兒童新甲型(H1N1)流感疫苗接種后疫苗特異性初始T細胞及記憶T細胞表型研究.pdf

1、目的:通過研究兒童甲型H1N1流感疫苗的遠期特異性初始T細胞和記憶T細胞的表型特征,為接種甲型H1N1流感疫苗的遠期效果評價及新疫苗研制和接種策略提供理論指導(dǎo)。
　　方法:(1)在家長自愿的基礎(chǔ)上,選擇31例于2009年12月~2010年1月在深圳市龍崗區(qū)婦幼保健院接種甲型H1N1流感疫苗的3~6歲兒童為研究對象。(2)抽取外周靜脈血3ml,分離淋巴細胞加入甲型H1N1流感疫苗為實驗組,設(shè)未加疫苗為對照組,置5％CO2培養(yǎng)箱中37

2、℃培養(yǎng)50h。以FCM分別檢測細胞表面分子:CD4/CD8、CD45RA、CD45RO、CD62L、CCR7。
　　(3)實驗組與對照組置5%CO2培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)50h后加入CCK-8試劑繼續(xù)培養(yǎng)1h。以CCK-8法檢測細胞增殖,計算細胞增殖指數(shù)。
　　結(jié)果:(1)PBMC中CD4+和CD8+T細胞組成比例以CD4+T細胞為優(yōu)勢,P﹤0.05;CD4+T細胞在實驗組的占比為29.85%,明顯低于對照組的39.00%,P﹤

3、0.05;CD8+T細胞在兩組中所占比例無明顯差異,P﹥0.05。
　　(2)CD4+CD45RA+初始T細胞在實驗組與對照組的比例均高達70%以上,兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P﹥0.05;按抗體水平高低分三組進行比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P﹥0.05。在CD8+CD45RA+也得到相似的數(shù)據(jù)。
　　(3)CD4+CD45RO+記憶T細胞在實驗組占28.54%,在對照組占25.52%,兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P﹥0.05;按抗

4、體水平高低分三組進行比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P﹥0.05。
　　(4)CD4+CD45RO+記憶T細胞二個亞群檢測結(jié)果:CCR7和CD62L單陽性記憶T細胞亞群在實驗組占比明顯低于對照組的占比,P﹤0.05。
　　(5)CD8+CD45RA+初始T細胞在實驗組與對照組的占比均高達80%以上,兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P﹥0.05;按抗體水平高低分三組進行比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P﹥0.05。
　　(6)CD8+CD45RO

5、+記憶T細胞在實驗組與對照組均占17-19%,P﹥0.05;按抗體水平高低分三組進行比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,P﹥0.05。
　　(7)CD8+CD45RO+記憶T細胞二個亞群檢測結(jié)果:CCR7和CD62L單陽性記憶T細胞亞群在實驗組的占比明顯低于對照組的占比,P﹤0.05。
　　(8)應(yīng)用CCK-8法檢測疫苗刺激后抗原特異性增殖,檢測結(jié)果見細胞增殖指數(shù)大于0.8的僅為51.16%,大于1.0在本研究中沒有。
　　結(jié)論:(

6、1)本研究表明31例兒童T細胞CD4+為優(yōu)勢細胞,初始T細胞CD45RA+均較高,具有抗原再刺激后再應(yīng)答的基礎(chǔ);但實驗組初始T細胞不高,說明對該疫苗的免疫記憶基礎(chǔ)差。
　　(2)本研究31例兒童CD4+記憶T細胞為主要表型特征。疫苗特異性記憶T細胞結(jié)果提示甲流疫苗接種3年多后特異性記憶T細胞數(shù)量不多,其功能無特異性再次應(yīng)答。
　　(3)本研究31例兒童記憶T細胞亞群具有多樣性,以中央型記憶細胞為主要表型特征;細胞增殖指數(shù)結(jié)果