貴州矮馬主要傳染性疾病的血清學(xué)和病原學(xué)研究.pdf

1、貴州矮馬是目前全球僅存的少數(shù)天然矮馬品種之一，是在自然生態(tài)環(huán)境和人工選擇的雙重影響下形成的珍貴遺傳資源，主要分布在黔西南一帶的偏遠(yuǎn)山區(qū)，其中以安順市紫云縣火花鄉(xiāng)的矮馬最為著名。2013年間，紫云縣的馬匹出現(xiàn)大量死亡現(xiàn)象，尤其是以懂桑村養(yǎng)殖的貴州矮馬死亡率最高，發(fā)病率70.1％，死亡率60%，死亡病因不明。針對(duì)病馬臨床癥狀的分析，懷疑可能是馬泰勒蟲（Theileria equi）、馬駑巴貝斯蟲（Babesia caballi）、馬傳染性貧

2、血病毒（Equine InfectiousAnemia virus，EIAV）、馬動(dòng)脈炎病毒（Equine arteritis virus，EAV）或者馬皰疹病毒I型（Equine herpesvirus type-1，EHV-1）所引發(fā)的傳染性疾病。本研究采用血液涂片鏡檢、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reactio

3、n, PCR）的方法對(duì)可疑的病原進(jìn)行血清學(xué)和分子病原學(xué)研究，以期找到貴州矮馬大量死亡的真正病因。
　　采用競(jìng)爭性酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（cELISA）和 PCR的方法對(duì)馬泰勒蟲病和馬駑巴貝斯蟲病的血清學(xué)和分子病原學(xué)進(jìn)行研究，結(jié)果表明，cELISA方法檢測(cè)貴州矮馬、西南馬和伊犁馬血漿樣品中馬泰勒蟲抗體陽性率分別為23.86%、11.43%、31.71%，而只有伊犁馬樣品中檢測(cè)到馬駑巴貝斯蟲抗體，陽性率為85.37%。三個(gè)馬群中均檢測(cè)到馬泰

4、勒蟲和馬駑巴貝斯蟲的18s rRNA基因，貴州矮馬、西南馬和伊犁馬血液樣品中馬泰勒蟲18s rRNA基因的檢出率分別為78.41%、62.86%、68.29%，而馬駑巴貝斯蟲的18s rRNA基因檢出率分別為11.36%、11.43%、90.24%。同時(shí)，對(duì)新鮮血液樣品制作血液涂片，經(jīng)顯微鏡觀察，發(fā)現(xiàn)馬泰勒蟲和馬駑巴貝斯蟲蟲體的存在，其大小及形態(tài)特征與文獻(xiàn)中的描述相符。
　　PCR和cELISA兩種方法的檢測(cè)結(jié)果存在一定的差異，P

5、CR的陽性率普遍高于cELISA的陽性率，這可能是由于 PCR方法檢測(cè)靈敏度較高，另外，可能是由于采樣時(shí)部分馬匹正處于感染的早期階段，還沒有抗體的產(chǎn)生。有些樣品的cELISA檢測(cè)結(jié)果為陽性，但 PCR方法檢測(cè)卻為陰性，這可能是由于馬匹體內(nèi)的馬泰勒蟲蟲體已被自身的吞噬系統(tǒng)消除，但其抗體還會(huì)在體內(nèi)存在一段時(shí)間。有部分樣品 cELISA檢測(cè)結(jié)果為陰性，但 PCR方法檢測(cè)卻為陽性，可能是因?yàn)榧闹鲃偙桓腥荆蛘呤窃诳贵w消失后又出現(xiàn)了新的感染。

6、r>　　以貴州矮馬、西南馬和伊犁馬的血清為材料，采用 ELISA的方法對(duì) EIAV、EAV和EHV-1進(jìn)行血清學(xué)研究，3個(gè)馬群中均未檢測(cè)到 EIAV抗體陽性樣品；EAV的陽性率為48.08%、22.86%、10.81%；EHV-1的陽性率為99.38%、97.14%、100%。對(duì) EHV-1的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，貴州矮馬、西南馬和伊犁馬EHV-1的檢出率分別為94.23%、80%、83.78%。由于馬傳貧與馬泰勒蟲病的臨床癥狀比較相似

7、，所以 EIAV抗體陰性的結(jié)果為馬泰勒蟲病的確診提供了理論依據(jù)。EHV-1的陽性率很高，但是其所導(dǎo)致的疾病死亡率并不高，可能一種繼發(fā)性感染。貴州矮馬EAV血清學(xué)陽性率較西南馬和伊犁馬要高，而且馬病毒性動(dòng)脈炎的死亡率較高，表明EAV可能是導(dǎo)致貴州矮馬大量死亡的病原之一。
　　研究結(jié)果表明，馬泰勒蟲病和馬病毒性動(dòng)脈炎可能是導(dǎo)致貴州矮馬大量死亡的主要原因。對(duì)尚存活的患病馬匹根據(jù)其臨床癥狀施以伊維菌素、血蟲迪以及附紅二合一藥物進(jìn)行及時(shí)的治