腦缺血再灌注損傷模型大鼠腦組織病理學(xué)的影響采用HE染色觀察腦缺血再灌注損傷模型大鼠腦組織的病理改變；免疫組織化學(xué)法測定腦組織內(nèi)CaMKI

5、I表達(dá)。 結(jié)果：1.天麻的提取與分離天麻原藥材共5000g，得醇提總浸膏467.7g，取出162.7g總浸膏作為天麻總提物備用，剩余305g總浸膏用乙酸乙酯萃取得乙酸乙酯提取物33.28g。2.大鼠腦缺血再灌注損傷模型的復(fù)制大鼠腦缺血再灌注損傷模型復(fù)制成功，神經(jīng)病學(xué)評分為1.75±0.27(分)水腫修正后腦梗塞體積為60.35±44.40(×10-6mm3)，梗塞率為18.24％。3.天麻提取物對腦缺血再灌注損傷模型大鼠神經(jīng)病學(xué)

6、的影響天麻提取物能明顯改善模型大鼠的神經(jīng)病學(xué)癥狀，其中天麻乙酸乙酯提取物高劑量組、低劑量組與模型組比較P<0.01，天麻總提物組與模型組比較P<0.05。4.天麻提取物對腦缺血再灌注損傷模型大鼠體質(zhì)量的影響天麻提取物對模型大鼠體質(zhì)量的下降也有所改善，其中天麻乙酸乙酯提取物高劑量組與模型組比較P<0.05，天麻總提物組與模型組比較P=0.062(接近0.05)。5.天麻提取物對腦缺血再灌注損傷模型大鼠血清中SOD和MDA的影響天麻提取物有

7、升高模型大鼠血清SOD活性，降低MDA含量的趨勢。(1)SOD活性變化：天麻乙酸乙酯提取物高劑量組、低劑量組與模型組比較P=0.080。(2)MDA含量變化：天麻乙酸乙酯提取物高劑量組、低劑量組與模型組比較P=0.088。6.天麻提取物對腦缺血再灌注損傷模型大鼠腦指數(shù)和腦組織水分含量的影響天麻乙酸乙酯提取物高劑量組與模型組比較：腦指數(shù)P=0.059；腦組織內(nèi)水分含量P<0.05。其余各給藥組與模型組比較均能降低模型大鼠腦指數(shù)和腦組織水分

8、含量，但結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)意義。7.天麻提取物對腦缺血再灌注損傷模型大鼠腦梗塞體積的影響天麻提取物能明顯縮小模型大鼠的腦梗塞體積，其中天麻乙酸乙酯提取物高劑量組、低劑量組、天麻總提物組與模型組比較P<0.05。8.天麻提取物對腦缺血再灌注損傷模型大鼠腦組織病理學(xué)的影響 (1)天麻提取物能減輕模型大鼠腦組織神經(jīng)細(xì)胞腫脹，減少嗜中性粒細(xì)胞浸潤。(2)天麻提取物能明顯增強模型大鼠腦組織CaMK II的表達(dá)，其中天麻總提物組與模型組比較尸<0.01，

9、天麻乙酸乙酯提取物高劑量組、低劑量組與模型組比較P<0.05。 結(jié)論：1.應(yīng)用乙醇提取，乙酸乙酯萃取的方法對天麻進(jìn)行提取分離，可較好地得到實驗用藥。2.大鼠腦缺血再灌注損傷模型復(fù)制成功，可用此方法復(fù)制實驗用動物模型。3.天麻提取物能夠明顯改善模型大鼠的神經(jīng)病學(xué)癥狀。4.天麻提取物能夠改善模型大鼠體質(zhì)量的下降。5.天麻提取物能在一定程度上起到抗氧化作用，減輕自由基引起的腦缺血損傷。6.天麻提取物能在一定程度上減輕腦缺血再灌注損傷引