成纖維細胞生長因子10及其受體在口腔扁平苔蘚中表達的實驗研究.pdf

1、目的:口腔扁平苔蘚(oral lichen planus，OLP)一種發(fā)生在口腔粘膜的慢性炎癥性角化異常性疾病，是口腔粘膜病中最常見的疾病之一，該病好發(fā)于中年女性，患病率約為0.51％。其典型的組織病理學表現(xiàn)為:粘膜上皮過度角化或不全角化，顆粒層明顯，棘層肥厚，基底細胞液化變性，基底膜下有大量淋巴細胞呈帶狀浸潤。臨床基本特點是口腔粘膜左右對稱性的發(fā)生珠光灰白色條紋，條紋周圍粘膜可出現(xiàn)充血、糜爛、萎縮和水皰等。根據(jù)病損形態(tài)OLP可分為網(wǎng)狀

2、型、環(huán)狀型、條紋型、斑塊型、丘疹型、水皰型、糜爛型和萎縮型八種類型。OLP的病因多種，常與精神、內(nèi)分泌、免疫、感染、微循環(huán)障礙、遺傳等多種因素有關，但確切的致病機制還不十分清楚，目前認為是一種T細胞介導的免疫反應。OLP病程慢性遷延反復，臨床上治療徹底還是一個難題。
　　 成纖維細胞生長因子(FGF)是20世紀30年代在大腦和垂體的組織提取物中發(fā)現(xiàn)，到70年代被分離提純。FGF是一種重要的細胞有絲分裂促進因子，迄今共鑒定出23種

3、，其中成纖維細胞生長因子10(fibroblast growth factor 10，F(xiàn)GF10)能特異性的刺激上皮細胞生長，對角質(zhì)形成細胞的異常增殖和分化可能有著重要的調(diào)節(jié)作用。FGF10由208個氨基酸組成，有酸和熱不穩(wěn)定性，是一種堿性蛋白，來源于胚胎上皮細胞、新生或成年間質(zhì)成纖維細胞系，在成人的腎、胃腸道等臟器均有表達。它是由間質(zhì)細胞合成與分泌，其受體則分布在一些上皮細胞起源的細胞表面，如皮膚的角質(zhì)形成細胞和胃腸道粘膜上皮細胞等。

4、郗彥萍、于春水等人對FGF10在銀屑病病損中的研究中表明:FGF10能誘導角質(zhì)形成細胞(KC)持續(xù)過度增殖和遷移，從而進一步了解銀屑病的發(fā)病機制，但是在口腔扁平苔蘚中FGF10的表達情況尚未有研究。
　　 本實驗通過免疫組織化學技術，檢測成纖維細胞生長因子10(FGF10)以及其受體FGFR2在口腔扁平苔蘚病損組織中的表達水平及分布特征，進一步探討口腔扁平苔蘚的發(fā)病機制，為臨床上治療口腔扁平苔蘚提供新的治療思路。
　　

5、方法:搜集口腔扁平苔蘚組織蠟塊22例，均經(jīng)過河北醫(yī)科大學附屬醫(yī)院病理科檢查證實。所有病例在取活檢之前三個月內(nèi)未使用任何皮質(zhì)類固醇激素和免疫抑制劑類藥物，無全身疾病。取正?？谇徽衬そM織20例，均來自冠延長手術或埋伏阻生智齒拔出手術過程中切除的正常粘膜組織，標本經(jīng)4％多聚甲醛固定，石蠟包埋，制備5μm厚切片。
　　 運用免疫組化SP法分別對FGF10和FGFR2進行免疫組化染色。以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為陰性對照，以已知的

6、FGF10和FGFR2陽性標本為陽性對照。FGF10和FGFR2免疫組化染色陽性為胞漿或胞膜出現(xiàn)黃色或棕黃色染色，無棕黃色染色者為陰性表達。采用圖像分析系統(tǒng)進行圖像分析。記錄兩種因子的陽性細胞百分比和染色強度的評分，將兩項得分相乘得出最終結果。按照最后得分分為以下四個等級:0～1分為陰性（-），2～4分為弱陽性(+)，5～7分為中度陽性(++)，≥8分為強陽性(+++)。
　　 所得數(shù)據(jù)均采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學

7、分析，采用非參數(shù)兩樣本秩和檢驗即Wilcoxon秩和檢驗，檢驗水準α取0.05，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:
　　 1、FGF10在實驗組和對照組的免疫組化染色結果
　　 免疫組化顯示FGF10陽性表達為胞膜和胞漿呈不同程度的棕黃色染色，陰性表達未見棕黃色染色。
　　 在正常的口腔粘膜組織中，F(xiàn)GF10在上皮層中的陽性表達主要定位于基底層，呈弱陽性表達;在結締組織中，血管內(nèi)皮細胞、成纖

8、維細胞和淋巴細胞的胞漿內(nèi)可見陽性著色。在口腔扁平苔蘚組織中，F(xiàn)GF10在上皮層的表達主要位于棘層和基底層，在棘層細胞中呈強陽性表達，在基底層細胞胞漿中FGF10陽性表達;在結締組織中，血管內(nèi)皮細胞、成纖維細胞和淋巴細胞的胞漿內(nèi)可見陽性著色。經(jīng)統(tǒng)計學分析Z值為-4.248，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義。
　　 2、FGFR2在實驗組和對照組的免疫組化染色結果
　　 免疫組化所顯示的FGFR2陽性表達為胞膜及胞漿呈棕黃色或棕褐

9、色，陰性表達未見棕黃色染色。
　　 在正?？谇徽衬そM織切片中，F(xiàn)GFR2陽性表達主要位于上皮的基底層。粘膜下結締組織中，淋巴細胞、血管內(nèi)皮細胞和成纖維細胞的胞漿及胞膜可見棕黃色染色。在口腔扁平苔蘚組織切片中，F(xiàn)GFR2在上皮的棘層及基底層細胞陽性表達，棘層細胞呈強陽性表達，基底細胞陽性表達。粘膜下結締組織中，淋巴細胞、血管內(nèi)皮細胞和成纖維細胞的胞漿及胞膜可見棕黃色染色。經(jīng)統(tǒng)計學分析Z值為-4.207，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義。