基因槍轉(zhuǎn)多基因楊樹的獲得.pdf

1、楊樹是世界上重要的經(jīng)濟(jì)樹種，又是林木基因工程研究的模式樹種。雖然已有許多楊樹遺傳轉(zhuǎn)化成功的報(bào)道，但獲得的理想植株并不多。究其原因，首先是自然界生物的多數(shù)性狀往往是由多基因控制的，多數(shù)的遺傳轉(zhuǎn)化研究是將一個(gè)或兩個(gè)外源基因轉(zhuǎn)入受體楊樹。為了達(dá)到培育高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、多抗等性狀的品種目的，需要把三個(gè)或更多有用基因?qū)霔顦渲校M(jìn)行多基因操縱。 本研究通過基因槍共轉(zhuǎn)化方法將枯草桿菌果聚糖蔗糖酶基因(SacB)、透明顫菌血紅蛋白基因(vgb)、雙

2、價(jià)抗蛀干害蟲基因(BtCry3A+OC-I)、調(diào)節(jié)基因JERFs等外源基因?qū)霂?kù)安托楊(P.×euramericacana'Guariento')和銀腺雜種楊(P.alba×P.glandulosa)中，結(jié)果如下： 1.卡那霉素篩選。共獲得27株庫(kù)安托楊抗性植株和41株銀腺雜種楊抗性植株。 2.點(diǎn)雜交。結(jié)果表明，27株抗性株庫(kù)安托楊中共有18株檢測(cè)到陽性信號(hào)，檢出率占66.7％。41株抗性株銀腺雜種楊中共有29株檢測(cè)到陽

3、性信號(hào)，檢出率占70.7％。此外，許多系號(hào)未能檢測(cè)到陽性信號(hào)。其中庫(kù)安托楊中含5個(gè)外源基因的株系有8株，3個(gè)外源基因的株系有7株，含2個(gè)外源基因的株系有2株，1個(gè)外源基因的株系有1株。銀腺雜種楊中含5個(gè)外源基因的株系有8株，含4個(gè)外源基因的株系有6株，含3個(gè)外源基因的株系有6株，2個(gè)外源基因的株系有2株，1個(gè)外源基因的株系有7株。 3.Southern雜交。依據(jù)點(diǎn)雜交結(jié)果，對(duì)含有全部外源基因的庫(kù)安托楊抗性株進(jìn)行了Southern