藥用真菌-竹黃發(fā)酵蒽醌類(lèi)色素及其結(jié)構(gòu)的研究.pdf

1、竹黃作為一種極具開(kāi)發(fā)利用的藥用真菌，其成分中含有多種具有活性的天然色素，奉文以竹黃菌液體發(fā)酵天然色素為基本目的，研究了竹黃菌生物合成天然色素的條件及色素的分離純化工藝，結(jié)構(gòu)以及穩(wěn)定性。 通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)，確定竹黃菌生物合成蒽醌類(lèi)色素的最優(yōu)培養(yǎng)基為：乳糖3.5％、硝酸鈉0.3％、磷酸氫二鉀0.05％、七水硫酸鎂0.025％、氯化鉀0.05％、七水硫酸亞鐵0.001％；工藝條件為：溫度26℃、搖床轉(zhuǎn)速150rpm、起始pH8

2、.0和裝液量60mL/250mL，發(fā)酵周期為14天。以此條件發(fā)酵，發(fā)酵液在493nm的吸光度值達(dá)0.946，總蒽醌類(lèi)化合物含量為1.72mg/L。在搖瓶發(fā)酵的基礎(chǔ)上，利用15L機(jī)械式攪拌發(fā)酵罐放大試驗(yàn)，也成功得到蒽醌類(lèi)色素，發(fā)酵液在493nm的吸光度值為0.471，總蒽醌類(lèi)化合物含量為0.93mg/L。 本文對(duì)發(fā)酵得到的蒽醌類(lèi)色素進(jìn)行了分離純化的研究，建立了可行，有效的純化方法，發(fā)酵液經(jīng)有機(jī)溶劑萃取、乙酸鎂沉淀、硅膠和反相C18

3、柱色譜層析等方法分離純化，由HPLC檢測(cè)分析，色素純度達(dá)到97％以上。 對(duì)色素樣品進(jìn)行菲格爾反應(yīng)、醋酸鎂顯色反應(yīng)、Bomtrager反應(yīng)和濃硫酸反應(yīng)，結(jié)果顯示：該色素為羥基蒽醌類(lèi)化合物。色素純品經(jīng)紫外光譜，紅外光譜，質(zhì)譜和核磁共振等波譜學(xué)方法綜合分析，確定該蒽醌類(lèi)色素的分子量為284，分子式為C16H12O5，除蒽醌母核外，取代基有兩個(gè)α-OH，一個(gè)甲基和一個(gè)甲氧基，該化合物的系統(tǒng)命名為1，5-二羥基-3-甲氧基-7-甲基蒽醌(