NF-κB、IL、TNF-α與VEGF在急性肺損傷中表達的研究.pdf

1、目的：急性肺損傷(acute lung injury,ALI)是以肺血管內皮細胞及肺泡上皮細胞廣泛損傷為病理特征的一種失控的炎癥反應，是急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome，ARDS)的早期階段，臨床上表現(xiàn)為肺部彌漫性滲出和難以糾正的低氧血癥。ALI是全身炎癥反應綜合征(systemicinflammatory response syndrome，SIRS)所致多器官功能障礙綜合征(

2、multiple organ dysfunction syndrome，MODS)的肺部表現(xiàn)，體內失控性釋放的大量炎癥介質與ALI的發(fā)病密切相關。近年研究表明，核轉錄因子-κB(nuclear factor-κB，NF-κB)與炎癥反應密切相關，多種炎癥介質基因的啟動子和增強子中存在一個或多個κB序列，如白細胞介素(interleukin，IL)家族、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor，TNF-α)?；罨腘F

3、-κB可單獨或與其他轉錄因子協(xié)同參與上述介質基因的誘導表達。有研究表明，血管內皮生長因子(vascular endothelialgrowth factor，VEGF)能夠促進肺泡上皮的增殖，加速受損上皮恢復。并且VEGF能夠發(fā)揮血管擴張作用，當ARDS發(fā)生時，肺泡毛細血管膜受損后，VEGF又會促進肺水腫的發(fā)生。但是，目前對于VEGF在ALI究竟是一個有益因素還是有害因素尚存在爭議。 方法：1、經(jīng)大鼠尾靜脈注射LPS造模。按LP

4、S不同劑量2、4、6、8 mg、kg分組，并設生理鹽水對照組，3、6小時兩個時相點腹腔注射異戊巴比妥，開胸、左心取血處死動物，分離血清。結扎并切取正常對照組和LPS組大鼠右肺最小葉。提取RNA和細胞總蛋白。采用RT-PCR檢測NF-κB、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、VEGF與TNF-α mRNA表達水平，western印記檢測VEGF與TNF-α蛋白表達水平。 2、用LPS 4 mg/kg造模，3天和6d后各處死一組大鼠

5、，取肺，提取mRNA和蛋白檢測VEGF表達。 結果：1.LPS造模效果：LPS致傷以后，大鼠呼吸頻率增快或呼吸困難；隨著LPS劑量增大，呼吸困難程度加重。當LPS為6 mg/kg時，出現(xiàn)呼吸窘迫，劑量達到8mg/kg時，常伴有粉紅色泡沫樣肺水腫液由鼻腔溢出，死亡率明顯升高；小劑量LPS(2mg/kg)對大鼠的PaO2影響不大；大劑量LPS可以誘導大鼠PaO2顯著降低。 2.NF-κB、IL-4、IL-6、IL-10、IL

6、-13、VEGF與TNF-α的表達：NF-κB的表達水平在正常對照組中的表達水平最低，隨著LPS劑量的增加，NF-κB的表達水平顯著增加。IL-4、IL-6、IL-13的表達水平隨著L-PS劑量的增加而顯著升高。IL-10的表達：在正常對照組中的表達水平最高，在模型組中，隨著給藥劑量的增加，表達水平顯著降低；VEGF的表達水平在正常對照組中最高，隨著LPS劑量的增加，VEGF的表達水平顯著降低;TNF-α在正常對照組的表達中的表達水平最

7、低，隨著LPS劑量的增加，其表達水平顯著增高。 3.LPS誘導急性肺損傷后不同時間VEGF表達變化： 在損傷早期，可見VEGF的表達水平明顯下降，在第3天，可見模型動物有較為嚴重的呼吸困難，VEGF的表達水平繼續(xù)下降，到第6天，模型組大鼠一般情況明顯好轉，VEGF的表達水平明顯升高，甚至高于正常對照組。結論： 1. 采用LPS進行急性肺損傷造模效果好，成?？?，重復性強。 2. NF-κB的表達水平隨LPS