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文檔簡介
1、菌核病(stem rot)是一種世界性病害,該病害嚴(yán)重影響油菜產(chǎn)量,在長江流域尤為嚴(yán)重,而且目前尚未發(fā)現(xiàn)對菌核病完全免疫的材料,所以尋找抗菌核病機理和培育抗病品種是油菜研究中急需解決的問題之一。 本文主要分為兩個部分:第一部分工作,對芯片結(jié)果進行Northern驗證,篩選與菌核病抗性相關(guān)的基因。第二部分工作:對實驗室自行合成的新型甘藍(lán)型油菜以及收集的常規(guī)品種種質(zhì)資源進行菌核病抗性鑒定,篩選高抗油菜種質(zhì)資源,為提高甘藍(lán)型油菜抗菌核
2、病性打下基礎(chǔ)。 第一部分工作 劉仁虎博士利用擬南芥的cDNA芯片(包含9120個EST,大約6200個基因)研究了油菜受核盤菌和草酸脅迫下,局部組織基因的表達(dá)變化情況。本實驗在此研究結(jié)果基礎(chǔ)上,結(jié)合趙建偉(教授)利用F2-3所定位的菌核病抗性相關(guān)QTL,通過油菜-擬南芥比較作圖,我們擬定了13個與菌核病抗性相關(guān)的候選基因。對部分基因Norhtern驗證,其Nothern雜交的結(jié)果與芯片結(jié)果不一致。 對抗病材料寧R
3、S-1和感病材料恢5200的活體葉片和離體葉片進行核盤菌的接種實驗,實驗結(jié)果顯示:抗病親本寧RS-1葉片上橢圓面積與感病親本恢5200葉片上的橢圓面積沒有顯著差異。 第二部分工作 本實驗的主要目的是對實驗室收集和通過遠(yuǎn)緣雜交合成的材料進行菌核病抗性評估,篩選對菌核病具有較高抗(耐)性的材料。研究內(nèi)容可以分為以下幾個部分。 1.對新型甘藍(lán)型油菜合成途徑Ⅰ(如圖5)中所需的109個埃芥(Brassica carina
4、ta)親本株系進行菌核病抗性鑒定,選取中雙9號為抗性對照,兩次重復(fù)實驗結(jié)果顯示:三個埃芥親本株系的菌核病抗性顯著強于對照中雙9號。 2.對新型甘藍(lán)型油菜合成途徑Ⅰ(如圖5)中所需的埃芥親本衍生的5倍體和6倍體材料進行菌核病抗性鑒定,五次重復(fù)實驗結(jié)果顯示:一個6倍體單株的菌核病抗性顯著強于對照中雙9號。取該抗性單株的花粉,觀察細(xì)胞核內(nèi)染色體數(shù)目,結(jié)果顯示:其細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目為40條。所以該材料并非整6倍體。 3.對實驗室自
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