大麗輪枝菌毒素對(duì)棉花黃萎病抗性的誘導(dǎo).pdf

1、自從人類開始種植農(nóng)作物以來，病原物引起的病害一直是育種學(xué)家及農(nóng)學(xué)家關(guān)注的焦點(diǎn)。誘導(dǎo)抗性是一種控制植物病害的有效方法。在對(duì)病害的防治問題上，它有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)：抗病育種的時(shí)間太長(zhǎng)，一個(gè)抗病品種的培育及確定需要幾年的時(shí)間；化學(xué)防治會(huì)對(duì)人畜產(chǎn)生危害和環(huán)境污染。而誘導(dǎo)抗性克服了以上缺點(diǎn)，它利用了植物潛在的決定性因素使之發(fā)展為植物的綜合抗性。 生物因子作為激發(fā)子是近年來的研究熱點(diǎn)。生物激發(fā)子的成分主要有低聚糖、糖蛋白、低肽等。而本試驗(yàn)所用的

2、生物因子—大麗輪枝菌毒素是一種復(fù)合物，成為本研究的一個(gè)創(chuàng)新點(diǎn)。本研究主要包括四個(gè)部分： 1棉花黃萎病病菌通過提純復(fù)壯而達(dá)到較強(qiáng)的侵染能力，并制備出較多的黃萎病菌粗毒素。同時(shí)介紹了粗毒素的簡(jiǎn)易制備、根冠細(xì)胞培養(yǎng)與制備過程、以及染色過程中染色劑的選擇、染色時(shí)間的長(zhǎng)短。實(shí)驗(yàn)與原傳統(tǒng)方法相比有幾點(diǎn)改進(jìn)：(1)總結(jié)出細(xì)胞振蕩時(shí)間在1-2min之內(nèi)；(2)黑暗條件下靜置培養(yǎng)2-6h；(3)選用pH為6.5的0.01％中性紅染色3-5min,

3、之后加入一滴0.2％伊文思蘭染色，伊文思蘭的染色時(shí)間應(yīng)嚴(yán)格掌握在3min以內(nèi)等幾個(gè)方面，為根冠細(xì)胞測(cè)定方法的推廣提供了一定的理論支持。 2棉苗長(zhǎng)至四葉時(shí)，將紙缽與蛭石等去掉，用水小心沖刷，得到：(1)完整根苗，(2)將根下部3-5cm的余根用消毒的刀切掉為切根苗，(3)留主根，將大部分側(cè)根切除為傷根苗。三種不同根系狀況的棉苗浸于20ml棉花黃萎病菌的菌液中，以無菌水稀釋至不同濃度。經(jīng)0-48h，記載萎蔫程度，并測(cè)定相關(guān)抗氧化酶的

4、變化。切根苗受害最嚴(yán)重，其次為傷根苗，完整根系棉苗的發(fā)病最輕。棉花傷根后的棉苗外部病理反應(yīng)與體內(nèi)相關(guān)酶的動(dòng)態(tài)生化反應(yīng)進(jìn)行研究，獲得植株外部形態(tài)變化與內(nèi)部生化變化相吻合的結(jié)果 3分別用三種低濃度病菌濾液處理棉花并測(cè)定體內(nèi)抗性相關(guān)抗氧化酶的影響，觀察其植株形態(tài)萎蔫指標(biāo)與抗氧化酶相關(guān)的生理指標(biāo)。 4確定了1：50的毒素濾液能夠成功地做為激發(fā)子來誘導(dǎo)棉花的系統(tǒng)獲得抗性。結(jié)果表明低濃度的大麗輪枝菌毒素可以提高棉花的抗病性。