皂角提取物對(duì)急性腦缺血再灌注大鼠的保護(hù)作用及其機(jī)制研究.pdf

1、[目的]通過制備大鼠急性腦缺血再灌注(Ischemi a Reperfusion，I/R)模型，觀察不同劑量皂角提取物口服給藥后對(duì)大鼠神經(jīng)功能損傷改變、腦梗塞體積、血清丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量、腦組織髓過氧化物酶(Myeloperoxidase，MPO)和一氧化氮(Nitric Oxide，NO)含量的影響，以及對(duì)腦組織中腫瘤壞死因子α(Tumor Necrosis Factot-[alpha]，TNF-α)

2、和核因子к appaB(Nuclear Factor kappaB，NF-кB)表達(dá)的影響，從而評(píng)價(jià)皂角提取物對(duì)于腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制，探討其作為腦缺血性疾病治療藥物的可能性。 [方法]采用線栓致大腦中動(dòng)脈阻塞法(Middle Cerebral Artery Occlusion，MCAO)制備大鼠急性局灶性腦I/R損傷模型。將SD雄性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組，腦缺血再灌注損傷模型組(陰性對(duì)照組)，復(fù)方丹參組(陽性對(duì)照組，

3、32-mg/kg·d<'-1>)，皂角提取物大、中、小劑量(150mg/kg·d<'-1>，75mg/kg·d<'-1>，38mg-ml/kg·d<'-1>)組。用藥組手術(shù)前連續(xù)給藥3天，然后手術(shù)造模，假手術(shù)組僅分離右側(cè)頸總動(dòng)脈(Commorl Carotid Artery，CCA)、頸外動(dòng)脈(External CarotidArtery，ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(Internal Carotid Artery，ICA)，然后縫合傷口。各組大

4、鼠分別于手術(shù)后2小時(shí)拔線實(shí)現(xiàn)腦血流再灌注，24小時(shí)后觀察神經(jīng)功能評(píng)分，取腦組織觀察病理學(xué)變化，計(jì)算各組腦梗死灶體積，比較各組大鼠腦組織勻漿中NO、MPO含量以及血清中MDA的含量，觀察各組大鼠腦組織中TNF-α以及NF-KappaB_的表達(dá)。其中，腦組織形態(tài)學(xué)變化采用光學(xué)顯微鏡觀察法：腦梗死體積采用氯化三苯基四氮唑(2，3，5-Triphenylte‘trazolium Chloride，TTC)染色劑對(duì)腦組織染色觀察：NO、MPO及M

5、DA含量測(cè)定均采用根據(jù)特定方法設(shè)計(jì)的試劑盒檢測(cè)：TNF-α以及NF-KappaB的表達(dá)采用免疫組織化學(xué)方法觀察。 [結(jié)果]通過MACO法成功制備SD大鼠的腦I/R模型，再灌注24小時(shí)后模型組大鼠出現(xiàn)明顯行為學(xué)改變，腦組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)也有明顯改變，并使NO生成顯著增加、炎癥反應(yīng)及脂質(zhì)過氧化反應(yīng)明顯活躍；而皂角提取物各劑量組及復(fù)方丹參對(duì)照組大鼠神經(jīng)功能明顯優(yōu)于腦缺血再灌注損傷模型組(P<0.01，P<0.05)；且各治療組大鼠腦梗死體

6、積亦較模型組明顯降低(P<0.01)；其次，皂角提取物各劑量組及復(fù)方丹參對(duì)照組大鼠血清中MDA含量、腦組織勻漿中NO、MPO含量以及腦組織中TNF-α和NF-к appaB的表達(dá)也明顯降低(P<0.01，P<0.05)。 [結(jié)論]皂角提取物能有效改善大鼠腦I/R后神經(jīng)功能，不同程度地減小I/R損傷腦梗死體積，并對(duì)腦組織損傷后的組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)有保護(hù)作用。其作用機(jī)制可能與清除受損腦組織中的氧自由基、抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)、減少NO的