健脾疏肝降脂方對(duì)非酒精性脂肪肝小鼠肝功能及肝纖維化指標(biāo)的影響.pdf

1、目的：觀察健脾疏肝降脂方對(duì)小鼠非酒精性脂肪肝的防治作用，通過健脾疏肝降脂方對(duì)肝功能、肝纖維化指標(biāo)等方面的影響闡明其對(duì)小鼠非酒精性脂肪肝的作用機(jī)制，為健脾疏肝降脂方在非酒精性脂肪肝領(lǐng)域的應(yīng)用提供新的依據(jù)，更好地指導(dǎo)臨床應(yīng)用，并為進(jìn)一步的科學(xué)研究開拓思路。
　　方法：72只SPF（specific pathogen Free）級(jí)昆明種小鼠，雌雄各半，給予SPF級(jí)飼料喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為6組，即正常組，模型對(duì)照組，殼脂膠囊組，健脾疏肝降

2、脂方高、中、低劑量組，每組各12只。正常對(duì)照組給予普通飼料，其余各組采用高脂飼料喂養(yǎng)，并在下腹部給予皮下注射10％的CCl4食用油溶液，劑量為0.1mL/10g，2次/周。同時(shí)，正常組和模型組給予同體積的超凈水灌服，余組給予相應(yīng)劑量的健脾疏肝降脂方藥液或殼脂膠囊水溶液灌服，均為0.2mL/10g體重，連續(xù)6周。最后1次治療后禁食12h，給予10%水合氯醛溶液4mL/kg腹腔內(nèi)注射麻醉，麻醉成功后，給予腹主動(dòng)脈穿刺取血，將血樣低溫下離心分

3、離，檢測(cè)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、血清γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、血清磷酸酶（AKP）及肝纖維化指標(biāo)：透明質(zhì)酸（HA）、IV型膠原（CIV）、層粘連蛋白（LN）、Ⅲ型前膠原（PCⅢ）的含量。處死小鼠后，快速剖取肝臟稱其濕重，計(jì)算肝指數(shù)，用0.9%氯化鈉溶液沖洗，在肝臟左葉同位置處剪一小塊大小適宜的肝組織置于4％多聚甲醛液中固定，給予肝組織石蠟包埋，切片，HE染色，觀察組織病理學(xué)變化。
　　結(jié)果：

4、①模型組與正常組比較，其小鼠肝指數(shù)、肝功能及肝纖維化指標(biāo)ALT、AST、GGT、AKP、HA、CIV、LN、PCⅢ均有明顯的升高，有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。②與正常組相比，治療各組肝指數(shù)及ALT、AST、GGT、AKP、HA、CIV、LN、PCⅢ均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在降低GGT、LN水平方面，治療高、中劑量組與正常組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；在降低PCⅢ、CIV水平方面，治療中劑量組與正常組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（

5、P>0.05）。③與模型組對(duì)比，除在降低LN水平方面低劑量組與模型組對(duì)比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）外，治療高、中、低組、殼脂膠囊組，其余各項(xiàng)指標(biāo)均明顯降低或者減輕，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。④在改善肝臟相關(guān)指標(biāo)方面：各劑量組均能降低非酒精性脂肪肝小鼠血清ALT、AST、AKP、GGT、HA、PCⅢ、LN、CIV水平，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；其中在降低ALT、HA、GGT水平方面，中、高劑量組效果優(yōu)于殼脂膠囊組、低劑量

6、組；在降低AST水平方面，中劑量組優(yōu)于其它3組；在降低AKP水平方面，從均數(shù)上看中劑量組效果最好，高劑量組次之，低劑量組再次之，殼脂膠囊組最差；在降低PCⅢ、CIV水平方面，中劑量組效果最好，低、高及殼脂膠囊組有一定的治療作用。⑤光鏡下可見：肝小葉結(jié)構(gòu)正常，肝細(xì)胞索排列較整齊，放射狀排列存在，小葉周邊出現(xiàn)少量肝細(xì)胞小泡性脂肪變性，細(xì)胞內(nèi)胞漿豐富，細(xì)胞核大小正常，位置居中，與模型組對(duì)比肝細(xì)胞脂肪變性程度得到較大改善，脂肪變的肝細(xì)胞數(shù)目明顯

7、減少，胞質(zhì)內(nèi)脂滴減少或消失，胞質(zhì)豐富，部分肝細(xì)胞較正常組腫大，胞漿內(nèi)胞漿豐富，細(xì)胞核大小正常，位置居中，可見少量的脂肪空泡。肉眼觀察肝臟顏色呈鮮紅色，表明肝內(nèi)已沒有明顯的脂肪沉積。各組間非脂肪肝小鼠肝指數(shù)比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。
　　結(jié)論：（1）健脾疏肝降脂方對(duì)NAFLD小鼠的ALT、AST、GGT、AKP及HA、CIV、LN、PCⅢ均有良好的調(diào)節(jié)作用，通過促進(jìn) NAFLD小鼠病變肝臟細(xì)胞的恢復(fù)來降低血清轉(zhuǎn)氨酶的活性，減