復(fù)合營養(yǎng)素對(duì)CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠血生長激素、胰島素樣生長因子-1表達(dá)的影響.pdf

1、背景與目的：
　　慢性肝病尤其是肝硬化患者，常因營養(yǎng)成分?jǐn)z入不足及肝細(xì)胞代謝紊亂，造成不同程度的營養(yǎng)不良。營養(yǎng)狀態(tài)被認(rèn)為是晚期肝病患者嚴(yán)重并發(fā)癥發(fā)病率和死亡率的獨(dú)立預(yù)測因子。對(duì)肝硬化患者，評(píng)估營養(yǎng)狀態(tài)，糾正營養(yǎng)不良，可減少嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)病率及其嚴(yán)重程度，提高患者短期及長期生活質(zhì)量，改善預(yù)后。
　　以往的研究表明，基于復(fù)方蜂花粉的營養(yǎng)支持能明顯改善肝功能，可作為肝病營養(yǎng)支持治療較好的材料;在CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠，給予以蜂

2、花粉為基礎(chǔ)的復(fù)合營養(yǎng)素(Noveliver)進(jìn)行營養(yǎng)治療能提高肝纖維化大鼠血清白蛋白水平，這可能與營養(yǎng)干預(yù)促進(jìn)肝硬化大鼠肝臟再生修復(fù)相關(guān)。肝硬化患者隨著病程進(jìn)展，血清胰島素樣生長因子-1(IGF-1)水平逐漸降低，而血清生長激素(GH)水平卻逐漸升高。血清IGF-1水平與肝硬化嚴(yán)重程度顯著相關(guān)。
　　如果營養(yǎng)支持治療可提高肝硬化患者體內(nèi)血清IGF-1水平，則將為肝硬化的營養(yǎng)支持治療提供新的理論依據(jù)。而關(guān)于復(fù)合營養(yǎng)素(Noveliv

3、er)對(duì)肝硬化患者或肝硬化動(dòng)物模型的血清生長激素(GH)及胰島素樣生長因子-1(IGF-1)水平的影響尚未見報(bào)道。我們通過建立CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠模型，以復(fù)合營養(yǎng)素(Noveliver)進(jìn)行營養(yǎng)支持干預(yù)，觀察其體重、肝功能、肝組織病理學(xué)變化，以及對(duì)血清生長激素(GH)、血清胰島素樣生長因子-1(IGF-1)水平的影響，研究復(fù)合營養(yǎng)素(Noveliver)營養(yǎng)干預(yù)對(duì)肝纖維化大鼠營養(yǎng)狀況及肝細(xì)胞再生的影響，探討營養(yǎng)干預(yù)改善肝硬化相關(guān)營

4、養(yǎng)不良狀況及促進(jìn)肝臟再生修復(fù)的作用機(jī)制，為肝硬化營養(yǎng)干預(yù)治療提供理論依據(jù)。
　　材料與方法：
　　1.CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠模型的建立:將50只SD大鼠分為肝纖維化模型組(n=40)和正常對(duì)照組(n=10)，肝纖維化模型組按0.2ml/100g體重給予腹腔注射40％CCl4橄欖油混合溶液，2次/周，持續(xù)12周;正常對(duì)照組大鼠同一時(shí)間腹腔注射與肝纖維化模型組等量的橄欖油，兩組大鼠均給予相同基礎(chǔ)飲食。造模12周后，處死部分肝

5、纖維化模型組及正常對(duì)照組大鼠，通過肝組織病理學(xué)變化評(píng)估是否成功建立肝纖維化動(dòng)物模型，觀察并記錄其體重、肝功能變化，以及血清生長激素(GH)、血清胰島素樣生長因子-1(IGF-1)水平。
　　2.對(duì)肝纖維化大鼠進(jìn)行營養(yǎng)干預(yù):選用以蜂花粉為基礎(chǔ)的復(fù)合營養(yǎng)素(Noveliver)對(duì)造模成功肝纖維化大鼠進(jìn)行營養(yǎng)干預(yù)。造模成功的肝纖維化大鼠停用CCl4，采用抽簽法分為2組，分別是:(1)Noveliver干預(yù)組:按照人公斤體重7倍劑量用蒸餾

6、水配制灌胃溶液，給予每日2次灌胃，持續(xù)4周;(2)模型對(duì)照組:給予與Noveliver干預(yù)組等劑量的蒸餾水每日2次灌胃，持續(xù)4周。以上2組大鼠均在2周后及4周后分批處死。觀察記錄每組大鼠每日精神狀況、進(jìn)食量、活動(dòng)情況及體重變化。
　　3.標(biāo)本采集與指標(biāo)檢測:分別在營養(yǎng)干預(yù)前（造模12周末）、營養(yǎng)干預(yù)2周末、營養(yǎng)干預(yù)4周末分批處死大鼠，下腔靜脈采血;分離血清，采用全自動(dòng)生化分析儀檢測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(A

7、ST)、白蛋白(ALB)、總膽紅素(TBil)等肝功能指標(biāo)，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測血清生長激素(GH)、胰島素樣生長因子-1(IGF-1);留取肝組織行HE染色和Masson染色，分析肝組織中膠原纖維含量，評(píng)估肝纖維化程度。
　　結(jié)果：
　　1.按0.2ml/100g體重給予SD大鼠腹腔注射40％CCl4橄欖油混合溶液，2次/周，持續(xù)12周，可以成功建立肝纖維化大鼠模型;與正常對(duì)照組相比，肝纖維化模型組大鼠血

8、清轉(zhuǎn)氨酶及總膽紅素升高，血清白蛋白降低，血清生長激素升高，血清胰島素樣生長因子-1降低。
　　2.營養(yǎng)干預(yù)后4周，Noveliver干預(yù)組大鼠體重(452.1g±21.6g)明顯高于模型對(duì)照組(416.5g±20.1g)，兩組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　3.營養(yǎng)干預(yù)后4周，Noveliver干預(yù)組大鼠血清白蛋白水平(34.78g/L±1.87g/L)較模型對(duì)照組(31.73g/L±2.00g/L)增高顯著，差

9、異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。
　　4.采用半定量計(jì)分系統(tǒng)(SSS)對(duì)兩組大鼠肝纖維化程度行半定量計(jì)分分析結(jié)果表明，Noveliver干預(yù)組肝纖維化半定量計(jì)分(6.17±1.17)顯著低于模型對(duì)照組(10.50±1.05)(P＜0.05)。
　　5.營養(yǎng)干預(yù)后4周，血清生長激素(GH)水平，Noveliver干預(yù)組(0.79ng/ml±0.15ng/ml)及模型對(duì)照組(0.95ng/ml±0.13ng/ml)均較造模第1

10、2周末(1.28ng/ml±0.14ng/ml)降低，兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;血清胰島素樣生長因子-1(IGF-1)水平，Noveliver干預(yù)組(1614ng/ml±147ng/ml)明顯高于模型對(duì)照組(1390ng/ml±142ng/ml)，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。給予復(fù)方營養(yǎng)素(Noveliver)營養(yǎng)干預(yù)后，肝纖維化大鼠血清IGF-1水平顯著升高。
　　結(jié)論：
　　復(fù)合營養(yǎng)素(Noveliver)可改