EZH2、Bmi-1、Survivin及Survivin-3B基因在膀胱移行細胞癌中的表達及其意義.pdf

1、目的：應用實時定量PCR方法檢測EZH2、Bmi-1、Survivin及Survivin-3B基因在膀胱移行細胞癌中的表達并探討其臨床意義，初步揭示EZH2、Bmi-1、Survivin及異構體Survivin-3B在膀胱移行細胞癌中的作用及臨床應用價值。
　　 方法：1.選取2006年3月至2009年6月我院手術切除的膀胱移行細胞癌新鮮標本70例作為實驗組，正常膀胱組織15例作為對照。應用實時定量PCR方法檢測EZH2和Bmi

2、-1基因的表達情況。實驗組中按2004年WHO/ISUP分級標準分組，低度惡性傾向尿路上皮乳頭狀腫瘤（PUNLMP）5例，低分級乳頭狀尿路上皮癌23例，高分級乳頭狀尿路上皮癌42例；按照2002年TNM分期標準分組，表淺性膀胱癌（Tis、Ta、T1）36例，浸潤性膀胱癌（T2-T4）34例。2.選取于2009年3月至2009年10月在蘇州大學附屬第一醫(yī)院住院的膀胱移行細胞癌患者尿液39例。按照2004年WHO/ISUP分級標準分組，低分

3、級乳頭狀尿路上皮癌15例，高分級乳頭狀尿路上皮癌24例；按照2002年TNM分期標準分組，表淺性膀胱癌（Tis、Ta、T1）22例，浸潤性膀胱癌（T2-4）17例。取同期健康志愿者尿液13例作為對照組。
　　 結果：
　　 1.EZH2基因在膀胱移行細胞癌組織和尿液中的表達。
　　 （1）EZH2的mRNA表達在正常對照組織中非常低為0.016±237，在膀胱癌組織中的表達量為0.145±0.188，兩組比較差異

4、有顯著統(tǒng)計學差異，P=0.000。EZH2在不同病理分級及臨床分期中的表達量為：PUNLMP組為0.108±0.188，低分級組為0.074±0.098，高分級組為0.189±0.214；表淺性膀胱癌組為0.115±0.197，浸潤性膀胱癌組為0.181±0.173。EZH2的表達量在低分級和高分級組以及表淺性和浸潤性組相比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。（2）EZH2的mRNA在健康志愿者尿液中幾乎不表達，表達量為0.002±

5、0.003，膀胱癌組的表達量為0.038±0.060，差異有顯著統(tǒng)計學差異，P=0.000。在膀胱癌患者尿液中按不同病理分級及不同臨床分期中的表達量分別是：低分級組為0.01±0.016，高分級組為0.056±0.072；表淺性膀胱癌組為0.009±0.014，浸潤性膀胱癌組為0.081±0.077。在不同病理分級和臨床分期中EZH2的表達量逐步增高，且差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。同時平行檢測11例患者組織和尿液中EZH2的mRN

6、A表達，其組織與尿液中的表達相一致。
　　 2.Bmi-1基因在膀胱移行細胞癌組織和尿液中的表達。
　　 （1）Bmi-1的mRNA在正常對照組織中的表達量為0.175±0.097，在膀胱癌組織中的表達量為：0.689±0.793，兩組比較差異有顯著統(tǒng)計學差異，P=0.001。Bmi-1在不同病理分級及不同臨床分期中的表達量為：PUNLMP組為0.665±0.767，低分級組為0.496±0.455，高分級組為0.799

7、±0.926；表淺性膀胱癌組為0.551±0.499，浸潤性膀胱癌組為0.837±1.004。除PUNLMP組之外，Bmi-1的表達量隨病理分級和臨床分期的增加而增高，但差異無統(tǒng)計學意義。（2）Bmi-1的mRNA在健康志愿者和實驗組尿液中的表達量分別為0.030±0.037和0.073±0.079，差異有統(tǒng)計學意義P=0.029。Bmi-1在尿液中按不同病理分級及不同臨床分期中的表達量分別是：低分級組為0.044±0.005，高分級組

8、為0.091±0.167，表淺性膀胱癌組為0.041±0.039，浸潤性膀胱癌組為0.072±0.076，但差異均無統(tǒng)計學意義。
　　 3.Survivin和Survivin-3B在膀胱移行細胞癌組織中的表達。
　　 （1）Survivin和Survivin-3B的mRNA在正常對照組織中的表達量分別是0.241±0.209和0.006±0.007，在膀胱癌中的表達量分別為1.857±3.239和0.199±0.447，

9、與對照組相比差異均有統(tǒng)計學意義，P值為0.003和0.000。（2）Survivin在不同病理分級及不同臨床分期中的表達量為：PUNLMP組為0.267+0.337，低分級組為0.856±1.122，高分級組為2.609±3.938：表淺性膀胱癌組為0.873±1.270，浸潤性膀胱癌組為2.899±4.248，其Survivin的表達差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。（3）Survivin-3B在不同病理分級及不同臨床分期中的表達量

10、為：PUNLMP組為0.019±0.025，低分級組為0.096±0.129，高分級組為0.277±0.556：表淺性膀胱癌組為0.108±0.216，浸潤性膀胱癌組為0.295±0.589。Survivin-3B在PUNLMP、低分級和高分級組的表達相比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；且表淺性和浸潤性組相比，差異也有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　 結論：
　　 1.EZH2基因在正常人組織和尿液中幾乎不表達，

11、但在癌組織和尿脫落細胞中的表達量隨著病理分級和臨床分期增高而增加，呈明顯正相關，且癌組織與尿脫落細胞中EZH2的表達呈平行趨勢，提示EZH2表達越高，腫瘤的惡性程度越高，越有侵襲性。因此，EZH2基因轉錄的失調可能是在腫瘤干細胞水平調控了膀胱腫瘤的發(fā)生。
　　 2.Survivin基因在膀胱正常粘膜和膀胱移行細胞癌中均有表達，而Survivin-3B基因在正常組織中極低表達，且Surivin和Surivin-3B基因均隨著膀胱腫

12、瘤病理分級的增加和臨床分期的增高而表達逐漸增高，因此，Surivin和Survivn-3B基因在膀胱腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用，特別是Survivin-3B基因在Surivin基因異構體家族中可能是引起膀胱腫瘤凋亡失調的最重要的靶基因。
　　 3.EZH2、Bmi-1、Survivin和Survivin-3B基因均高表達可能預示TCC患者預后較差。
　　 4.應用實時定量PCR方法聯(lián)合檢測EZH2和異構體Survivi