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文檔簡介
1、目的:闡明飼料中添加煙酸對染矽塵大鼠不同時間點肺組織腫瘤壞死因子-α、轉(zhuǎn)化生長因子-β1和核因子-κB表達以及Ⅰ、Ⅲ型膠原形成的影響。 方法:本實驗采用清潔級Wistar大鼠144只,隨機將之分為3個實驗組,即對照組(氣管滴入0.9%NaCl,普飼)、染矽塵組(氣管滴入50mg/ml矽塵混懸液,普飼)和煙酸組(氣管滴入50mg/ml矽塵混懸液,2.5%(wt/wt)煙酸飼料)。氣管暴露法建立大鼠矽肺模型。模型建立前3d開始,煙酸
2、組給予含2.5%(wt/wt)煙酸的飼料,如此直到將動物處死。模型建立后,每組分1d、3d、7d、14d、21d和28d6個時間點分別取8只大鼠將其處死。計算肺臟器系數(shù),用肺組織普通石蠟切片HE染色觀察大鼠肺組織矽結(jié)節(jié)。用高效液相色譜法測定血清中煙酸含量,用組織芯片儀制作組織芯片,用免疫組織化學SP法觀察組織芯片TNF-α、TGF-β1、NF-κB、的表達,天狼猩紅染色法結(jié)合偏振光顯微鏡觀察Ⅰ、Ⅲ型膠原。用Image-ProPlusVe
3、rsion5.0forwindowsTM圖像分析系統(tǒng)進行定量分析。 結(jié)果:(1)煙酸組的血漿煙酸濃度各時點都高與對照組和染矽塵組,均有顯著性差異。(2)染矽塵大鼠各時間點肺組織臟器系數(shù)高于對照組;各時間點煙酸組與染矽塵組間均無顯著性差異。(3)在各時點,染矽塵組TNF-α陽性細胞積分光密度均高于對照組,1d時開始升高,7d時達高峰。在3d、7d、14d和21d有差異顯著性。煙酸組各時間點的TNF-α陽性細胞積分光密度均低于染矽塵
4、組,7d時有差異顯著性。(4)染矽塵組大鼠肺組織TGF-β1積分光密度7天時大量增加,與對照組比較有顯著性差異,14d-28d時開始下降,但仍有顯著性差異。與染矽塵組相比,煙酸組陽性細胞積分光密度均下降,14天時與矽肺組比較有顯著性差異。(5)與對照組比較,染矽塵組不同時間點肺組織NF-κB陽性細胞積分光密度均高于對照組,除1d、7d均有差異顯著性。1d時開始升高,14d時達高峰。煙酸組于各時間點的NF-κB陽性細胞積分光密度低于染矽塵
5、組,14d和21d有差異顯著性。(6)染矽塵組各時間點Ⅰ型膠原面積百分與對照組比較呈進行性增加,3d開始明顯升高,高峰是在28d時間點,7d、14d、21d和28d時有顯著性差異。煙酸組Ⅰ型膠原面積百分比于各時間點明顯低于染矽塵組,28d時有顯著性差異。染矽塵組與對照組Ⅲ型膠原面積百分比相比,各時間點的百分比均高于對照組,除1d、3d外均有顯著性差異。Ⅲ型膠原于大鼠染矽塵后1d開始升高,28d時達高峰。煙酸組與染矽塵組比較,除1d外,其
6、他時間點煙酸組Ⅲ型膠原面積百分比減小,21d和28d時有顯著性差異。 結(jié)論:本實驗發(fā)現(xiàn):1.飲食中添加煙酸能夠明顯提高血漿煙酸濃度。2.煙酸能夠抑制矽塵誘導的肺組織TNF-α、TGF-β1、NF-κB的表達和Ⅰ、Ⅲ型膠原的增加有抑制作用。3.在矽肺的發(fā)生過程中,NF-κB、TNF-α、TGF-β1表達與纖維化階段Ⅰ、Ⅲ型膠原的形成可能有一定的相關(guān)性。首先,TNF-α、TGF-β1、NF-κB的表達先于Ⅰ、Ⅲ膠原的大量增生;其次,
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