苦參堿微乳的研究.pdf

1、研究各組分及其比例對微乳形成的影響，篩選出藥用微乳的處方，用于制備苦參堿微乳。分別選用Cremophor CO40、Cremophor EL-35、硬脂酸單甘酯作為表面活性劑，無水乙醇、1，2-丙二醇、正丁醇作為助表面活性劑，IPM、GTCC、橄欖油和麥芽油作為油相，在室溫下制備微乳，繪制(擬)三元相圖，根據(jù)相圖中微乳區(qū)的大小、微乳的穩(wěn)定性以及對藥物的溶解性，從中篩選出苦參堿微乳的最佳處方。研究發(fā)現(xiàn)，不管助表面活性劑是否存在，Cremo

2、phor CO40、Cremophor EL-35可以和四種油相形成透明微乳，但硬脂酸單甘酯不能形成微乳；當(dāng)助表面活性劑存在時，微乳形成區(qū)會變大，但其穩(wěn)定性會下降；Crcmophor C040/IPM/蒸餾水微乳區(qū)較大，并且較穩(wěn)定，苦參堿微乳處方為：苦參堿1.98g，Cremorphor CO40 4.80g，IPM 1.20g，蒸餾水10.00 g。 考察苦參堿微乳的質(zhì)量和安全性。透射電子顯微鏡觀察苦參堿微乳液滴的形態(tài)，納米粒

3、度儀測其粒徑大小及其分布，紫外可見分光光度法測定苦參堿微乳中苦參堿含量，并通過離心、留樣和光照考察其穩(wěn)定性，以家兔作為實驗動物考察其對皮膚的刺激性。結(jié)果表明，苦參堿微乳是無色透明的，其液滴呈球狀，平均粒徑為70 nm(空白微乳為65 nm)，多分散指數(shù)為0.038，分散性好；苦參堿微乳和空白微乳在穩(wěn)定性和粒徑大小上沒有顯著差異，但應(yīng)該低溫避光保存；苦參堿在415nm有最大吸收峰，而空白微乳在此波長處無吸收，實驗中以415nm作為測定波長

4、，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為A=0.0466C+0.0876，r=0.9997，平均回收率為99.73％，日內(nèi)和日間的精密度均小于1％，苦參堿微乳中苦參堿的含量為110.12mg/mL；不管是完整皮膚或損傷皮膚，空白微乳和苦參堿微乳對皮膚的刺激反應(yīng)均值均小于0.5，屬于“無刺激性”。 以苦參堿水溶液作為對照，用透皮擴散儀和離體大鼠腹部皮膚進行體外透皮，研究苦參堿微乳的體外經(jīng)皮滲透能力，并考察不同氮酮濃度對苦參堿微乳透皮性的影響。結(jié)果表明

5、，苦參堿微乳的透皮能力要優(yōu)于苦參堿水溶液的，兩者的透皮速率分別為21.427μg/(cm<'2>·h)和16.332μg/(cm<'2>·h)，12h的體外累積滲透量分別為230.23μg/cm<'2>和160.98μg/cm<'2>，并且苦參堿微乳透皮時滯相對小于苦參堿水溶液的；1％～5％氮酮對苦參堿微乳透皮性都有一定的促滲作用，其中5％的氮酮的促滲作用最強，12h內(nèi)它的透皮累積量為428.17μg/cm<'2>，透皮速率為39.54

6、8μg/(cm<'2>·h)，其中透皮速率分別是苦參堿水溶液和無氮酮苦參堿微乳的1.85和2.42倍，并且時滯相對較小，故優(yōu)選5％氮酮作為苦參堿微乳的透皮促滲劑。 以B16黑素瘤細胞為靶細胞，觀察不同濃度的苦參堿微乳對其增殖活性影響。采用MTT比色法測定苦參堿微乳體外對黑素瘤細胞生長的抑制作用，于倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)變化。MTT檢測結(jié)果表明，苦參堿微乳對小鼠B16黑素瘤細胞的增殖具有明顯的抑制作用。當(dāng)藥物濃度為5～10μg/

7、mL時，苦參堿微乳組和苦參堿溶液組的增殖抑制作用在統(tǒng)計上無顯著差異(P>0.05)，但前者的抑制率大于后者的；濃度為50～800μg/mL時，苦參堿微乳組的抑制作用明顯大于苦參堿溶液組(P<0.05)；苦參堿微乳作用48h，貼壁細胞數(shù)量明顯減少，許多細胞變圓變小，甚至表面出現(xiàn)大空泡樣結(jié)構(gòu)，細胞培養(yǎng)液中有大量的碎片；空白微乳對細胞的抑制作用都比較弱，最大抑制率為13.34％，按6級毒性分級法評價其對細胞的毒性為1級，達到合格要求；在空白微