18F-FDG microPET-CT用于監(jiān)測(cè)裸鼠移植瘤吉非替尼療效的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分
　　 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物準(zhǔn)備對(duì)裸鼠移植瘤模型microPET顯像的影響
　　 目的：
　　 探討實(shí)驗(yàn)動(dòng)物準(zhǔn)備條件對(duì)18F-FDG microPET裸鼠移植瘤模型顯像的影響，以選擇最佳的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物準(zhǔn)備條件。
　　 方法：
　　 36只人表皮樣癌細(xì)胞A431裸鼠皮下移植瘤模型。隨機(jī)分為6組（6只／組）；A組：無禁食、室溫(20～22℃)、無麻醉（注射FDG后60min清醒狀態(tài)）、尾靜脈注射FDG;B組：

2、禁食（6～8小時(shí)）、加溫(30～32℃)、麻醉（全程吸入2％異氟烷麻醉）、尾靜脈注射FDG;C組：無禁食、加溫、麻醉、尾靜脈注射FDG;D組：禁食、室溫、麻醉、尾靜脈注射FDG;E組：禁食、加溫、無麻醉、尾靜脈注射FDG;F組：禁食、加溫、麻醉、腹腔注射FDG。注射FDG約1小時(shí)后，行microPET顯像，測(cè)量皮下移植瘤、頸部肌肉、棕色脂肪、腦、肝臟、腎臟、心臟、哈氏腺及腸道最大每克組織攝取率（%ID/gmax）。掃描前裸鼠均測(cè)血糖。B

3、、F組次日行第二次microPET顯像。測(cè)量皮下移植瘤%ID/gmax。
　　 結(jié)果：
　　 (1)B組、C組、F組裸鼠的血糖水平與腫瘤攝取之間均呈直線負(fù)相關(guān)(P均＜0.05)。A組、D組、E組別血糖與腫瘤攝取（%ID/gmax）相關(guān)性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＞0.05)。
　　 (2)棕色脂肪：A組攝取最高（8.03±1.29），B組攝取降低71.98%(P=0.000)。頸部肌肉：A組攝取最高（16.07±5.20

4、），B組攝取降低81.84%(P=0.000)。各組腦、心臟、肝臟、腎臟、哈氏腺攝取差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。
　　 (3)A組皮下移植瘤／組織或器官的攝取率最低。B組移植瘤／頸部肌肉，移植瘤／肝臟，移植瘤／棕色脂肪的攝取率較A組分別升高6.50倍、1.29倍、4.76倍（P均＜0.05），腫瘤與組織或器官的圖像對(duì)比度明顯改善。
　　 (4)第一次microPET顯像，尾靜脈注射與腹腔注射皮下移植瘤攝取值差別無

5、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.364)。隔日再次microPET顯像，腹腔注射后腹腔可見不同程度顯像劑濃聚，其他正常組織、器官及皮下移植瘤的攝取均減低。腹腔注射方式，兩次皮下移植瘤的攝取值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.025）。
　　 (5)腸道明顯高攝取者，無禁食裸鼠占66.67%;禁食裸鼠占45.83%。
　　 結(jié)論：
　　 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物準(zhǔn)備明顯影響FDG在裸鼠正常組織的分布及皮下移植瘤的攝取。禁食、加溫、麻醉及尾靜脈注射方式

6、，可以改善腫瘤對(duì)FDG的攝取，保證圖像有較好的穩(wěn)定性及可重復(fù)性。
　　 第二部分
　　 MicroPET-CT監(jiān)測(cè)裸鼠移植瘤吉非替尼療效的實(shí)驗(yàn)研究：18F-FDG攝取變化與病理學(xué)變化的關(guān)系
　　 目的：
　　 探討FDG microPET-CT用于監(jiān)測(cè)吉非替尼在體療效的可行性。
　　 方法：
　　 16只人表皮樣癌細(xì)胞A431裸鼠皮下移植瘤模型，隨機(jī)分成治療組(n=10)和對(duì)照組(n=6)

7、。10只人肺腺癌細(xì)胞A549裸鼠移植瘤模型，隨機(jī)分成治療組(n=5)和對(duì)照組(n=5)。治療組給藥前（0天）和給藥（給予吉非替尼100mg/kg，灌胃1次／天）后2天、7天及14天分別進(jìn)行microPET-CT顯像。對(duì)照組給予無菌水（灌胃1次／天），顯像時(shí)間與實(shí)驗(yàn)組相同。勾畫感興趣區(qū)(region-of-interest，ROI)測(cè)量腫瘤最大每克組織攝取率（%ID/gmax）進(jìn)行分析，利用microCT測(cè)量腫瘤的體積。將治療組治療14天

8、后腫瘤體積縮小者分為敏感組；腫瘤體積緩慢增大，但明顯小于對(duì)照組者分為不敏感組（P＜0.05）；腫瘤體積增大與對(duì)照組體積無明顯差異者為耐藥組（P＞0.05）。瘤體標(biāo)本行HE染色。
　　 結(jié)果：
　　 (1)A431腫瘤Day2△%ID/gmax敏感組、不敏感組和對(duì)照組分別為（-30.92±6.66）%、（-5.68±6.95）%和(7.72±3.85)%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均為0.000）。給藥后Day2，敏感組與不敏感

9、組腫瘤體積變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.169)；給藥后Day7，敏感組與不敏感組腫瘤體積變化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.034)。Day14敏感組腫瘤細(xì)胞較不敏感組及對(duì)照組少，且敏感組有大量的壞死灶(P均＜0.05)。
　　 (2)A549腫瘤在不同時(shí)間點(diǎn)治療組與對(duì)照組腫瘤攝取、體積變化均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＞0.05)。Day14治療組與對(duì)照組腫瘤壞死率差別亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.795)。
　　 (3)Day2、Day7、Da

10、y14腫瘤△%ID/gmax用于監(jiān)測(cè)A431腫瘤對(duì)吉非替尼治療的敏感性均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(AUC均為1.000，P均為0.011)。在治療后2天，攝取變化以-16.0%為分界點(diǎn)時(shí)，預(yù)測(cè)敏感組腫瘤的敏感性及特異性均為100%。
　　 結(jié)論：
　　 (1)A431腫瘤給予吉非替尼治療后2天，敏感組與不敏感組腫瘤FDG攝取變化率即有明顯差異；治療后7天，敏感組與不敏感組腫瘤體積變化才有明顯變化。治療后14天敏感組腫瘤壞死率明顯大于

11、不敏感組及對(duì)照組。
　　 (2)A549腫瘤給予吉非替尼治療后2天、7天、14天，治療組（均為耐藥組）與對(duì)照組腫瘤FDG攝取變化率、體積變化率均無明顯差異。治療后14天治療組與對(duì)照組腫瘤壞死率無明顯差別。
　　 (3)A431腫瘤給予吉非替尼治療后2天、7天、14天，F(xiàn)DG攝取變化率均可用于監(jiān)測(cè)腫瘤對(duì)吉非替尼治療的敏感性。
　　 (4)以用藥后2天FDG攝取變化-16.0%為分界點(diǎn)，預(yù)測(cè)A431敏感組腫瘤的敏感性

12、及特異性均很高。
　　 第三部分
　　 MicroPET-CT監(jiān)測(cè)吉非替尼在體治療敏感性的實(shí)驗(yàn)研究：18F-FDG攝取變化與生物學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性
　　 目的：比較裸鼠移植瘤吉非替尼治療后FDG攝取變化與P-EGFR、Ki-67、Glut-1及caspase-3表達(dá)變化的關(guān)系，探討microPET-CT能否早期監(jiān)測(cè)吉非替尼在體治療敏感性。
　　 方法：將48只人表皮樣癌細(xì)胞A431裸鼠移植瘤動(dòng)物模型隨機(jī)分成2

13、組（24只／組）。治療組給予吉非替尼前和后2天、7天及14天分別進(jìn)行小動(dòng)物PET-CT顯像，吉非替尼灌胃1次／天。對(duì)照組給予無菌水灌胃1次／天，顯像時(shí)間點(diǎn)與實(shí)驗(yàn)組相同。以治療組治療2天后腫瘤攝取降低16%為臨界點(diǎn)，降低≥16%為敏感組，＜16%為不敏感組。不同時(shí)間點(diǎn)腫瘤標(biāo)本均行免疫組織化學(xué)染色，分別檢測(cè)P-EGFR、Ki-67、Glut-1及caspase-3表達(dá)，并分析其與腫瘤FDG攝取變化的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：
　　

14、 (1)給藥后腫瘤FDG攝取降低。Day2敏感組、不敏感組和對(duì)照組△%ID/gmax分別為(-31.07±6.33)%、(-6.14±5.31)%和（4.18±3.81）%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。Day7、Day14敏感組、不敏感組和對(duì)照組△%ID/gmax差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.05)。
　　 (2)給藥后腫瘤P-EGFR表達(dá)減少。Day2敏感組、不敏感組和對(duì)照組△P-EGFR分別為（-89.20±4.

15、10）%、（-84.94±3.40）%和（-5.56±35.10）%；敏感組或不敏感組與對(duì)照組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）；敏感組與不敏感組△P-EGFR差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.811)。
　　 (3)給藥后腫瘤Ki-67表達(dá)減少。Day2敏感組、不敏感組和對(duì)照組△Ki-67分別為（-79.02±5.51）%、(-50.14±10.73)%和（32.95±19.39）%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。Day7、

16、Day14敏感組、不敏感組和對(duì)照組△Ki-67差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。
　　 (4)給藥后腫瘤Glut-1表達(dá)減少。Day2敏感組、不敏感組和對(duì)照組△Glut-1分別為（-47.70±9.75）%、（-20.47±6.15）%和（8.79±12.86）%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.01)。Day7、Day14敏感組、不敏感組和對(duì)照組△Glut-1差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。
　　 (5)給藥后

17、腫瘤caspase-3表達(dá)增加。Day2敏感組、不敏感組和對(duì)照組△caspase-3分別為（62.71±9.71）%、(55.81±12.35)%和（4.93±6.93）%；敏感組或不敏感組與對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.01)；敏感組與不敏感組△caspase-3差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.325)。
　　 (6)Day0、Day2、Day7及Day14，腫瘤%ID/gmax與Ki-67、Glut-1表達(dá)均有直線相關(guān)關(guān)系(P

18、均＜0.05)。
　　 (7)治療后Day2、Day7及Day14，△%ID/gmax與△Ki-67、△Glut-1均有直線相關(guān)關(guān)系（P均＜0.05）。
　　 結(jié)論：吉非替尼治療后2天、7天及14天，敏感組腫瘤FDG攝取明顯低于不敏感組腫瘤，敏感組腫瘤Ki-67、Glut-1表達(dá)明顯低于不敏感組腫瘤；腫瘤FDG攝取變化與Ki-67、Glut-1表達(dá)變化呈直線相關(guān)，即給藥后2天，腫瘤FDG攝取變化可反映Ki-67、Glut