ELT對(duì)人工膝關(guān)節(jié)置換術(shù)后早期深部感染的新輔助治療作用及相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、研究背景：全膝關(guān)節(jié)置換（TKA）術(shù)后感染是導(dǎo)致手術(shù)失敗的“災(zāi)難性”并發(fā)癥，臨床診斷與治療十分棘手。近年來，隨著人工關(guān)節(jié)手術(shù)技術(shù)的提高及現(xiàn)代無(wú)菌技術(shù)的普及，術(shù)后感染率明顯下降，但隨著人工關(guān)節(jié)置換手術(shù)的不斷增加，術(shù)后感染的絕對(duì)人數(shù)仍然較多，而且耐藥菌感染不斷增多。目前治療人工全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)后深部感染的金標(biāo)準(zhǔn)是：取出假體、徹底清創(chuàng)、膝關(guān)節(jié)內(nèi)放置抗生素骨水泥間隙墊、全身應(yīng)用抗生素和二期植入新的假體。但需要全身應(yīng)用抗生素治療6周以上才能較好地解決

2、感染復(fù)發(fā)的問題，而長(zhǎng)時(shí)間大量應(yīng)用抗生素可造成患者肝腎功能的損害和細(xì)菌耐藥等一系列問題，同時(shí)也給患者和社會(huì)帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此開展TKA術(shù)后感染的預(yù)防、早期診斷、治療方式的選擇與改良、尋找新型抗生素給藥方法等一系列課題成為廣大關(guān)節(jié)外科醫(yī)生需要攻克的一個(gè)個(gè)難關(guān)。ELT（Endolymphatic Therapy，即淋巴管內(nèi)介入療法）在抗菌治療方面具有直接殺滅細(xì)菌和免疫調(diào)節(jié)的雙重作用，同時(shí)具有減少抗生素用量和縮短用藥時(shí)間的優(yōu)勢(shì)，其為臨床T

3、KA術(shù)后感染的防治提供了新思路。
　　目的：明確ELT抗生素輔助治療TKA術(shù)后早期感染的可行性與優(yōu)越性，探討其抗感染的可能分子機(jī)制。
　　方法：1.采用螺旋 CT三維掃描重建、計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)（CAD）、快速成型技術(shù)（3D打印）設(shè)計(jì)并制作不同型號(hào)兔解剖型人工膝關(guān)節(jié)假體。2.隨機(jī)選取體重2.0~3.5kg成年健康新西蘭大白兔40只，雌雄不限，隨機(jī)分為4組，分別為：對(duì)照組（Contrast）、模型組（Model）、靜脈治療組（In

4、travenous）和淋巴管介入治療組（ELT），每組各10只。4組動(dòng)物均行單膝TKA手術(shù)。術(shù)后2周待手術(shù)切口愈合良好，將濃度為1×105cfu金黃色葡萄球菌（SA）細(xì)菌液接種致Model組、Intravenous組及ELT組動(dòng)物手術(shù)側(cè)膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)，1周后取3組動(dòng)物膝關(guān)節(jié)液，行細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定，確認(rèn)感染模型。將 Model組、Intravenous組及ELT組3組動(dòng)物行膝關(guān)節(jié)翻修手術(shù)，既徹底清創(chuàng)、拔除假體、植入含萬(wàn)古霉素的股骨與脛骨骨水泥占

5、位器，Contrast組單純切開沖洗后縫合。3.術(shù)后Contrast組和Model組動(dòng)物經(jīng)耳緣靜脈輸注生理鹽水，每天一次，每次5.0ml/kg，共28次；Intravenous組經(jīng)耳緣靜脈微泵輸注萬(wàn)古霉素注射液（濃度為：0.5g/100ml），每天一次，每次5.0ml/kg，共28次；ELT組經(jīng)ELT輸注裝置淋巴管或淋巴結(jié)內(nèi)泵入與Intravenous組濃度相同的萬(wàn)古霉素注射液，劑量為靜脈組1/2，每次2.5ml/kg，第一天每12小時(shí)

6、一次，然后每天一次，連續(xù)7天，最后改為隔天一次，共5次，總共19次。4.翻修術(shù)后第0、2、5、9、14、20、28天抽取各組兔外周血，行ESR與CRP檢測(cè)；翻修術(shù)后4周處死各組動(dòng)物行關(guān)節(jié)液培養(yǎng)，分別取膝關(guān)節(jié)骨、滑膜及腘窩淋巴結(jié)組織行 HE染色，采用免疫組化染色與RT-PCR檢測(cè)上述組織中IL-1β、TNF-α、NF-κB、p38MAPK的表達(dá)。
　　結(jié)果：1.采用螺旋CT三維掃描重建、計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)（CAD）、快速成型技術(shù)（3D打

7、印）設(shè)計(jì)與制作出不同型號(hào)兔解剖型人工膝關(guān)節(jié)假體，并成功建立與臨床接近的兔 TKA術(shù)后早期感染模型、翻修模型。2.翻修術(shù)后 Contrast組ESR、CRP數(shù)值隨時(shí)間無(wú)明顯變化，保持在與術(shù)前接近的正常水平；Model組翻修術(shù)后 ESR、CRP數(shù)值均有明顯下降，但約5天后又恢復(fù)至較高水平；Intravenous組中ESR、CRP數(shù)值隨著用藥時(shí)間增加，均有顯著下降（P<0.05），ELT組也均有下降（P<0.05），ELT組各數(shù)值下降速度與幅

8、度明顯快于Intravenous組（P<0.05）。3.翻修術(shù)后4周，免疫組化染色結(jié)果顯示：Intravenous組與ELT組骨組織的IL-1β、TNF-α、NF-κB、p38MAPK的 MD值比較均無(wú)差異（P＞0.05）；滑膜和淋巴結(jié)的 IL-1β、TNF-α、NF-κB的MD值比較有顯著差異（P<0.05），但在p38MAPK的比較無(wú)差異（P＞0.05）。4.翻修術(shù)后4周，RT-PCR結(jié)果顯示：Intravenous組與ELT組骨、

9、滑膜及腘窩淋巴結(jié)組織的IL-1β、TNF-α、NF-κB比較均有顯著差異（P<0.05），但p38MAPK的比較均無(wú)差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：1.采用螺旋CT三維掃描重建、計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)、快速成型等技術(shù)可研發(fā)與臨床接近的兔解剖型人工膝關(guān)節(jié)假體，其手術(shù)植入方法簡(jiǎn)單，術(shù)后功能良好，適用于人工膝關(guān)節(jié)置換手術(shù)的相關(guān)基礎(chǔ)研究。2. ELT抗生素輔助治療TKA術(shù)后早期感染方法可行，與傳統(tǒng)靜脈輸注抗生素方法比較具有減少抗生素用量與縮短用