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![荊芥連翹湯促愈小腿潰瘍臨床與實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/13/830d9abe-7dfb-4d76-b17f-a237becbb4b4/830d9abe-7dfb-4d76-b17f-a237becbb4b41.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、一、選題依據(jù) 小腿潰瘍是皮膚科和中醫(yī)外科的常見(jiàn)病癥。病因復(fù)雜多樣,其中血管性疾病所致,約占70%以上,包括靜脈曲張性潰瘍,動(dòng)脈性潰瘍,血管炎性潰瘍?nèi)箢?,有?shù)十種皮膚病。此外有神經(jīng)性潰瘍,物理性潰瘍,以及感染性,血液病性潰瘍等。臨床上常常久治不愈,缺少有效治療方法。 目前,國(guó)內(nèi)西醫(yī)在治療小腿潰瘍方面,文獻(xiàn)報(bào)道較多是胰島素、前列腺素、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、血漿纖維結(jié)合蛋白、1.6一二磷酸果糖、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、異透明質(zhì)酸
2、、阿魏酸納等。療程長(zhǎng)、費(fèi)用昂貴以及安全性考慮,都還存在問(wèn)題。另外,西醫(yī)外科截肢手術(shù)適應(yīng)癥掌握與外科醫(yī)生認(rèn)知水平密切相關(guān),有時(shí)會(huì)給患者帶來(lái)不必要的問(wèn)題,為尋找費(fèi)用低、療效好而安全的促愈治療方法,是國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)界近期重要的研究課題。 二、研究?jī)?nèi)容: 1荊芥連翹湯浸泡治療小腿慢性潰瘍臨床觀察 2荊芥連翹湯體外抑菌實(shí)驗(yàn)。 3四種兔小腿潰瘍模型比較的研究。 4荊芥連翹湯化腐生肌實(shí)驗(yàn)。 5荊芥連翹湯對(duì)兔
3、小腿潰瘍模型修復(fù)機(jī)理的研究。 三、方法與結(jié)果: (一)荊芥連翹湯浸泡治療小腿慢性潰瘍臨床觀察 我們對(duì)2003~2005年確診小腿慢性潰瘍的門診或住院患者,其中男性29例,女性25例,年齡15~78歲,平均58歲,病程3個(gè)月~12年。按病因分類,墜積性潰瘍者21例,糖尿病性潰瘍者6例,白血病合并外傷引起者2例,系統(tǒng)性紅斑狼瘡合并血管炎引起者8例,外傷感染者12例,結(jié)節(jié)性動(dòng)脈炎所致者3例、硬皮病合并小腿潰瘍者2例;按
4、面積分類,面積<3cm2者33例,3-6cm2者14例,>6cm2者7例;按部位分類,單側(cè)肢體者39例,雙側(cè)肢體者15例。治療方法以荊芥連翹湯為基本方,每日一劑,水煎30分鐘,藥量視病變部位而定,晾溫后浸泡病變部位,每次120分鐘,一日兩次,浸泡后暴露患處,15天為1療程。 結(jié)果:21例墜積性潰瘍,治愈6例,顯效11例,有效4例。6例糖尿病性潰瘍,顯效2例,有效3例。2例血液病所致小腿潰瘍,治愈1例,顯效1例。8例SLE合并脈管
5、炎,顯效4例,有效3例。12例外傷感染性潰瘍,治愈5例,顯效4例,有效3例。3例結(jié)節(jié)性動(dòng)脈炎引起小腿潰瘍,顯效1例,有效2例。2例硬皮病合并小腿潰瘍,有效1例。荊芥連翹湯浸泡治療54例小腿潰瘍,總有效率達(dá)94.4%。經(jīng)過(guò)30天治療,其治愈率59%,顯效率91%,總有效率達(dá)100%;未見(jiàn)明顯不良反應(yīng)。在治療過(guò)程中,均無(wú)肝腎功能損害;僅2例在浸泡治療過(guò)程中,由于中藥濃度過(guò)低,局部出現(xiàn)水腫現(xiàn)象,停用2天后癥狀消失。 (二)荊芥連翹湯體
6、外抑菌實(shí)驗(yàn) 我們?cè)O(shè)計(jì)了荊芥連翹湯體外抑菌試驗(yàn),以證實(shí)荊芥連翹湯對(duì)皮膚潰瘍常見(jiàn)細(xì)菌可能具有抑菌作用。實(shí)驗(yàn)步驟有:1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基的制備。2、不同濃度含藥培養(yǎng)基的制備。3、菌液配制。4、抑菌實(shí)驗(yàn)觀察有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng),細(xì)菌不生長(zhǎng)的最高藥物稀釋度,即為細(xì)菌最低抑菌濃度(MIC)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:紅霉素對(duì)表皮葡萄菌最低抑菌濃度為0.125g/ml、對(duì)金黃色葡萄球菌為0.250g/ml,對(duì)大腸桿菌、綠膿桿菌不敏感。荊芥連翹湯最低抑菌濃度對(duì)表皮葡萄球菌為
7、0.015625g/ml,金黃色葡萄球菌為0.03125g/ml,對(duì)大腸桿菌為0.015625g/ml,對(duì)綠膿桿菌為0.015625g/ml,荊芥連翹湯對(duì)引起小腿潰瘍主要致病菌具有明顯的抑制作用。 (三)四種兔小腿潰瘍模型比較的研究 四種造模的方法:A、單純手術(shù)取皮法。B、手術(shù)取皮+常見(jiàn)細(xì)菌接種。C、絲裂霉素局封法。D、絲裂霉素局封+手術(shù)取片法。觀察各組創(chuàng)面大小、顏色、分泌物、肉芽組織情況及創(chuàng)面隨時(shí)間推移的變化,每三天記
8、錄一次。四種造模方法均在造模后第三天分別在各皮損邊緣取材,將組織塊的一半做常規(guī)病理,經(jīng)HE染色后光鏡觀察。將組織塊的另一半經(jīng)處理后做電鏡觀察。結(jié)果:肉眼觀察:A組:造模第12天時(shí)潰瘍面完全愈合。B組:造模第15天時(shí),潰瘍面完全愈合。C組:造模第9-24天時(shí)形成局部壞死性黑痂,27-30天脫落愈合。D組:造模第3-9天潰瘍分泌物多,周圍有0.5-1cm的暗紅色區(qū)域;第12-24天潰瘍面直徑約1.8cm,深達(dá)肌層,表面有黃色分泌物,周圍有暗
9、紅色斑。第39-45天后潰瘍尚未愈合,新鮮肉芽生長(zhǎng)良好,52天時(shí)完全愈合。光鏡結(jié)果:A組和B組:表皮部分缺損,真皮淺層水腫,毛細(xì)血管擴(kuò)大充血,周圍有中性粒細(xì)胞為主的炎細(xì)胞浸潤(rùn)。C組和D組:表皮及真皮均見(jiàn)大片組織水腫、變性、壞死,壞死組織周圍有大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)及散在的紅細(xì)胞分布。 (四)荊芥連翹湯化腐生肌實(shí)驗(yàn) 按照我國(guó)中醫(yī)藥管理局對(duì)化腐生肌實(shí)驗(yàn)要求,采用5%、15%、30%三種濃度荊芥連翹湯,與傳統(tǒng)祛腐生肌中藥生肌玉紅湯
10、組、生理鹽水組對(duì)照。分別采用30min、60min、120min三個(gè)時(shí)間段,浸泡、濕敷兩種外治方法,促愈兔實(shí)驗(yàn)性小腿皮膚潰瘍。觀察潰瘍大小、創(chuàng)面炎癥反應(yīng)、滲出物、肉芽組織新生情況,評(píng)估其化腐生肌效果。方法:1、建立實(shí)驗(yàn)兔小腿皮膚潰瘍模型(方法同兔小腿慢性潰瘍模型D組)。2、藥品制備:荊芥連翹湯組:荊芥連翹湯共生藥254g,共3付分別水煎濃縮成847ml,1693ml,5080ml,即得到30%(高濃度),15%(中濃度),5%(低濃度)
11、溶液。陽(yáng)性對(duì)照生肌玉紅方組(參考生肌玉紅膏《外科正宗》):共生藥254,共3付分別水煎濃縮1693ml,同上配制得到15%(中濃度)溶液。陰性對(duì)照組:0.9%氯化鈉溶液。3、9只實(shí)驗(yàn)兔隨機(jī)分組編號(hào),每3天測(cè)量各組潰瘍面長(zhǎng)徑和短徑,平估愈合速度;記錄各組潰瘍面炎癥反應(yīng)、滲出物、肉芽組織新生情況。應(yīng)用SPSS13.0軟件分析,采用多重比較的方差分析。 (五)荊芥連翹湯對(duì)兔小腿潰瘍模型修復(fù)機(jī)理的研究 將荊芥連翹湯與生肌玉紅湯和
12、生理鹽水做陽(yáng)性及陰性對(duì)照,對(duì)治療實(shí)驗(yàn)性兔小腿潰瘍模型過(guò)程中的組織病理、電鏡觀察及VEGF、CD34免疫組織化學(xué)標(biāo)記顯微圖像分析進(jìn)行研究。方法:1、成年新西蘭雄性大白兔9只。2、動(dòng)物模型的建立(同荊芥連翹湯化腐生肌實(shí)驗(yàn))。3、取材及染色:分別取15%荊芥連翹湯、15%生肌玉紅湯、生理鹽水浸泡小腿潰瘍的患肢60分鐘組,治療前及治療18天時(shí)潰瘍邊緣組織。一半常規(guī)病理檢查,VEGF和CD34試劑兩種免疫組織化學(xué)染色標(biāo)記。另一半組織固定、超薄切片
13、、透射電鏡觀察、SIS成像。4、結(jié)果判斷及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:免疫組化標(biāo)記以棕黃色顆粒狀沉積為陽(yáng)性。比較確定陽(yáng)性血管內(nèi)皮細(xì)胞和微血管,進(jìn)行低倍鏡下(×10)觀看。隨機(jī)選取2個(gè)視野,計(jì)算陽(yáng)性血管內(nèi)皮細(xì)胞和微血管計(jì)數(shù)和陽(yáng)性微血管面積計(jì)數(shù)。結(jié)果:常規(guī)病理:荊芥連翹湯組切片中見(jiàn)大量新生毛細(xì)血管,增生的成纖維細(xì)胞,和以淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞為主的炎細(xì)胞浸潤(rùn)。生肌玉紅湯組切片中同樣見(jiàn)大量新生毛細(xì)血管,增生的成纖維細(xì)胞較荊芥連翹湯組少,也見(jiàn)以淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞為主的
14、炎細(xì)胞浸潤(rùn)。生理鹽水組見(jiàn)大片壞死組織下方有大量炎細(xì)胞浸潤(rùn),個(gè)別新生毛細(xì)血管和成纖維細(xì)胞。電鏡結(jié)果:荊芥連翹湯和生肌玉紅湯組見(jiàn):有較多毛細(xì)血管周細(xì)胞,細(xì)胞核大、細(xì)胞器豐富和較多幼稚的成纖維細(xì)胞,細(xì)胞核大、漿少,其中有大量粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。生理鹽水見(jiàn)大量崩解壞死的細(xì)胞,細(xì)胞器完全消失。 結(jié)論: 1.荊芥連翹湯浸泡治療小腿慢性潰瘍臨床觀察:通過(guò)荊芥連翹湯局部浸泡外治小腿慢性潰瘍54例。經(jīng)一個(gè)療程(15天)治愈率達(dá)31.5%,總有效率
15、達(dá)94.4%,經(jīng)過(guò)30天治療,其治愈率59%,顯效率91%,總有效率達(dá)100%;未見(jiàn)明顯不良反應(yīng);說(shuō)明荊芥連翹湯局部浸泡治療多種復(fù)雜病因所致小腿慢性潰瘍有顯著的臨床效果。 2.荊芥連翹湯體外抑菌實(shí)驗(yàn):采用荊芥連翹湯與紅霉素對(duì)照,分別對(duì)金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,大腸埃希桿菌,銅綠假單胞菌最低抑菌濃度(MIC)測(cè)定。荊芥連翹湯組明顯優(yōu)于紅霉素組,荊芥連翹湯對(duì)常見(jiàn)感染菌有顯著抑菌效果。與中醫(yī)學(xué)認(rèn)為該方具有清熱解毒等功效一致,荊芥連
16、翹湯的抑菌作用是其外用浸泡治療小腿潰瘍的機(jī)理之一。 3.四種兔小腿潰瘍模型比較的研究:通過(guò)四種方法對(duì)兔進(jìn)行小腿潰瘍?cè)炷?shí)驗(yàn),從造模的形成及自然愈合時(shí)間表明,A組和B組均為急性開放性潰瘍模型。C組和D組為慢性潰瘍模型。D組是絲裂霉素局封加手術(shù)取片法,形成的潰瘍中央潰爛,有膿性分泌物,周圍環(huán)繞暗紅色斑;與臨床相關(guān)疾病從臨床表現(xiàn),病理表現(xiàn),愈合方式等方面具有一定相似性,能夠較好模擬臨床上慢性潰瘍的發(fā)生特點(diǎn),對(duì)進(jìn)一步研究慢性潰瘍的發(fā)病機(jī)
17、制及為治療方法提供新思路具有一定的應(yīng)用價(jià)值。 4.荊芥連翹湯化腐生肌實(shí)驗(yàn):經(jīng)多重比較的方差分析顯示:藥物、方法、時(shí)間及濃度對(duì)潰瘍長(zhǎng)短徑的影響的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),從統(tǒng)計(jì)圖還可以觀察到濕敷法可能優(yōu)于浸泡法,濃度不一定越高越好,提示臨床采用5%藥物濃度即可,作用時(shí)間上,濕敷時(shí)間120min者療效可能優(yōu)于濕敷30min、60min者,而浸泡時(shí)剛好相反,浸泡時(shí)間以30min、60min為宜。從潰瘍創(chuàng)面炎癥反應(yīng)、滲出物、肉芽
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