癌癥患者遺傳不穩(wěn)定性的體內(nèi)外研究及其與四個(gè)DNA修復(fù)相關(guān)蛋白的關(guān)系.pdf

1、本論文主要用彗星試驗(yàn)和微核試驗(yàn)檢測(cè)肺癌和乳腺癌患者遺傳損傷的背景值和由輻射引起的遺傳損傷,來評(píng)價(jià)肺癌和乳腺癌患者的遺傳不穩(wěn)定性,并觀察這兩種癌癥患者在遺傳穩(wěn)定性上的個(gè)體差異.同時(shí)還用western blotting試驗(yàn)檢測(cè)肺癌和乳腺癌患者.ATM、DNA連接酶Ⅲ、DNA連接酶Ⅳ和XPF四個(gè)蛋白的表達(dá)水平.然后分析肺癌和乳腺癌患者遺傳不穩(wěn)定性與四個(gè)DNA修復(fù)相關(guān)蛋白表達(dá)水平之間的關(guān)系.本研究分兩個(gè)階段完成: 第一階段:用彗星試驗(yàn)、

2、微核試驗(yàn)和hprt基因突變?cè)囼?yàn)檢測(cè)放療期間癌癥患者的遺傳損傷,其目的是評(píng)價(jià)這三個(gè)試驗(yàn)在檢測(cè)遺傳不穩(wěn)定性中的靈敏度,并觀察癌癥患者對(duì)放療反應(yīng)的個(gè)體差異. 第二階段:肺癌和乳腺癌患者遺傳不穩(wěn)定性和DNA修復(fù)相關(guān)蛋白表達(dá)的研究. 本研究選擇了患有不同癌癥的患者24例,對(duì)照23例.病例組和對(duì)照組在年齡、性別和吸煙等方面均無顯著性差異(p>0.05).在癌癥患者接受放療前和放療累積劑量達(dá)到10、30和50Gy時(shí)采集新鮮外周血,對(duì)照

3、組僅采血一次.取1ml外周血分離淋巴細(xì)胞用于彗星試驗(yàn),其余血樣分別進(jìn)行培養(yǎng)用于微核試驗(yàn)和hprt基因突變?cè)囼?yàn),最后分析癌癥患者和對(duì)照組遺傳損傷背景值是否存在差異,并分析放療累積劑量和遺傳損傷之間的劑量一效應(yīng)關(guān)系. 研究得出如下結(jié)論： 1.癌癥患者在放療期間所產(chǎn)生的淋巴細(xì)胞遺傳損傷隨著累積放療劑量的增加而增加,并呈一定的劑量效應(yīng)關(guān)系.癌癥患者對(duì)放療的反應(yīng)存在較大的個(gè)體差異. 2.肺癌和乳腺癌患者自發(fā)的和由輻射引起的

4、遺傳不穩(wěn)定性均明顯高于對(duì)照組.肺癌和乳腺癌患者淋巴細(xì)胞對(duì)輻射的敏感性存在較大的個(gè)體差異. 3.彗星試驗(yàn)和微核試驗(yàn)是兩種快速、簡便、有效的檢測(cè)癌癥患者淋巴細(xì)胞自發(fā)的以及由輻射引起的遺傳不穩(wěn)定性的方法.這兩個(gè)方法均可用于癌癥患者放療前淋巴細(xì)胞放射敏感性的測(cè)定,可為癌癥患者治療方案的制定提供依據(jù). 4.無論肺癌或乳腺癌患者,和對(duì)照組相比,四個(gè)DNA修復(fù)相關(guān)蛋白表達(dá)均有不同程度的下降,但肺癌患者ATM、DNA連接酶III和XPF

5、三個(gè)DNA修復(fù)相關(guān)蛋白表達(dá)水平與對(duì)照組有明顯差異;而乳腺癌患者ATM、DNA連接酶Ⅲ、DNA連接酶Ⅳ和XPF四個(gè)DNA修復(fù)相關(guān)蛋白表達(dá)水平與對(duì)照組有明顯差異.因此,同一蛋白的表達(dá)水平在不同的癌癥患者中可能有差異. 5.癌癥患者DNA修復(fù)相關(guān)蛋白表達(dá)水平的降低可能與其遺傳不穩(wěn)定性的升高之間有一定的相關(guān)性,在本研究中也發(fā)現(xiàn)了一些相關(guān)性,但是由于遺傳不穩(wěn)定性的升高是一個(gè)受多方面因素影響的結(jié)果,而且與DNA修復(fù)相關(guān)的蛋白種類很多,所以很