Galectin-1促進(jìn)SAC失活和染色體畸變.pdf

1、背景:Galectin-1是β-半乳糖凝集素家族成員之一,高表達(dá)于多種腫瘤細(xì)胞和組織中,并與腫瘤的分級和預(yù)后不良相關(guān)。分泌型Galectin-1在腫瘤的增殖、遷移、免疫逃逸、血管生成等過程中發(fā)揮了重要作用,但細(xì)胞內(nèi)的Galectin-1功能研究相對較少,且充滿矛盾和疑問。本課題的研究方向在于闡明Galectin-1在細(xì)胞有絲分裂中的調(diào)控機(jī)制及其促進(jìn)腫瘤發(fā)展的內(nèi)在原因。
　　方法:首先在HeLa細(xì)胞同步化的基礎(chǔ)上,通過Western

2、 Blot檢測Galectin-1表達(dá)與細(xì)胞周期進(jìn)程的關(guān)系;采用流式細(xì)胞術(shù)、BrdU Elisa等實(shí)驗(yàn)確定Galectin-1對M期具有調(diào)節(jié)功能;進(jìn)一步通過免疫細(xì)胞化學(xué)染色、活細(xì)胞工作站觀測分析Galectin-1發(fā)揮功能的具體時間點(diǎn)和事件;在此基礎(chǔ)上,應(yīng)用Western blot和免疫共沉淀研究Galectin-1對有絲分裂的調(diào)節(jié)作用和具體分子機(jī)制;最后,采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色和核型分析綜合評定Galectin-1對細(xì)胞染色體畸變的意義

3、。
　　結(jié)果:Galectin-1高表達(dá)于腫瘤細(xì)胞中,而在非腫瘤細(xì)胞中表達(dá)水平較低或無表達(dá);在整個細(xì)胞周期進(jìn)程中,M期和G1期Galectin-1表達(dá)水平最高,進(jìn)入S期后逐漸下降,至G2期起始達(dá)到最低點(diǎn),而到G2后期又開始重新積聚,這一波動表達(dá)的現(xiàn)象可能是受到NF-YB的調(diào)控;在M期,Galectin-1可明顯加速中-后期轉(zhuǎn)化;具體的分子機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)Galectin-1可調(diào)控SAC系統(tǒng),通過介導(dǎo)Dynein結(jié)合并轉(zhuǎn)運(yùn)Mad2,促進(jìn)