欖香烯聯合三氧化二砷體內外誘導H-,22-腫瘤HSP70表達及抗腫瘤作用機制的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文欖香烯聯合三氧化二砷體內外誘導H腫瘤HSP70表達及抗腫瘤作用機制的研究姓名：王蓓申請學位級別：碩士專業(yè)：免疫學指導教師：劉京生;韓彩芝20050301中 文 摘 要新方法。方法:實驗分為體外實驗和體內 實驗兩部分。體外實驗: 實驗分為六組: ①空白 對照組②欖香烯低劑量組 ( 終濃度為 5 0 g g / m l ) ③欖香 烯高 劑量組 ( 終濃度為 1 0 0 g g / m l ) ④ 三 氧 化 二

2、砷 組( 終 濃 度 為4 g g / m l ) ⑤ 欖 香 烯 低 劑量 + 三氧 化二砷組 ( 兩種藥 物同時 作用， 終濃度為 欖香 烯5 0 g g / m l + 三氧 化 二 砷4 g g / m l ) ⑥ 欖香 烯 高 劑 量 + 三氧 化二 砷 組 ( 兩 種藥 物同 時 作 用， 終 濃 度為 和 欖香 烯 l 0 0 g g / m l 十 三 氧化 二 砷4 g g / m l ) e ⑤ 十 ⑥組 合 稱

3、為 聯 合 用藥 組。 把復 蘇， 傳 代的 腫瘤細胞， 用 1 0 % 小牛血清R P M 1 1 6 4 0 培養(yǎng)基調節(jié)細胞數 為1 X 1 0 ， 個 / m l ， 接 種 于9 6 孔 板 上 ( 1 0 0 8 1 / 孔) 。 用M T 法檢測各實驗組 對 H Z : 細胞 增殖的 抑制 情況。 取對數生長期的玩: 細胞， 用 1 0 % 小牛血清R P M 1 1 6 4 0 培養(yǎng)基調整細胞數為2 X 1 0 5 個

4、/ m l ， 接 種 于 培 養(yǎng) 瓶中 ， 每 瓶 接 種 5 m ] 。 實 驗 分 為四 組， ( 1 ) 空白 對照 組， ( 2 ) 欖 香 烯組 ( 終 濃 度為5 鄰g / m D , ( 3 ) 三氧 化 二 砷組 ( 終 濃 度為 4 g g / m l ) , ( 4 ) 聯 合 用藥 組 ( 終 濃 度為 欖 香 烯5 印g / m l 十 三 氧 化 二 砷4 g g / m l ) 。 培 養(yǎng)1 2 小時

5、 和2 4 小時 后收 集 細 胞， 用流 式 細 胞 儀 檢 測玩: 細 胞H S P 7 0 表 達量 及細 胞凋亡率。 用叮吮 橙 / 澳化乙 錠( A O / E B ) 雙熒光染色法觀察H 2 2 細胞凋亡形態(tài)學的 變化。體內 實 驗: B A L B / c 小鼠6 0 只隨 機分為A , B , C , D ,E , F 組， A組為正常組、 B組為荷瘤對照組、 C D E組為 荷瘤治療組， F組為陽 性對照組，