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文檔簡介
1、貴州矮馬是目前全球僅存的少數(shù)天然矮馬品種之一,是在自然生態(tài)環(huán)境和人工選擇的雙重影響下形成的珍貴遺傳資源,主要分布在黔西南一帶的偏遠山區(qū),其中以安順市紫云縣火花鄉(xiāng)的矮馬最為著名。2013年間,紫云縣的馬匹出現(xiàn)大量死亡現(xiàn)象,尤其是以懂桑村養(yǎng)殖的貴州矮馬死亡率最高,發(fā)病率70.1%,死亡率60%,死亡病因不明。針對病馬臨床癥狀的分析,懷疑可能是馬泰勒蟲(Theileria equi)、馬駑巴貝斯蟲(Babesia caballi)、馬傳染性貧
2、血病毒(Equine InfectiousAnemia virus,EIAV)、馬動脈炎病毒(Equine arteritis virus,EAV)或者馬皰疹病毒I型(Equine herpesvirus type-1,EHV-1)所引發(fā)的傳染性疾病。本研究采用血液涂片鏡檢、酶聯(lián)免疫吸附實驗(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reactio
3、n, PCR)的方法對可疑的病原進行血清學和分子病原學研究,以期找到貴州矮馬大量死亡的真正病因。
采用競爭性酶聯(lián)免疫吸附試驗(cELISA)和 PCR的方法對馬泰勒蟲病和馬駑巴貝斯蟲病的血清學和分子病原學進行研究,結(jié)果表明,cELISA方法檢測貴州矮馬、西南馬和伊犁馬血漿樣品中馬泰勒蟲抗體陽性率分別為23.86%、11.43%、31.71%,而只有伊犁馬樣品中檢測到馬駑巴貝斯蟲抗體,陽性率為85.37%。三個馬群中均檢測到馬泰
4、勒蟲和馬駑巴貝斯蟲的18s rRNA基因,貴州矮馬、西南馬和伊犁馬血液樣品中馬泰勒蟲18s rRNA基因的檢出率分別為78.41%、62.86%、68.29%,而馬駑巴貝斯蟲的18s rRNA基因檢出率分別為11.36%、11.43%、90.24%。同時,對新鮮血液樣品制作血液涂片,經(jīng)顯微鏡觀察,發(fā)現(xiàn)馬泰勒蟲和馬駑巴貝斯蟲蟲體的存在,其大小及形態(tài)特征與文獻中的描述相符。
PCR和cELISA兩種方法的檢測結(jié)果存在一定的差異,P
5、CR的陽性率普遍高于cELISA的陽性率,這可能是由于 PCR方法檢測靈敏度較高,另外,可能是由于采樣時部分馬匹正處于感染的早期階段,還沒有抗體的產(chǎn)生。有些樣品的cELISA檢測結(jié)果為陽性,但 PCR方法檢測卻為陰性,這可能是由于馬匹體內(nèi)的馬泰勒蟲蟲體已被自身的吞噬系統(tǒng)消除,但其抗體還會在體內(nèi)存在一段時間。有部分樣品 cELISA檢測結(jié)果為陰性,但 PCR方法檢測卻為陽性,可能是因為寄主剛被感染,或者是在抗體消失后又出現(xiàn)了新的感染。
6、r> 以貴州矮馬、西南馬和伊犁馬的血清為材料,采用 ELISA的方法對 EIAV、EAV和EHV-1進行血清學研究,3個馬群中均未檢測到 EIAV抗體陽性樣品;EAV的陽性率為48.08%、22.86%、10.81%;EHV-1的陽性率為99.38%、97.14%、100%。對 EHV-1的DNA進行PCR擴增,貴州矮馬、西南馬和伊犁馬EHV-1的檢出率分別為94.23%、80%、83.78%。由于馬傳貧與馬泰勒蟲病的臨床癥狀比較相似
7、,所以 EIAV抗體陰性的結(jié)果為馬泰勒蟲病的確診提供了理論依據(jù)。EHV-1的陽性率很高,但是其所導致的疾病死亡率并不高,可能一種繼發(fā)性感染。貴州矮馬EAV血清學陽性率較西南馬和伊犁馬要高,而且馬病毒性動脈炎的死亡率較高,表明EAV可能是導致貴州矮馬大量死亡的病原之一。
研究結(jié)果表明,馬泰勒蟲病和馬病毒性動脈炎可能是導致貴州矮馬大量死亡的主要原因。對尚存活的患病馬匹根據(jù)其臨床癥狀施以伊維菌素、血蟲迪以及附紅二合一藥物進行及時的治
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