棉花黃萎病抗性遺傳分析及抗病性分子標(biāo)記的篩選.pdf

1、本試驗是利用兩組雜交組合，陸地棉軍棉1號和遼棉18、海島棉新海20和陸地棉碩豐1號雜交產(chǎn)生的群體為材料，采用不同的接種方法，調(diào)查親本及后代的抗病性，研究其遺傳規(guī)律。獲如下結(jié)果： 1.通過對兩對親本和群體的抗性遺傳的研究，陸地棉種內(nèi)雜交對黃萎病的抗性為數(shù)量性狀遺傳，受多基因或微效多基因控制；海島棉的抗病性對陸地棉的感病性受顯性單基因控制。 2.抗病基因存在保守序列，如NBS、NBS-LRR等，通過基因序列對比軟件Dnama

2、n，找到保守區(qū)域，根據(jù)引物設(shè)計主要的參數(shù)：引物長度18～24bp，以20bp為最佳，產(chǎn)物長度100-500bp，最佳退火溫度為60℃，GC含量為45～55％，以50％為最佳。再利用設(shè)計引物的常用軟件Primer Premier3.0和Oligo6.0，得到107對RGA簡并引物。 3.對遼棉18和軍棉1號兩親本及群體分別進行SRAP和RGA引物的篩選，得到與抗病性相關(guān)的3個SRAP標(biāo)記，分別是e6m6、e6m10、e8m8，3個

3、RGA標(biāo)記Gbrga2、Gbrga10、Gbrga103。分子標(biāo)記與棉花黃萎病抗性的交換值分別為14.5％、18.5％、12.9％、15.9％、16.1％、12.1％，與抗黃萎病基因的遺傳距離分別為14.9cM、19.5cM、13.4cM、17.3cM、18.3cM、12.4cM。 4.對新海20和碩豐1號兩親本及群體分別進行SRAP和RGA引物的篩選，得到與抗病性相關(guān)的2個SRAP標(biāo)記，分別是e3m9、e6m10，3個RGA標(biāo)

4、記Gbrga54、Gbrga70、Gbrga103。分子標(biāo)記與棉花黃萎病抗性的交換值分別為15.7％、18.2％、19.2％、22.6％、12.6％，與抗黃萎病基因的遺傳距離分別為16.1cM、19.2cM、20.2cM、24.4cM、12.9cM。 5.通過RGA和SRAP引物對親本及其群體擴增的結(jié)果表明，SRAP標(biāo)記中的e6m10在兩組雜交品種中均能擴增出多態(tài)性條帶；RGA標(biāo)記中的Gbrga103在兩組雜交品種中也能擴增出特