組織因子促進糖尿病鼠傷口愈合及對血管內(nèi)皮細胞生長因子的誘導作用.pdf

1、組織因子(TF,Tissue Factor)是一個分子量為47kDa的單鏈跨膜糖蛋白,由295個氨基酸殘基組成,包括219個氨基酸殘基組成的胞外區(qū),23個氨基酸殘基組成的跨膜區(qū)和由21個氨基酸殘基組成的短的胞漿尾.TF是凝血因子FVIIa的受體,FVIIa與TF胞外區(qū)結(jié)合后,啟動體內(nèi)外源性的凝血途徑,在生理性止血中有重要意義.正常生理狀況下,血管內(nèi)皮細胞和血細胞不表達TF,但在病理情況下,一些因子刺激這兩種細胞開始表達TF,引起一些病理

2、性的凝血反應,例如,彌散性血管內(nèi)凝血、血栓和敗血性休克發(fā)生等.為了證實在糖尿病皮膚傷口修復,血管發(fā)生過程中TF起重要作用,我們用克隆有TF的真核表達載體進行傷口局部基因轉(zhuǎn)染.發(fā)現(xiàn)TF轉(zhuǎn)染改善了糖尿病情況下傷口血管生成的不足,促進了傷口處血管發(fā)生,提高了血流供應,角質(zhì)細胞,成纖維細胞的增殖遷移,膠元合成,顆粒組織形成等,明顯加快了傷口愈合速度.TF促進傷口愈合的可能機制包括三個方面.一是促進了VEGF,α-SMA的表達,二是促進角質(zhì)細胞表

3、達與傷口愈合有關(guān)的基因,三是TF本身就具有促新血管發(fā)生的作用.VEGF是血管內(nèi)皮細胞特有的有絲分裂原,具有很強的促血管生成作用.TF胞外區(qū)與凝血因子FVIa的結(jié)合,而不是胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域,在誘導VEGF表達中起重要作用.雖然目前TF在腫瘤血管發(fā)生中的重要作用已經(jīng)肯定,但其機制仍了解很少.基于體內(nèi)實驗結(jié)果--TF誘導VEGF的表達,我們又用黑色素瘤細胞HT144探討性的研究了TF誘導VEGF表達的結(jié)構(gòu)功能關(guān)系,信號傳導途徑,和相應的VEGF啟動

4、子區(qū).發(fā)現(xiàn)在腫瘤細胞中,TF誘導VEGF的表達,與TF的細胞外結(jié)構(gòu)域有關(guān),確切的說與凝血因子FVIIa的結(jié)合有關(guān).與TF胞內(nèi)區(qū),即胞內(nèi)區(qū)潛在的磷酸化位點無關(guān).對TF誘導VEGF信號通路的研究結(jié)果表明,TF的表達促進了MAPK1/2的磷酸化,證實MEK1/2、MAPK1/2在此誘導關(guān)系中有重要的作用.蛋白激酶A,蛋白激酶C,蛋白酪氨酸激酶,3-磷酸肌醇激酶等與此誘導作用無關(guān).TF在轉(zhuǎn)錄表達和轉(zhuǎn)錄后增加mRNA穩(wěn)定性兩個水平上同時調(diào)控VEG