調(diào)控解偶聯(lián)蛋白2基因的表達對肝細胞缺血后耐受能力的影響.pdf

1、目的: 探討靶向調(diào)控解偶聯(lián)蛋白-2(uncoupling protein 2，UCP-2)基因的表達對肝細胞耐受缺血再灌注損傷能力的影響。 方法: 構(gòu)建針對UCP-2基因的正義及干擾質(zhì)粒siRNA，分別轉(zhuǎn)染至正常肝細胞和脂肪肝細胞中，建立UCP-2 mRNA過度表達及抑制表達的模型。對處于UCP-2 mRNA不同表達狀態(tài)的細胞進行缺血再灌注處理，于再灌注后不同時間點用Annexin V/PI雙標流式細胞儀檢測細胞壞死率、凋亡率和

2、存活率；同時收集細胞檢測細胞內(nèi)ATP、ROS、MDA水平，實時熒光定量檢測UCP-2 mRNA表達水平。 結(jié)果: 缺血再灌注處理后，處于UCP-2 mRNA過表達狀態(tài)的肝細胞內(nèi)對應(yīng)時間點的細胞內(nèi)ROS、MDA、ATP的水平以及細胞存活率均顯著低于其它兩組細胞(P<0.05)，壞死率顯著高于對照組(P<0.05)；各組細胞凋亡率無顯著差異(P>0.05)，而處于UCP-2 mRNA表達抑制狀態(tài)的脂肪肝細胞再灌注6 h以后兩組細胞內(nèi)