PDTC對新生大鼠缺氧缺血后皮質(zhì)和海馬CA1區(qū)NF-κB激活及神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的：新生兒缺氧缺血性腦損傷（HIBD）是新生兒死亡和永久性神經(jīng)系統(tǒng)損傷的重要原因之一。越來越多的證據(jù)表明炎癥反應(yīng)和凋亡在缺氧缺血性腦損傷的發(fā)病機(jī)制中起關(guān)鍵作用。NF-κB是廣泛存在于真核細(xì)胞內(nèi)的一種很重要的轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控許多炎性和凋亡相關(guān)基因的表達(dá)，從而調(diào)控炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答、細(xì)胞的增殖、分化和凋亡等重要的病理生理過程，對臨床許多疾病的發(fā)生及發(fā)展起重要作用，因此針對NF-κB的調(diào)控已成為目前許多疾病研發(fā)新藥治療的重要靶點(diǎn)。NF-κB活

2、化抑制劑吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽（PDTC）在成年大鼠腦缺血再灌注模型中具有強(qiáng)大的神經(jīng)保護(hù)作用，但有關(guān)PDTC對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷是否具有神經(jīng)保護(hù)作用的研究在國內(nèi)外尚為少見。本研究旨在建立新生SD大鼠缺氧缺血性腦損傷模型的基礎(chǔ)上，檢測新生大鼠在缺氧缺血（HI）后不同時間點(diǎn)大腦皮質(zhì)和海馬CA1區(qū)NF-κBP65蛋白表達(dá)和神經(jīng)細(xì)胞凋亡的變化，探討新生大鼠缺氧缺血后NF-κB的活化對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的影響及PDTC預(yù)處理對新生大鼠

3、缺氧缺血性腦損傷是否具有神經(jīng)保護(hù)作用及其作用機(jī)制。 方法：72只新生健康7日齡SD大鼠，雌雄兼用。隨機(jī)分為假手術(shù)組、HIBD組、PDTC預(yù)處理組，各組24只。每組大鼠再按缺氧缺血后1、6、12、24小時不同處死時間點(diǎn)隨機(jī)分為4個亞組，每個亞組6只。結(jié)扎大鼠左側(cè)頸總動脈和吸入含氧8%的氮氧混合氣體制備成新生大鼠HIBD模型。假手術(shù)組僅游離左頸總動脈但不結(jié)扎和行缺氧處理。PDTC預(yù)處理組大鼠在缺氧缺血前1小時給予PDTC腹腔注射1次

4、（50ug/g），假手術(shù)組和HIBD組大鼠均腹腔注射等體積生理鹽水。采用蘇木素-伊紅（HE）染色檢測缺氧缺血后腦組織病理學(xué)改變；用SP免疫組化染色方法檢測NF-κBP65蛋白的表達(dá)以了解NF-κB的活化；采用尼氏體（Niss1）染色檢測神經(jīng)元變性和TUNEL細(xì)胞凋亡原位檢測技術(shù)檢測凋亡的神經(jīng)細(xì)胞以評價缺氧缺血對腦組織的損傷。 結(jié)果：（1）與同時間點(diǎn)假手術(shù)組相比，HIBD組左側(cè)皮質(zhì)和海馬CA1區(qū)NF-κBP65陽性細(xì)胞數(shù)和神經(jīng)細(xì)胞

5、凋亡數(shù)均顯著增多（P<0.01或P<0.001）；（2）與同時間點(diǎn)HIBD組相比，PDTC干預(yù)組左側(cè)皮質(zhì)和海馬CA1區(qū)NF-κBP65陽性細(xì)胞數(shù)和神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)顯著減少（P<0.05或P<0.01）；（3）HIBD組內(nèi)HI6h、12h、24h各亞組左側(cè)皮質(zhì)和海馬CA1區(qū)NF-κBP65陽性細(xì)胞數(shù)、神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)與HI1h亞組相比，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；（4）直線相關(guān)性分析表明缺氧缺血后凋亡神經(jīng)細(xì)胞數(shù)與NF-κBP65蛋白核陽