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文檔簡介
1、由血吸蟲引起的血吸蟲病是對人類健康威脅僅次于瘧疾的全球第二大寄生蟲病,其流行于全球78個國家和地區(qū),至少2.61億人和大量牲畜被感染,受威脅人口逾7億(世界衛(wèi)生組織,2015年1月)。在六種可以感染人的血吸蟲中,只有日本血吸蟲在我國流行,但它卻是所有血吸蟲中生物學特性最復雜、危害最嚴重、防治難度最大的一種,也是唯一一種人獸共患寄生蟲。吡喹酮是治療血吸蟲病的唯一特效藥,但無法防止反復感染的弊端和產生抗藥性的風險一直提醒著人們單一藥物無法從
2、根本上控制疫情,而且至今為止尚無可成功防治血吸蟲病的疫苗問世。多年來針對血吸蟲蟲體與宿主免疫系統(tǒng)相互接觸的結構而設計的疫苗研究均以失敗而告終。
日本血吸蟲成蟲寄生于終宿主的肝門靜脈、腸系膜靜脈,直接與宿主的免疫系統(tǒng)相接觸,但它們的已知最長寄生年限卻長達46年之久,說明其具有一整套成功逃避宿主免疫識別的策略。包括抗原變異、表膜偽裝等在內的寄生蟲的免疫逃避假說在多年前即被研究者們所提出,但具體機制直至今日仍尚不清楚。
本
3、課題組之前的研究發(fā)現(xiàn),Sjc23這一曾被寄予厚望的疫苗候選抗原與副肌球蛋白一樣可結合人非特異性IgG的Fc片段,實際是一個主動參與免疫調節(jié)的免疫逃避相關分子,其本身不適宜作為疫苗抗原。因此,日本血吸蟲還有哪些蛋白質利用類似的機制參與免疫逃避一直是本課題組關注的問題。在本研究中,我們首先使用免疫熒光的方法證明日本血吸蟲蟲體表面具有吸附宿主非特異性免疫球蛋白的能力。其次使用固定化人免疫球蛋白G、M、E為誘餌蛋白釣取了成蟲蛋白質中的可結合組分
4、并利用液相色譜-串聯(lián)質譜聯(lián)用技術(LC-MS/MS)對蛋白質序列進行了鑒定,獲得了由437個蛋白質組成的日本血吸蟲成蟲免疫球蛋白結合蛋白質組,其中與人IgG結合的蛋白有243個,與人IgM結合的蛋白有210個,與人IgE結合的蛋白有134個,且與IgG和IgM結合的蛋白質組中過半蛋白都具有雙重結合能力。我們對所得到的蛋白質進行了生物信息學分析,基因本體(GO)分析發(fā)現(xiàn)其中相當一部分蛋白質與蟲體表膜相關,表達譜芯片數(shù)據(jù)分析表明其中多數(shù)蛋白
5、質在終宿主體內寄生期高表達,序列分析發(fā)現(xiàn)了免疫球蛋白結構域、EF-hand結構域等具有代表性的序列特征。我們挑選出十個各具代表性的蛋白質并對它們與五種人免疫球蛋白和兩種家畜IgG的結合性能進行了分析,發(fā)現(xiàn)它們都結合人IgG的Fc片段,而具有IgG、IgM雙重結合能力的蛋白質用各異的方式結合兩種免疫球蛋白。此外,本研究發(fā)現(xiàn)C1q結合蛋白(C1qBP)具有比結合人C1q更強的IgG結合能力,而且人IgG可顯著抑制人C1q與C1qBP的結合,
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