黃芪提取物對大鼠全腦缺血再灌注后炎癥損傷的作用及機理研究.pdf

1、黃芪提取物(ExtractofAstragalus，EA)是從中藥黃芪中提取的有效組分，主要由有效部位黃芪總苷(Astragalosides，AST)和黃芪多糖(AstragalusPolysaccharides，APS)組成。本文在本課題組多年研究黃芪工作的基礎上，建立大鼠腦缺血－再灌注(Ischemia/Reperfusion，I/R)損傷模型，在觀察EA對大鼠全腦缺血－再灌注損傷保護的同時，研究核因子κB(NuclearFacto

2、rkappaB，NF-κB)、細胞間粘附因子-1(IntercellularAdhesionMolecule-1，ICAM-1)、腫瘤壞死因子-α(TumorNecrosisFactor-alpha，TNF-α)、白細胞介素-1β(Interleukin-1β，IL-1β)、白細胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)等炎癥因子的變化，并通過檢測髓過氧化物酶(Myeloperoxidase，MPO)反映PMNs的浸潤情況，以期

3、探討NFκB及多種炎癥介質在腦缺血再灌注炎癥損傷的可能作用、EA對缺血再灌注后炎癥反應的影響及可能機制，為缺血性腦血管病的抗炎治療提供理論依據(jù)。 1EA對全腦缺血再灌注24h炎癥損傷的影響 在大鼠全腦缺血(四動脈閉塞)20min再灌注24h實驗中，EA三個劑量組再灌注24h垂直板試驗的級別均有不同程度的提高，EA(40，80mg/kg)可明顯延長再灌注24h平衡棒試驗的維持時間；EA(20，40，80mg/kg)均可降低

4、缺血再灌注后外周靜脈血白細胞總數(shù)，EA能有效的升高外周血淋巴細胞百分比，降低非淋巴細胞百分比，EA(40mg/kg)組與I/R組比較有顯著性差異(P＜0.05)；EA(20，40，80mg/kg)均可不同程度減輕HE染色切片中大腦皮質神經元缺血性損傷。生化實驗測定顯示EA(20，40，80mg/kg)均能明顯降低缺血再灌注后升高的腦組織皮質、海馬MPO活性。放射免疫法顯示EA(40、80mg/kg)可降低缺血再灌注后腦組織皮質IL-1β

5、含量，EA(20、40、80mg/kg)可降低腦組織皮質TNF-α含量；EA(40、80mg/kg)可降低缺血再灌注后血清IL-1β、IL-6含量，EA(20、40、80mg/kg)可降低血清TNF-α含量。免疫組化結果表明EA(20、40、80mg/kg)能下調缺血再灌注后升高ICAM-1和TNF-α表達；EA(40、80mg/kg)可降低缺血再灌注后皮層組織核蛋白NF-κBp65表達。以上實驗結果提示，EA對全腦缺血再灌注急性炎癥損

6、傷有一定的保護作用。 2EA對全腦缺血再灌注大鼠皮層組織NF-κB表達的影響 在大鼠全腦缺血(四動脈閉塞)20min再灌注6h實驗中，WesternBlotting檢測NF-κBp65及其抑制蛋白IκBα皮層組織中的含量，EA(40mg/kg)可升高缺血再灌注后皮層組織胞漿蛋白IκBα含量；EA(40mg/kg)可減少缺血再灌注后皮層組織核蛋白NF-κBp65含量；EA(40mg/kg)可升高大鼠全腦缺血再灌注后皮層組織

7、胞漿蛋白NF-κBp65含量。以上實驗結果提示，EA可抑制大鼠全腦缺血再灌注后NFκBp65活化。 結論1.EA對大鼠全腦缺血再灌注損傷有一定的保護作用，其機制可能與抑制缺血再灌注后IL-1β、TNF-α、IL-6的合成與釋放有關。 2.NFκB參與了大鼠腦缺血再灌注損傷過程，其作用機制可能在于通過調節(jié)ICAM-1、TNF-α等炎癥因子的表達，進而增加PMNs在損傷腦組織中的浸潤。EA的腦保護機制可能與抑制大鼠全腦缺血再