SREBP1在卵巢上皮癌組織中表達(dá)的臨床意義及SREBP1 shRNA對卵巢癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf

1、研究目的:
　　 卵巢腫瘤是女性生殖器三大惡性腫瘤之一，至今缺乏行之有效的早期診斷方法，近年來發(fā)病率逐年上升，死亡率則居于婦科惡性腫瘤中首位，但其發(fā)病機(jī)制尚不十分明確。特殊的能量代謝和物質(zhì)代謝與腫瘤組織的惡性生物學(xué)行為有緊密的聯(lián)系。早于20世紀(jì)90年代就有脂肪酸合成代謝途徑在惡性腫瘤中的相關(guān)研究。多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性脂肪酸在腫瘤細(xì)胞中生成增多，并且正常細(xì)胞對脂肪酸合成途徑不進(jìn)行調(diào)節(jié)。膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1(sterol regu

2、latory element-bindingprotein1，SREBP1)是一種重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，參與調(diào)節(jié)脂質(zhì)合成代謝過程。SREBP1在多種惡性腫瘤中過度表達(dá)，如前列腺癌、乳腺癌、肝癌和結(jié)腸癌，并且腫瘤細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化，腫瘤的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移與其表達(dá)水平緊密相關(guān)，但迄今尚沒有其在卵巢癌組織中作用的研究。因此，本實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)染色方法檢測良性卵巢腫瘤、交界性卵巢腫瘤和卵巢癌組織中SREBP1的表達(dá)情況，探討其與卵巢癌的臨床病理參數(shù)及預(yù)

3、后的關(guān)系。并通過短發(fā)夾RNA(short hairpin RNA，shRNA)干擾技術(shù)研究SREBP1對卵巢癌細(xì)胞株HO8910pm生物學(xué)行為的影響，進(jìn)一步揭發(fā)卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制，尋找其治療的新角度。
　　 研究方法:
　　 采用免疫組織化學(xué)染色方法分別檢測了15例良性卵巢腫瘤、16例交界性卵巢腫瘤和96例卵巢癌組織中SREBP1的表達(dá)及其細(xì)胞定位情況;應(yīng)用蛋白免疫印跡方法檢測四株卵巢癌細(xì)胞系中SREBP1蛋白水平的

4、表達(dá)，選定高表達(dá)SREBP1的卵巢癌細(xì)胞HO8910pm構(gòu)建SREBP1 shRNA穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系，通過細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)、Transwell細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)等方法分析SREBP1 shRNA對卵巢癌細(xì)胞HO8910pm生物學(xué)行為的影響。
　　 研究結(jié)果:
　　 (1) SREBP1在卵巢癌組織中的表達(dá)率比交界性卵巢腫瘤、良性卵巢腫瘤中高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;
　　 (2)卵巢癌組織中SR

5、EBP1的表達(dá)與FIGO分期、組織學(xué)分級明顯相關(guān)(P＜0.05)。Ⅲ～Ⅳ期和低分化者組織中的SREBP1表達(dá)陽性率均高于Ⅰ～Ⅱ期和高/中分化者(P＜0.05);
　　 (3)Kaplan-Meier生存分析表明:組織學(xué)分級、FIGO分期、SREBP1的表達(dá)均與預(yù)后有關(guān)(P＜0.05)。COX比例風(fēng)險(xiǎn)模型多因素分析進(jìn)一步表明，只有FIGO分期是影響卵巢癌患者預(yù)后的獨(dú)立因素（P＜0.05）;
　　 (4)與對照組相比，SRE

6、BP1 shRNA可減慢卵巢癌細(xì)胞HO8910pm的增殖速度，降低HO8910pm細(xì)胞的侵襲能力和轉(zhuǎn)移能力，并誘導(dǎo)HO8910pm細(xì)胞凋亡，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，但對細(xì)胞周期的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　 (5)SREBP1 shRNA可下調(diào)脂肪酸合成代謝中的相關(guān)基因，如FASN、ACAC、 ACLY、 SCD。
　　 研究結(jié)論:
　　 (1)SREBP1在卵巢癌中過度表達(dá)，并與卵巢癌