ABCA1和CD68在膽囊壁中的表達及意義.pdf

1、膽囊膽固醇結(jié)石?。懯。┦且环N常見病，多發(fā)病，其發(fā)病機制目前為止尚未完全明確，有待進一步研究探索。隨著生活水平的提高，伴隨脂質(zhì)代謝紊亂導(dǎo)致的疾病增多，膽結(jié)石發(fā)病率也逐年增加。目前，膽固醇逆轉(zhuǎn)運(Reversecholesterol transport，RCT)是一個重要的研究課題，本實驗旨在通過研究脂質(zhì)轉(zhuǎn)運的重要調(diào)節(jié)蛋白三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1(ATP binding cassette transportA1，ABCA1)和反映周圍

2、組織脂質(zhì)代謝狀況的巨噬細(xì)胞在膽囊壁的表達水平，探討膽囊壁的脂質(zhì)吸收轉(zhuǎn)運功能和膽石病的發(fā)病機制。 目的： 1、觀察ABCA1在不同膽囊病理標(biāo)本中的表達和分布，探討其與膽囊壁脂質(zhì)轉(zhuǎn)運的關(guān)系。 2、觀察在不同膽囊病理標(biāo)本中CD68陽性的巨噬細(xì)胞分布、形態(tài)、密度和排列規(guī)律，分析其在膽囊壁脂質(zhì)轉(zhuǎn)運中的作用。 3、比較ABCA1在膽囊膽固醇結(jié)石病人與對照組膽囊粘膜中的表達水平，分析其與膽固醇結(jié)石形成之間的關(guān)系。

3、 4、比較CD68在膽囊膽固醇結(jié)石病人與對照組膽囊壁中的表達水平，分析其與膽固醇結(jié)石形成之間的關(guān)系。 5、比較ABCA1、CD68在膽囊膽固醇結(jié)石病人與對照組膽囊壁中的表達水平，分析ABCA1和CD68在膽囊壁脂質(zhì)轉(zhuǎn)運中的相關(guān)性，進一步探討膽囊膽固醇結(jié)石的發(fā)病機制。 方法： 1、標(biāo)本收集收集膽囊術(shù)后的病理標(biāo)本。 1.1實驗組：膽囊膽固醇結(jié)石病人34例，非結(jié)石性慢性膽囊炎合并肝膽管結(jié)石11例，膽固醇息肉8

4、例，膽囊結(jié)石并急性膽囊炎6例。 1.2對照組：選擇非膽囊結(jié)石病人膽囊標(biāo)本15例，病理診斷均為正?；蚪咏Ｄ懩?。 1.3所有病例均由HE染色光鏡下獲得病理診斷，無其他合并癥及明顯肝功能異常。 2、實驗方法。石蠟切片脫蠟至水，采用PV-9000即用型二步法免疫組織化學(xué)染色檢測ABCA1、CD68在實驗組和對照組膽囊標(biāo)本中的表達，ABCA1、CD68單克隆抗體的工作濃度均為1:200，以PBS代替一抗作陰性對照。

5、 3、統(tǒng)計處理。結(jié)果采用半定量積分法評判，數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，行X2檢驗。 結(jié)果： 1、ABCA1的表達及分布。 1.1 ABCA1主要在膽囊粘膜上皮細(xì)胞頂側(cè)表達，上皮細(xì)胞的基底側(cè)、粘膜下層、肌層及漿膜層無明顯表達。 1.2膽囊膽固醇結(jié)石病人的膽囊粘膜ABCA1表達低于對照組膽囊粘膜的表達，兩組進行半定量分析，具有統(tǒng)計學(xué)意義P＜0.005。 1.3膽固醇息肉組、膽囊結(jié)石并急性膽囊炎組的ABCA

6、1表達降低；與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異。 1.4非結(jié)石性慢性膽囊炎合并肝膽管結(jié)石組的ABCA1表達升高，與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。 2、CD68的表達及分布。 2.1 CD68主要在膽囊粘膜上皮細(xì)胞頂側(cè)表達，胞漿著色，細(xì)胞形態(tài)為細(xì)顆粒狀，呈密集分布；粘膜下層細(xì)胞大且為圓形或橢圓形，連接成片；肌層及漿膜層有散在分布，量少，細(xì)胞中等大小。 2.2膽囊膽固醇結(jié)石病人的膽囊粘膜CD68表達高于對照組膽囊粘膜的表達，

7、兩組進行半定量分析，具有統(tǒng)計學(xué)意義P＜0.05。 2.3非結(jié)石性慢性膽囊炎合并肝膽管結(jié)石組、膽固醇息肉組CD68表達升高，與對照組比較有統(tǒng)計學(xué)差異。 3、ABCA1、CD68兩因素間比較。 3.1膽囊膽固醇結(jié)石組和膽固醇息肉組病人ABCA1表達降低，CD68表達升高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義P＜0.05。 3.2非結(jié)石性慢性膽囊炎合并肝膽管結(jié)石組ABCA1、CD68陽性表達均升高，無統(tǒng)計學(xué)差異。 4、陰

8、性對照無表達。 結(jié)論： 1、ABCA1、CD68主要在膽囊粘膜上皮細(xì)胞頂側(cè)表達，說明膽囊粘膜上皮細(xì)胞具有吸收和轉(zhuǎn)運脂質(zhì)的功能。 2、ABCA1在膽固醇結(jié)石病人膽囊粘膜上皮細(xì)胞中表達減弱，可能在膽石病發(fā)病機制中起一定作用。 3、CD68在膽固醇結(jié)石病人膽囊粘膜上皮細(xì)胞中表達增強，與膽囊壁的脂質(zhì)轉(zhuǎn)運和膽結(jié)石的形成有關(guān)。 4、ABCA1與CD68在膽囊壁中的表達呈副相關(guān)性，脂質(zhì)調(diào)節(jié)蛋白ABCA1功能的下