毛細(xì)管電泳中涂層技術(shù)及間接激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)的研究與應(yīng)用.pdf

1、高效毛細(xì)管電泳(high performance capillary electrophoresis，HPCE)是20世紀(jì)80年代初發(fā)展起來的新型分離分析技術(shù)，具有分離效率高、速度快、靈敏度高、所需樣品少、成本低、抗污染能力強(qiáng)等特點(diǎn)。毛細(xì)管電泳的理論和應(yīng)用研究是分析化學(xué)最活躍的領(lǐng)域之一，尤其對(duì)于大生物聚合物的分離測(cè)定，是一項(xiàng)強(qiáng)有力的分析技術(shù)，并廣泛應(yīng)用于人類基因組的測(cè)序當(dāng)中。但是，一個(gè)背受關(guān)注的問題是如何降低此類大生物聚合物在毛細(xì)管中的

2、吸附。涂層技術(shù)在毛細(xì)管電泳中的應(yīng)用，在降低蛋白質(zhì)吸附問題上獲得了較好的效果，從而被廣泛的使用。此外，激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器具有很高的靈敏度，可以適應(yīng)毛細(xì)管電泳不同模式的檢測(cè)，已成為藥物分析和生命科學(xué)領(lǐng)域的一種重要的分析檢測(cè)技術(shù)。因此，本文用毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)進(jìn)行研究并提出了分離分析的新體系。 該論文在綜述前人工作的基礎(chǔ)上，開展了如下未見文獻(xiàn)報(bào)道的創(chuàng)新性的研究工作： 1.以CDDS為涂層試劑，通過AFM顯微鏡考察了模

3、擬熔融硅石英板上的CDDS涂層，并通過對(duì)模型化合物-氨基酸的分析與測(cè)定，進(jìn)一步研究了CDDS涂層的性質(zhì)： 2.以CDDS為毛細(xì)管涂層試劑，建立了測(cè)定麻黃堿和偽麻黃堿的膠束電動(dòng)色譜-激光誘導(dǎo)熒光(MEKC-LIF)快速靈敏分析新方法； 3.建立了同時(shí)測(cè)定人血清中表阿霉素、柔紅霉素和去甲氧基柔紅霉素的MEKC-LIF方法，并定量測(cè)定了癌癥病人血清中的表阿霉素和柔紅霉素； 4.使用熒光素鈉作為背景熒光試劑，建立了同時(shí)分

4、析測(cè)定苦參堿、槐定堿和槐果堿的毛細(xì)管區(qū)帶電泳-間接激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)新方法，擴(kuò)大了激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)的應(yīng)用范圍，對(duì)難衍生化合物的分離分析提供了一種新思路和新途徑； 5.以熒光素鈉作為背景熒光試劑，建立了一種用于同時(shí)測(cè)定草豆蔻中山姜素和小豆蔻明含量的膠束電動(dòng)色譜一間接激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)新方法. 論文共分為六章： 第一章：對(duì)毛細(xì)管電泳中涂層技術(shù)的研究進(jìn)展進(jìn)行了較為全面綜述，重點(diǎn)綜述了近年出現(xiàn)的永久涂層、半永久涂層和動(dòng)態(tài)涂層

5、的發(fā)展趨勢(shì)和應(yīng)用。 第二章：以CDDS為涂層試劑，通過AFM顯微鏡和紅外光譜儀考察了模擬熔融硅石英板上的CDDS涂層，并通過對(duì)模型化合物-氨基酸的分析與測(cè)定，進(jìn)一步研究了CDDS涂層的穩(wěn)定性。在最優(yōu)的緩沖溶液條件下，5.5 min內(nèi)分離和測(cè)定了9種氨基酸，遷移時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別小于0.97％。 第三章：在第二章的基礎(chǔ)上，以CDDS為涂層試劑，建立了測(cè)定麻黃堿和偽麻黃堿的膠束電動(dòng)色譜.激光誘導(dǎo)熒光(MEKC-LIF)快

6、速靈敏分析新方法。在最佳條件下，4 min內(nèi)可實(shí)現(xiàn)基線分離，靈敏度高，重現(xiàn)性好。 第四章：建立了同時(shí)測(cè)定人血清中表阿霉素、柔紅霉素和去甲氧基柔紅霉素的MEKC-LIF方法。該方法簡單，靈敏度高，可用于癌癥病人血清中的這三種抗生素的分析，得到的回收率范圍在95.7-100.2％。 第五章：建立了一種毛細(xì)管區(qū)帶電泳-間接激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)法同時(shí)測(cè)定苦參堿、槐定堿和槐果堿的毛細(xì)管區(qū)帶電泳-間接激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)新方法，擴(kuò)大了LIF