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文檔簡介
1、竹黃作為一種極具開發(fā)利用的藥用真菌,其成分中含有多種具有活性的天然色素,奉文以竹黃菌液體發(fā)酵天然色素為基本目的,研究了竹黃菌生物合成天然色素的條件及色素的分離純化工藝,結(jié)構(gòu)以及穩(wěn)定性。 通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn),確定竹黃菌生物合成蒽醌類色素的最優(yōu)培養(yǎng)基為:乳糖3.5%、硝酸鈉0.3%、磷酸氫二鉀0.05%、七水硫酸鎂0.025%、氯化鉀0.05%、七水硫酸亞鐵0.001%;工藝條件為:溫度26℃、搖床轉(zhuǎn)速150rpm、起始pH8
2、.0和裝液量60mL/250mL,發(fā)酵周期為14天。以此條件發(fā)酵,發(fā)酵液在493nm的吸光度值達(dá)0.946,總蒽醌類化合物含量為1.72mg/L。在搖瓶發(fā)酵的基礎(chǔ)上,利用15L機(jī)械式攪拌發(fā)酵罐放大試驗(yàn),也成功得到蒽醌類色素,發(fā)酵液在493nm的吸光度值為0.471,總蒽醌類化合物含量為0.93mg/L。 本文對發(fā)酵得到的蒽醌類色素進(jìn)行了分離純化的研究,建立了可行,有效的純化方法,發(fā)酵液經(jīng)有機(jī)溶劑萃取、乙酸鎂沉淀、硅膠和反相C18
3、柱色譜層析等方法分離純化,由HPLC檢測分析,色素純度達(dá)到97%以上。 對色素樣品進(jìn)行菲格爾反應(yīng)、醋酸鎂顯色反應(yīng)、Bomtrager反應(yīng)和濃硫酸反應(yīng),結(jié)果顯示:該色素為羥基蒽醌類化合物。色素純品經(jīng)紫外光譜,紅外光譜,質(zhì)譜和核磁共振等波譜學(xué)方法綜合分析,確定該蒽醌類色素的分子量為284,分子式為C16H12O5,除蒽醌母核外,取代基有兩個(gè)α-OH,一個(gè)甲基和一個(gè)甲氧基,該化合物的系統(tǒng)命名為1,5-二羥基-3-甲氧基-7-甲基蒽醌(
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