復(fù)方中藥注射液“回陽(yáng)液”的研制.pdf

1、目的:本試驗(yàn)以人參、麥冬等數(shù)味中藥所配成的復(fù)方中藥,在提取中藥有效部位和有效成分的基礎(chǔ)上,主要采用傳統(tǒng)的水提醇沉工藝制成3批復(fù)方中藥注射液“回陽(yáng)液”(以下簡(jiǎn)稱回陽(yáng)液),批號(hào)為050315、050320、050325,并對(duì)其質(zhì)量、安全性、急性毒性和療效分別進(jìn)行了研究。
　　 方法:按中藥注射液的質(zhì)量要求,通過(guò)檢測(cè)其pH、鞣質(zhì)、穩(wěn)定性以及無(wú)菌檢查等對(duì)回陽(yáng)液進(jìn)行了質(zhì)量評(píng)定的研究；其中采用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定3批回陽(yáng)液中人參皂

2、苷Rb1含量；回陽(yáng)液的安全性與急性毒性研究采用熱原試驗(yàn)、局部刺激性試驗(yàn)、溶血試驗(yàn)、過(guò)敏試驗(yàn)、經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)、腹腔注射急性毒性試驗(yàn)等試驗(yàn)方法進(jìn)行；采用小鼠冰水游泳試驗(yàn)研究回陽(yáng)液對(duì)小鼠體力和抗應(yīng)激能力的影響；最后通過(guò)復(fù)制急性失血性休克和內(nèi)毒素性休克的病理模型來(lái)觀察回陽(yáng)液對(duì)休克犬的心率、平均動(dòng)脈壓及血清尿素氮、肌酐、總膽固醇、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶的影響,探索該制劑的藥理作用。
　　 結(jié)果:回陽(yáng)液的質(zhì)量檢查結(jié)果表明,3批回

3、陽(yáng)液均符合中藥注射液的質(zhì)量要求,不含鞣質(zhì),無(wú)菌,平均pH為6.53±1.18；用HPLC法測(cè)定回陽(yáng)液中的人參皂苷Rb1含量,其線性范圍在53μg·ml-1～127.2μg·ml-1范圍內(nèi),相關(guān)系數(shù)r=0.9998,平均回收率為99.94±3.47％,RSD=3.47％(n=5)；3批回陽(yáng)液中人參皂苷Rb1的平均含量分別為0.778±0.007mg·ml-1,RSD=0.934％；0.721±0.006mg·ml-1,RSD=0.825％

4、;0.798±0.01mg·ml-1,RSD=1.274％?；仃?yáng)液的穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果為回陽(yáng)液的顏色、澄明度和pH對(duì)熱穩(wěn)定,其中人參皂苷Rb1含量隨溫度、時(shí)間變化符合一級(jí)降解反應(yīng),其在25℃的反應(yīng)速度常數(shù)K25℃=4.4151×10-6,有效期為2.725a?；仃?yáng)液的安全性和急性毒性試驗(yàn)結(jié)果表明,回陽(yáng)液熱原檢查符合2000年版《中華人民共和國(guó)獸藥典》的相關(guān)規(guī)定；局部刺激性極小,僅引起注射局部肌肉組織輕度充血；回陽(yáng)液不引起紅細(xì)胞溶血或凝聚且不

5、引起過(guò)敏反應(yīng)。在經(jīng)口毒性試驗(yàn)中,小鼠無(wú)一死亡；腹腔注射的LD50為56.30ml·kg-1,95％可信限為46.15ml·kg-1～62.27ml·kg-1?；仃?yáng)液能延長(zhǎng)小鼠在冰水中的游泳時(shí)間,與對(duì)照組相比差異極顯著(P<0.01)；犬失血性休克模型其MAP下降并維持在5.33kPa(40mmHg)～6.67kPa(50mmHg),30min不能回升；與對(duì)照組相比,回陽(yáng)液能迅速升高休克犬的平均動(dòng)脈壓(MAP)、左室內(nèi)壓峰值(LVSP)、

6、左室舒張末期壓力(LVEDP)、左室內(nèi)壓最大變化速率(±dp/dtmax)(P<0.05,P<0.01),降低血清中的尿素氮(BUN)、肌酐(CR)、總膽固醇(T-CHOL)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、肌酸激酶(CK)含量(P<0.05,P<0.01)?；仃?yáng)液對(duì)內(nèi)毒素性休克犬亦有相似的治療作用,與對(duì)照組相比能迅速升高休克犬的HR、MAP、INSP、LVEDP、±dp/dtmax(P<0.05,P<0.01)。降低血清中

7、的BUN、CR、T-CHOL、GPT、GOT、CK含量(P<0.05,P<0.01)。
　　 結(jié)論:回陽(yáng)液符合中藥注射液關(guān)于澄明度、鞣質(zhì)、pH、無(wú)菌等質(zhì)量要求；用HPLC對(duì)其中人參皂苷Rb1的含量測(cè)定可作為其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)之一；該制劑安全、毒性小、刺激性小,可用于靜脈、肌肉、腹腔給藥;回陽(yáng)液可增強(qiáng)小鼠的體力和抗寒冷應(yīng)激能力；回陽(yáng)液對(duì)失血性和內(nèi)毒素性休克休克犬的心臟、腎臟和肝臟功能均有一定的保護(hù)作用,能有效延緩休克的惡化,提高休克犬