胸腔積液中表面活性物質(zhì)的檢測(cè)分析.pdf

1、目的： 肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A是原發(fā)性肺腺癌非常有價(jià)值的免疫組織化學(xué)標(biāo)志，本研究旨在檢測(cè)不同病因引起的胸腔積液患者其胸水中肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白-A、D(SP-A、SP-D)，同時(shí)檢測(cè)胸水中磷脂，探討聯(lián)合監(jiān)測(cè)SP-A、SP-D和磷脂對(duì)胸腔積液，尤其是結(jié)核性胸腔積液和原發(fā)性肺腺癌性胸腔積液的鑒別診斷價(jià)值。胸腔鏡下對(duì)胸膜粘連肥厚進(jìn)行評(píng)估，探討不同原因胸腔積液患者胸水中肺表面活性物質(zhì)含量是否與胸膜粘連肥厚有關(guān)。 方法：

2、 1．采用微量BCA法測(cè)定胸水中總蛋白，Western-blotting檢測(cè)胸水中肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白-A和D。其中SP-A和SP-D光密度值采用Alphalmager 2000軟件分析以曲線(xiàn)下面積表示。 2．硫酸-高氯酸消化-孔雀綠顯色法檢測(cè)胸水中總磷脂含量。 3．胸腔鏡下胸膜粘連肥厚評(píng)估參照Lee YC的方法：1分：壁層和臟層胸膜沒(méi)有粘連；2分：壁層和臟層胸膜間罕見(jiàn)粘連；3分：壁層和臟層胸膜可見(jiàn)散在粘連；4分：壁

3、層和臟層胸膜間有很多粘連，但兩層胸膜無(wú)融合；5分：壁層和臟層胸膜間有很多粘連，但兩層胸膜融合少于單側(cè)胸腔的5％；6分：壁層和臟層胸膜間有很多粘連，兩層胸膜間融合占單側(cè)胸腔5％～25％；7分：壁層和臟層胸膜間有很多粘連，且兩層胸膜間融合占單側(cè)胸腔25％～50％；8分：壁層和臟層胸膜間有很多粘連，兩層胸膜間融合大于單側(cè)胸腔50％。 結(jié)果： 1．各組胸水中總蛋白含量 ①原發(fā)性肺腺癌患者胸水中總蛋白為32.2±12.31

4、ug/uL，結(jié)核性胸膜炎患者胸水中蛋白含量為29.4±8.97ug/uL，兩者總蛋白差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。 ②其它：6例原發(fā)性肺鱗癌總蛋白含量為33.5±10.27ug/uL；2例小細(xì)胞肺癌分別是29.6ug/uL和34.8ug/uL；2例胸膜間皮瘤總蛋白分別為35.3ug/uL和32.8ug/uL；4例乳腺癌胸膜轉(zhuǎn)移及肺炎旁胸腔積液的蛋白平均為30.5±3.37ug/uL和29.5±4.36ug/uL，由于樣本數(shù)量

5、太少，未做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 2．胸水中SP-A、SP-D含量 ①原發(fā)性肺腺癌患者胸水中SP-A光密度值高于結(jié)核性胸膜炎患者(265.1±141.1 vs 180.0±64.1，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ②原發(fā)性肺腺癌患者胸水中SP-D光密度值高于結(jié)核性胸膜炎患者(299.9±140.6 vs 206.8±86.8，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ③36例原發(fā)性肺腺癌患者中有23例胸水中SP-A>

6、250，有16例SP-D>250，而SP-A>250和(或)SP-D>250有29例。28例結(jié)核性胸膜炎患者胸水中SP-A、SP-D均未超過(guò)250。 ④其它：本實(shí)驗(yàn)還測(cè)定了4例乳腺癌胸膜轉(zhuǎn)移患者，蛋白條帶較結(jié)核性胸膜炎患者要濃，6例鱗癌中有2例顯出條帶4例無(wú)顯影，2例胸膜間皮瘤及2例小細(xì)胞肺癌均未顯影，4例肺炎患者蛋白條帶濃淡不一，由于樣本數(shù)量太少，未做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 3．胸水中總磷脂含量 ①原發(fā)性肺腺癌患者胸水中

7、磷脂磷含量高于結(jié)核性胸膜炎患者(0.9156±0.4380mmol/L vs 0.9148±0.2870mmol/L，P>0.05)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ②其它：6例原發(fā)性肺鱗癌總磷脂磷含量為0.8257±0.2005mmol/L；2例小細(xì)胞肺癌分別是0.8756mmol/L和0.7120mmol/L；2例胸膜間皮瘤總磷脂分別為0.7153mmol/L和0.7589mmol/L；4例乳腺癌胸膜轉(zhuǎn)移及肺炎旁胸腔積液的磷脂平均為0.

8、7257±0.1235mmol/L和0.8356±0.1587mmol/L，由于樣本數(shù)量太少，未做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 4．肺表面活性物質(zhì)與胸膜肥厚關(guān)系①胸腔鏡下觀察到結(jié)核性胸膜炎患者，胸膜粘連更多見(jiàn)。結(jié)核性胸膜炎患者胸膜粘連評(píng)分高于原發(fā)性肺腺癌性胸腔積液患者(4.3±1.3 vs 2.2±1.0，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ②結(jié)核性胸膜炎患者依據(jù)胸水中SP-A和SP-D表達(dá)分別分為三組：A1組：250>SP-A>200

9、，A2組：200>SP-A>100，A3組：SP-A<100；D1組：250>SP-D>200，D2組：200>SP-D>100，D3組：SP-D<100。 結(jié)核性胸膜炎患者組間比較結(jié)果：A1組與A2組比較(3.3±0.5 vs 3.8±0.8，P>0.05)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。A1組與A3組比較(3.3±0.5 vs 5.3±0.3，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。A2組與A3組比較(3.8±0.8 vs 5.3±0.3，P

10、<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。D1組與D2組比較(3.0±0.4 vs 3.6±1.1，P>0.05)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。D1組與D3組比較(3.0±0.4 vs 5.0±0.7,P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。D2組與D3組比較(3.6±1.1 vs 5.0±0.7，P<0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ③原發(fā)性肺腺癌性胸腔積液及其它惡性胸腔積液患者，在胸腔鏡下很少觀察到胸膜粘連。 結(jié)論： 1．肺表面活性物質(zhì)

11、相關(guān)蛋白A是原發(fā)性肺腺癌的免疫組織化學(xué)標(biāo)志，對(duì)原發(fā)性肺腺癌的鑒別診斷有價(jià)值，聯(lián)合監(jiān)測(cè)肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D對(duì)原發(fā)性肺腺癌和結(jié)核性胸腔積液的鑒別診斷更有意義。 2．原發(fā)性肺腺癌性胸腔積液與結(jié)核性胸膜炎患者胸水中肺表面活性物質(zhì)一磷脂比較，兩者差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3．目前關(guān)于胸膜粘連的機(jī)制尚不清楚，有報(bào)道胸膜腔內(nèi)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)，堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)，腫瘤壞死因子α(T