成纖維細(xì)胞生長因子10及其受體在口腔扁平苔蘚中表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:口腔扁平苔蘚(oral lichen planus，OLP)一種發(fā)生在口腔粘膜的慢性炎癥性角化異常性疾病，是口腔粘膜病中最常見的疾病之一，該病好發(fā)于中年女性，患病率約為0.51％。其典型的組織病理學(xué)表現(xiàn)為:粘膜上皮過度角化或不全角化，顆粒層明顯，棘層肥厚，基底細(xì)胞液化變性，基底膜下有大量淋巴細(xì)胞呈帶狀浸潤。臨床基本特點(diǎn)是口腔粘膜左右對稱性的發(fā)生珠光灰白色條紋，條紋周圍粘膜可出現(xiàn)充血、糜爛、萎縮和水皰等。根據(jù)病損形態(tài)OLP可分為網(wǎng)狀

2、型、環(huán)狀型、條紋型、斑塊型、丘疹型、水皰型、糜爛型和萎縮型八種類型。OLP的病因多種，常與精神、內(nèi)分泌、免疫、感染、微循環(huán)障礙、遺傳等多種因素有關(guān)，但確切的致病機(jī)制還不十分清楚，目前認(rèn)為是一種T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。OLP病程慢性遷延反復(fù)，臨床上治療徹底還是一個難題。
　　 成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)是20世紀(jì)30年代在大腦和垂體的組織提取物中發(fā)現(xiàn)，到70年代被分離提純。FGF是一種重要的細(xì)胞有絲分裂促進(jìn)因子，迄今共鑒定出23種

3、，其中成纖維細(xì)胞生長因子10(fibroblast growth factor 10，F(xiàn)GF10)能特異性的刺激上皮細(xì)胞生長，對角質(zhì)形成細(xì)胞的異常增殖和分化可能有著重要的調(diào)節(jié)作用。FGF10由208個氨基酸組成，有酸和熱不穩(wěn)定性，是一種堿性蛋白，來源于胚胎上皮細(xì)胞、新生或成年間質(zhì)成纖維細(xì)胞系，在成人的腎、胃腸道等臟器均有表達(dá)。它是由間質(zhì)細(xì)胞合成與分泌，其受體則分布在一些上皮細(xì)胞起源的細(xì)胞表面，如皮膚的角質(zhì)形成細(xì)胞和胃腸道粘膜上皮細(xì)胞等。

4、郗彥萍、于春水等人對FGF10在銀屑病病損中的研究中表明:FGF10能誘導(dǎo)角質(zhì)形成細(xì)胞(KC)持續(xù)過度增殖和遷移，從而進(jìn)一步了解銀屑病的發(fā)病機(jī)制，但是在口腔扁平苔蘚中FGF10的表達(dá)情況尚未有研究。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過免疫組織化學(xué)技術(shù)，檢測成纖維細(xì)胞生長因子10(FGF10)以及其受體FGFR2在口腔扁平苔蘚病損組織中的表達(dá)水平及分布特征，進(jìn)一步探討口腔扁平苔蘚的發(fā)病機(jī)制，為臨床上治療口腔扁平苔蘚提供新的治療思路。
　　

5、方法:搜集口腔扁平苔蘚組織蠟塊22例，均經(jīng)過河北醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院病理科檢查證實(shí)。所有病例在取活檢之前三個月內(nèi)未使用任何皮質(zhì)類固醇激素和免疫抑制劑類藥物，無全身疾病。取正常口腔粘膜組織20例，均來自冠延長手術(shù)或埋伏阻生智齒拔出手術(shù)過程中切除的正常粘膜組織，標(biāo)本經(jīng)4％多聚甲醛固定，石蠟包埋，制備5μm厚切片。
　　 運(yùn)用免疫組化SP法分別對FGF10和FGFR2進(jìn)行免疫組化染色。以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為陰性對照，以已知的

6、FGF10和FGFR2陽性標(biāo)本為陽性對照。FGF10和FGFR2免疫組化染色陽性為胞漿或胞膜出現(xiàn)黃色或棕黃色染色，無棕黃色染色者為陰性表達(dá)。采用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行圖像分析。記錄兩種因子的陽性細(xì)胞百分比和染色強(qiáng)度的評分，將兩項(xiàng)得分相乘得出最終結(jié)果。按照最后得分分為以下四個等級:0～1分為陰性（-），2～4分為弱陽性(+)，5～7分為中度陽性(++)，≥8分為強(qiáng)陽性(+++)。
　　 所得數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)

7、分析，采用非參數(shù)兩樣本秩和檢驗(yàn)即Wilcoxon秩和檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α取0.05，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、FGF10在實(shí)驗(yàn)組和對照組的免疫組化染色結(jié)果
　　 免疫組化顯示FGF10陽性表達(dá)為胞膜和胞漿呈不同程度的棕黃色染色，陰性表達(dá)未見棕黃色染色。
　　 在正常的口腔粘膜組織中，F(xiàn)GF10在上皮層中的陽性表達(dá)主要定位于基底層，呈弱陽性表達(dá);在結(jié)締組織中，血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖

8、維細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的胞漿內(nèi)可見陽性著色。在口腔扁平苔蘚組織中，F(xiàn)GF10在上皮層的表達(dá)主要位于棘層和基底層，在棘層細(xì)胞中呈強(qiáng)陽性表達(dá)，在基底層細(xì)胞胞漿中FGF10陽性表達(dá);在結(jié)締組織中，血管內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的胞漿內(nèi)可見陽性著色。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析Z值為-4.248，P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2、FGFR2在實(shí)驗(yàn)組和對照組的免疫組化染色結(jié)果
　　 免疫組化所顯示的FGFR2陽性表達(dá)為胞膜及胞漿呈棕黃色或棕褐

9、色，陰性表達(dá)未見棕黃色染色。
　　 在正?？谇徽衬そM織切片中，F(xiàn)GFR2陽性表達(dá)主要位于上皮的基底層。粘膜下結(jié)締組織中，淋巴細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的胞漿及胞膜可見棕黃色染色。在口腔扁平苔蘚組織切片中，F(xiàn)GFR2在上皮的棘層及基底層細(xì)胞陽性表達(dá)，棘層細(xì)胞呈強(qiáng)陽性表達(dá)，基底細(xì)胞陽性表達(dá)。粘膜下結(jié)締組織中，淋巴細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的胞漿及胞膜可見棕黃色染色。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析Z值為-4.207，P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。