脈沖電磁場防治骨質(zhì)疏松癥的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、為了證實(shí)PEMFs在防治骨質(zhì)疏松癥中的作用,我們用該校生物醫(yī)學(xué)工程系研制的頻率分別為1Hz和15Hz,脈沖延時(shí)為5ms,磁感應(yīng)強(qiáng)度為0-8×10<'-4>T的PEMFs骨質(zhì)疏松治療儀進(jìn)行了一系列體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)研究,以探討PEMFs對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防作用以及其作用機(jī)制,尋找最佳的治療"窗口".該研究主要包括兩大部分內(nèi)容.1.體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn):用Sprague-Dawly雌性大鼠去勢建立絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型,去勢后開始用頻率為15Hz、

2、磁感應(yīng)強(qiáng)度分別為2×10<'-4>T、4×10<'-4>T、8×10<'-4>T的PEMFs進(jìn)行6h/d,共12周的治療.觀察不同磁感應(yīng)強(qiáng)度的PEMFs對(duì)去勢大鼠骨鈣素、骨密度、骨生物力學(xué)參數(shù)及骨形態(tài)計(jì)量學(xué)參數(shù)的影響,以探討PEMFs對(duì)去勢大鼠骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防作用;用雌性大鼠去勢建立絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型,去勢后分別在白天(9:00-15:00)和夜間(0:00-6:00)開始用頻率為15Hz、磁感應(yīng)強(qiáng)度4×10<'-4>T的PEMF

3、s進(jìn)行6h/d,共12周的治療,觀察晝夜節(jié)律對(duì)PEMFs預(yù)防去勢大鼠骨質(zhì)疏松癥的作用的影響;用免疫組織化學(xué)方法觀察PEMFs作用后松質(zhì)骨中IL-1 β和TNF-α蛋白表達(dá)的變化,探討IL-1 β和TNF-α在PEMFs預(yù)防骨質(zhì)疏松癥機(jī)制中的作用.2.體外成骨細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn).用SD仔鼠顱骨建立原代大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)模型,并進(jìn)行鑒定;用頻率為15Hz、磁感應(yīng)強(qiáng)度4×10<'-4>T的PEMFs作用于培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞,采用透射電鏡、流式細(xì)胞儀、

4、MTT實(shí)驗(yàn)、ALP活性測定以及四環(huán)素?zé)晒鈽?biāo)記等方法,觀察PEMFs對(duì)大鼠成骨細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)、細(xì)胞周期、增殖、分化以及體外骨形成的影響,觀察PEMFs對(duì)大鼠成骨細(xì)胞的作用;用免疫組織化學(xué)染色的方法觀察PEMFs作用于培養(yǎng)的大鼠成骨細(xì)胞后,成骨細(xì)胞中Cbfa1、BMP-2表達(dá)的變化,探討Cbfa1、BMP-2在PEMFs治療骨質(zhì)疏松癥中的作用機(jī)制;用流式細(xì)胞儀、TUNEL法、免疫組織化學(xué)等方法觀察PEMFs作用于大鼠成骨細(xì)胞后成骨細(xì)胞凋亡率