EZH2、Bmi-1、Survivin及Survivin-3B基因在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的：應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)EZH2、Bmi-1、Survivin及Survivin-3B基因在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)并探討其臨床意義，初步揭示EZH2、Bmi-1、Survivin及異構(gòu)體Survivin-3B在膀胱移行細(xì)胞癌中的作用及臨床應(yīng)用價(jià)值。
　　 方法：1.選取2006年3月至2009年6月我院手術(shù)切除的膀胱移行細(xì)胞癌新鮮標(biāo)本70例作為實(shí)驗(yàn)組，正常膀胱組織15例作為對(duì)照。應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)EZH2和Bmi

2、-1基因的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)組中按2004年WHO/ISUP分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分組，低度惡性傾向尿路上皮乳頭狀腫瘤（PUNLMP）5例，低分級(jí)乳頭狀尿路上皮癌23例，高分級(jí)乳頭狀尿路上皮癌42例；按照2002年TNM分期標(biāo)準(zhǔn)分組，表淺性膀胱癌（Tis、Ta、T1）36例，浸潤(rùn)性膀胱癌（T2-T4）34例。2.選取于2009年3月至2009年10月在蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院住院的膀胱移行細(xì)胞癌患者尿液39例。按照2004年WHO/ISUP分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分組，低分

3、級(jí)乳頭狀尿路上皮癌15例，高分級(jí)乳頭狀尿路上皮癌24例；按照2002年TNM分期標(biāo)準(zhǔn)分組，表淺性膀胱癌（Tis、Ta、T1）22例，浸潤(rùn)性膀胱癌（T2-4）17例。取同期健康志愿者尿液13例作為對(duì)照組。
　　 結(jié)果：
　　 1.EZH2基因在膀胱移行細(xì)胞癌組織和尿液中的表達(dá)。
　　 （1）EZH2的mRNA表達(dá)在正常對(duì)照組織中非常低為0.016±237，在膀胱癌組織中的表達(dá)量為0.145±0.188，兩組比較差異

4、有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P=0.000。EZH2在不同病理分級(jí)及臨床分期中的表達(dá)量為：PUNLMP組為0.108±0.188，低分級(jí)組為0.074±0.098，高分級(jí)組為0.189±0.214；表淺性膀胱癌組為0.115±0.197，浸潤(rùn)性膀胱癌組為0.181±0.173。EZH2的表達(dá)量在低分級(jí)和高分級(jí)組以及表淺性和浸潤(rùn)性組相比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。（2）EZH2的mRNA在健康志愿者尿液中幾乎不表達(dá)，表達(dá)量為0.002±

5、0.003，膀胱癌組的表達(dá)量為0.038±0.060，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P=0.000。在膀胱癌患者尿液中按不同病理分級(jí)及不同臨床分期中的表達(dá)量分別是：低分級(jí)組為0.01±0.016，高分級(jí)組為0.056±0.072；表淺性膀胱癌組為0.009±0.014，浸潤(rùn)性膀胱癌組為0.081±0.077。在不同病理分級(jí)和臨床分期中EZH2的表達(dá)量逐步增高，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。同時(shí)平行檢測(cè)11例患者組織和尿液中EZH2的mRN

6、A表達(dá)，其組織與尿液中的表達(dá)相一致。
　　 2.Bmi-1基因在膀胱移行細(xì)胞癌組織和尿液中的表達(dá)。
　　 （1）Bmi-1的mRNA在正常對(duì)照組織中的表達(dá)量為0.175±0.097，在膀胱癌組織中的表達(dá)量為：0.689±0.793，兩組比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P=0.001。Bmi-1在不同病理分級(jí)及不同臨床分期中的表達(dá)量為：PUNLMP組為0.665±0.767，低分級(jí)組為0.496±0.455，高分級(jí)組為0.799

7、±0.926；表淺性膀胱癌組為0.551±0.499，浸潤(rùn)性膀胱癌組為0.837±1.004。除PUNLMP組之外，Bmi-1的表達(dá)量隨病理分級(jí)和臨床分期的增加而增高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（2）Bmi-1的mRNA在健康志愿者和實(shí)驗(yàn)組尿液中的表達(dá)量分別為0.030±0.037和0.073±0.079，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P=0.029。Bmi-1在尿液中按不同病理分級(jí)及不同臨床分期中的表達(dá)量分別是：低分級(jí)組為0.044±0.005，高分級(jí)組

8、為0.091±0.167，表淺性膀胱癌組為0.041±0.039，浸潤(rùn)性膀胱癌組為0.072±0.076，但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3.Survivin和Survivin-3B在膀胱移行細(xì)胞癌組織中的表達(dá)。
　　 （1）Survivin和Survivin-3B的mRNA在正常對(duì)照組織中的表達(dá)量分別是0.241±0.209和0.006±0.007，在膀胱癌中的表達(dá)量分別為1.857±3.239和0.199±0.447，

9、與對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P值為0.003和0.000。（2）Survivin在不同病理分級(jí)及不同臨床分期中的表達(dá)量為：PUNLMP組為0.267+0.337，低分級(jí)組為0.856±1.122，高分級(jí)組為2.609±3.938：表淺性膀胱癌組為0.873±1.270，浸潤(rùn)性膀胱癌組為2.899±4.248，其Survivin的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。（3）Survivin-3B在不同病理分級(jí)及不同臨床分期中的表達(dá)量

10、為：PUNLMP組為0.019±0.025，低分級(jí)組為0.096±0.129，高分級(jí)組為0.277±0.556：表淺性膀胱癌組為0.108±0.216，浸潤(rùn)性膀胱癌組為0.295±0.589。Survivin-3B在PUNLMP、低分級(jí)和高分級(jí)組的表達(dá)相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；且表淺性和浸潤(rùn)性組相比，差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.EZH2基因在正常人組織和尿液中幾乎不表達(dá)，

11、但在癌組織和尿脫落細(xì)胞中的表達(dá)量隨著病理分級(jí)和臨床分期增高而增加，呈明顯正相關(guān)，且癌組織與尿脫落細(xì)胞中EZH2的表達(dá)呈平行趨勢(shì)，提示EZH2表達(dá)越高，腫瘤的惡性程度越高，越有侵襲性。因此，EZH2基因轉(zhuǎn)錄的失調(diào)可能是在腫瘤干細(xì)胞水平調(diào)控了膀胱腫瘤的發(fā)生。
　　 2.Survivin基因在膀胱正常粘膜和膀胱移行細(xì)胞癌中均有表達(dá)，而Survivin-3B基因在正常組織中極低表達(dá)，且Surivin和Surivin-3B基因均隨著膀胱腫

12、瘤病理分級(jí)的增加和臨床分期的增高而表達(dá)逐漸增高，因此，Surivin和Survivn-3B基因在膀胱腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用，特別是Survivin-3B基因在Surivin基因異構(gòu)體家族中可能是引起膀胱腫瘤凋亡失調(diào)的最重要的靶基因。
　　 3.EZH2、Bmi-1、Survivin和Survivin-3B基因均高表達(dá)可能預(yù)示TCC患者預(yù)后較差。
　　 4.應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR方法聯(lián)合檢測(cè)EZH2和異構(gòu)體Survivi