從病理角度研究不同手性結(jié)構(gòu)氨氯地平對(duì)家兔動(dòng)脈粥樣硬化病變的影響.pdf

1、目的:多項(xiàng)研究顯示，氨氯地平具有抗動(dòng)脈粥樣硬化(AS)作用，然而其抗AS作用來源于消旋氨氯地平的左旋成分還是右旋成分，一直是臨床醫(yī)生及臨床藥師所關(guān)心的問題。有學(xué)者認(rèn)為，右旋氨氯地平具有抗AS作用，但支持該觀點(diǎn)的研究證據(jù)很少。也有專家認(rèn)為右旋氨氯地平可能是產(chǎn)生水腫、頭暈等眾多不良反應(yīng)的雜質(zhì)成分。明確抗AS作用來源，對(duì)正確理解不同手性結(jié)構(gòu)氨氯地平在降壓及靶器官保護(hù)作用方面具有重要意義。本實(shí)驗(yàn)擬以新西蘭家兔為研究對(duì)象，通過比較不同手性結(jié)構(gòu)氨氯

2、地平對(duì)高脂飲食飼養(yǎng)家兔血管管腔面積(LA)、斑塊面積(PA)和PA與LA之比(即管腔狹窄率，PA/LA)及外彈力膜內(nèi)橫截面積(EEMA)、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)表達(dá)面積的影響，探討不同手性結(jié)構(gòu)氨氯地平的抗AS作用。
　　 方法:健康雄性新西蘭家兔30只，體重2.0±0.3kg，2月齡（購(gòu)自河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心），常規(guī)飼養(yǎng)于河北省人民醫(yī)院動(dòng)物中心。家兔造模前基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1w，在穩(wěn)定其代謝狀況后，隨機(jī)分為四組。

3、對(duì)照組（A組）僅給予高脂飼料（基礎(chǔ)飼料+2％豬大油+1％膽固醇）喂養(yǎng)，三個(gè)實(shí)驗(yàn)組在高脂飼料喂養(yǎng)的同時(shí)分別予左旋氨氯地平（2.5mg/d，B組）、右旋氨氯地平(2.5mg/d，C組)、消旋氨氯地平（5mg/d，D組）喂養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)4w后隨機(jī)處死對(duì)照組家兔1只，病理切片鏡下觀察，證實(shí)AS形成。分別于實(shí)驗(yàn)前、實(shí)驗(yàn)4w及8w，監(jiān)測(cè)血清甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平。實(shí)驗(yàn)8w

4、末，處死各組家兔，取組織進(jìn)行病理學(xué)觀察，測(cè)算主動(dòng)脈內(nèi)膜斑塊面積，測(cè)量值包括LA、PA和PA/LA;應(yīng)用MCP-1單克隆抗體對(duì)組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，通過圖像計(jì)量分析系統(tǒng)(ImageProplusAnalysissoftware)進(jìn)行MCP-1陽(yáng)性面積分析，并計(jì)算MCP-1陽(yáng)性面積與EEMA比值。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示。計(jì)量資料均進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，多組樣本

5、間比較采用方差分析（F檢驗(yàn)），兩兩之間比較使用SNK-q檢驗(yàn);非正態(tài)分布及方差不齊數(shù)據(jù)，采用非參數(shù)檢驗(yàn)(Kruskal-Wallis)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、不同手性結(jié)構(gòu)氨氯地平對(duì)AS模型家兔血脂參數(shù)的影響
　　 方差分析結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)前各組TC、LDL-C、HDL-C、TG濃度無(wú)顯著差異。實(shí)驗(yàn)4w后各組血脂水平監(jiān)測(cè)，各組間無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。實(shí)驗(yàn)8w后各組血脂水平監(jiān)測(cè)，各組間無(wú)

6、顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 2、不同手性結(jié)構(gòu)氨氯地平對(duì)高脂誘導(dǎo)AS模型家兔MCP-1陽(yáng)性面積與EEMA比值影響
　　 四組家兔管腔AS斑塊MCP-1面積與EEMA比依次為:0.17±0.06，0.07±0.05，0.14±0.09，0.05±0.03;各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布，非參數(shù)檢驗(yàn)(Kruskal-Wallis)顯示，各組MCP-1陽(yáng)性面積與EEMA比存在差異且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=12.271，P=0.007)。A

7、組與B、D組存在顯著差異(P=0.02，P=0.001)，與C組無(wú)顯著差別(P=0.246)。與C組相比，D組可顯著降低MCP-1面積與EEMA比（P=0.04）。
　　 3、不同手性結(jié)構(gòu)氨氯地平對(duì)AS模型家兔管腔狹窄率(PA/LA)的影響
　　 四組家兔管腔狹窄率依次為:0.14±0.06，0.07±0.05，0.08±0.05，0.06±0.04;各組數(shù)據(jù)均正態(tài)分布且方差齊，采用方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。結(jié)果顯示，各組

8、管腔狹窄率存在差異，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=4.25，P=0.015)。SNK-q多重比較顯示，與對(duì)照組相比，不同手性結(jié)構(gòu)氨氯地平組均可顯著降低管腔狹窄率，各實(shí)驗(yàn)組間無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)論:
　　 1、不同手性結(jié)構(gòu)氨氯地平對(duì)AS模型家兔血清中LDL-C、TC、HDL-C及TG水平無(wú)顯著影響。
　　 2、左旋氨氯地平與消旋氨氯地平均可顯著降低MCP-1陽(yáng)性面積與EEMA比。與右旋氨氯地平相比，消旋氨氯地平可