羥氯喹對CpG-ODN誘導的漿細胞樣樹突狀細胞活化的影響.pdf

1、目的：探討羥氯喹(HCQ)對CpG-ODN誘導的pDCs活化及TLR樣受體9及髓樣分化因子88信號通路的影響,了解羥氯喹治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的作用機制。
　　方法：收集10例系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周全血,EDTA抗凝,密度梯度離心分離得外周血單個核細胞(PBMC),1640培養(yǎng)基中培養(yǎng),加入寡脫氧核苷酸(CpG-ODN)2216刺激,加入HCQ共培養(yǎng),24h后收集PBMC,RT-PCR測PBMC中TLR-9和MyD88 mRNA表達水

2、平;產房收集臍帶血36份,每次實驗用臍帶血250ml-300ml,密度梯度離心得臍帶血單核細胞,BDCA-4磁珠分選得前體pDCs細胞,前體pDCs分為3組(IL-3,IL-3+CpG, IL-3+CpG+HCQ)培養(yǎng)3天,流式細胞術測各組pDCs表面BDCA-2、CD86、CD32表達,ELISA檢測上清細胞因子IFN-α水平。
　　結果：①CpG+HCQ組PBMC中TLR-9mRNA和MyD88mRNA表達水平顯著低于CpG組

3、(P<0.05);②IL-3+CpG組BDCA-2表達水平和平均熒光強度顯著低于IL-3組(P<0.05);③ IL-3+CpG組CD32和CD86表達水平和平均熒光強度顯著高于IL-3組(P<0.05)。④ IL-3+CpG組培養(yǎng)上清IFN-α濃度顯著高于IL-3組(P<0.05)。⑤ IL-3+CpG+HCQ組CD32表達水平和熒光強度均顯著低于IL-3+CpG組(P<0.05);培養(yǎng)上清IFN-α濃度顯著低于 IL-3+CpG組(