欖香烯聯(lián)合三氧化二砷體內(nèi)外誘導(dǎo)H-,22-腫瘤HSP70表達(dá)及抗腫瘤作用機(jī)制的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文欖香烯聯(lián)合三氧化二砷體內(nèi)外誘導(dǎo)H腫瘤HSP70表達(dá)及抗腫瘤作用機(jī)制的研究姓名：王蓓申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：劉京生;韓彩芝20050301中 文 摘 要新方法。方法:實(shí)驗(yàn)分為體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi) 實(shí)驗(yàn)兩部分。體外實(shí)驗(yàn): 實(shí)驗(yàn)分為六組: ①空白 對(duì)照組②欖香烯低劑量組 ( 終濃度為 5 0 g g / m l ) ③欖香 烯高 劑量組 ( 終濃度為 1 0 0 g g / m l ) ④ 三 氧 化 二

2、砷 組( 終 濃 度 為4 g g / m l ) ⑤ 欖 香 烯 低 劑量 + 三氧 化二砷組 ( 兩種藥 物同時(shí) 作用， 終濃度為 欖香 烯5 0 g g / m l + 三氧 化 二 砷4 g g / m l ) ⑥ 欖香 烯 高 劑 量 + 三氧 化二 砷 組 ( 兩 種藥 物同 時(shí) 作 用， 終 濃 度為 和 欖香 烯 l 0 0 g g / m l 十 三 氧化 二 砷4 g g / m l ) e ⑤ 十 ⑥組 合 稱

3、為 聯(lián) 合 用藥 組。 把復(fù) 蘇， 傳 代的 腫瘤細(xì)胞， 用 1 0 % 小牛血清R P M 1 1 6 4 0 培養(yǎng)基調(diào)節(jié)細(xì)胞數(shù) 為1 X 1 0 ， 個(gè) / m l ， 接 種 于9 6 孔 板 上 ( 1 0 0 8 1 / 孔) 。 用M T 法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組 對(duì) H Z : 細(xì)胞 增殖的 抑制 情況。 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的玩: 細(xì)胞， 用 1 0 % 小牛血清R P M 1 1 6 4 0 培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞數(shù)為2 X 1 0 5 個(gè)

4、/ m l ， 接 種 于 培 養(yǎng) 瓶中 ， 每 瓶 接 種 5 m ] 。 實(shí) 驗(yàn) 分 為四 組， ( 1 ) 空白 對(duì)照 組， ( 2 ) 欖 香 烯組 ( 終 濃 度為5 鄰g / m D , ( 3 ) 三氧 化 二 砷組 ( 終 濃 度為 4 g g / m l ) , ( 4 ) 聯(lián) 合 用藥 組 ( 終 濃 度為 欖 香 烯5 印g / m l 十 三 氧 化 二 砷4 g g / m l ) 。 培 養(yǎng)1 2 小時(shí)

5、 和2 4 小時(shí) 后收 集 細(xì) 胞， 用流 式 細(xì) 胞 儀 檢 測(cè)玩: 細(xì) 胞H S P 7 0 表 達(dá)量 及細(xì) 胞凋亡率。 用叮吮 橙 / 澳化乙 錠( A O / E B ) 雙熒光染色法觀察H 2 2 細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)的 變化。體內(nèi) 實(shí) 驗(yàn): B A L B / c 小鼠6 0 只隨 機(jī)分為A , B , C , D ,E , F 組， A組為正常組、 B組為荷瘤對(duì)照組、 C D E組為 荷瘤治療組， F組為陽 性對(duì)照組，