β-欖香烯防治血管再狹窄作用的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈腔內(nèi)成形術(shù)(PTCA)是目前治療冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病的主要手段，但術(shù)后3～6個(gè)月的再狹窄(RS)發(fā)生率高達(dá)30％～50％，大大限制了它在臨床上的應(yīng)用。因此，再狹窄的防治成為心血管病研究領(lǐng)域中的熱點(diǎn)問題。近年來，雷帕霉素和紫杉醇藥物涂層支架在防治RS臨床試驗(yàn)中取得較好的效果，但仍存在一些不能忽視的問題，因此開發(fā)出較雷帕霉素、紫杉醇毒副作用更小，更為安全的支架涂層藥物至關(guān)重要。 再狹窄的發(fā)生是眾多因素相互作用的十分復(fù)

2、雜的過程，包括內(nèi)膜損傷，血栓形成，中膜血管平滑肌細(xì)胞的遷移、增殖，以及血管重塑等一系列病理變化過程。針對(duì)這些主要病理環(huán)節(jié)，本文選取中藥制劑β-欖香烯，研究其對(duì)血管再狹窄的防治作用。本文通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，研究β-欖香烯對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移的影響，對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響，及其對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用；并建立大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷再狹窄模型，研究β-欖香烯對(duì)血管再狹窄的防治作用。本文主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下： ①β-欖香烯對(duì)血管

3、平滑肌細(xì)胞增殖和遷移的影響：在體外通過MTT法檢測24h、48h、72h三各時(shí)間點(diǎn)上不同濃度β-欖香烯對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖的影響；用劃痕法和改良的Boyden微孔膜雙槽法測定不同濃度β-欖香烯對(duì)平滑肌細(xì)胞遷移的影響。研究結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，β-欖香烯對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖具有抑制作用，該作用呈劑量及時(shí)間的依賴性；隨著β-欖香烯濃度增加體外培養(yǎng)的血管平滑肌細(xì)胞遷移距離縮短。 ②β-欖香烯對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的影響：在體外通過MTT法檢測不

4、同濃度β-欖香烯在三個(gè)時(shí)間點(diǎn)(24h、48h、72h)上對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響以及β-欖香烯對(duì)過氧化氫誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞脂質(zhì)過氧化損傷的保護(hù)作用。研究結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，β-欖香烯對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖呈劑量依賴性的抑制作用，而在抗氧化損傷方面，其能呈劑量依賴性降低MDA量，降低H<,2>O<,2>對(duì)抗氧化酶的活力的影響，提高細(xì)胞內(nèi)。NO的含量，減少細(xì)胞調(diào)亡數(shù)量。 ③β-欖香烯對(duì)大鼠頸動(dòng)脈球囊損傷再狹窄的作用研究：建立大鼠頸動(dòng)脈球囊

5、損傷再狹窄模型，術(shù)后當(dāng)天腹腔注射β-欖香烯，藥物劑量為30mg/kg、40 mg/kg、50mg/kg，14天后，取損傷頸動(dòng)脈，通過HE染色，觀察組織形態(tài)學(xué)變化，血栓生成情況，并用計(jì)算機(jī)圖像處理系統(tǒng)分別測定病變血管中膜、內(nèi)膜厚度，新生內(nèi)膜面積，管腔面積等內(nèi)膜增生指標(biāo)和內(nèi)、外彈力板周長及包繞面積等血管重構(gòu)指標(biāo)。研究結(jié)果顯示：術(shù)后14天，與模型對(duì)照組比較，藥物組的中膜、內(nèi)膜面積減少(P<0.05)，管腔面積明顯增大(P<0.01)，且無血栓