調(diào)控解偶聯(lián)蛋白2基因的表達(dá)對(duì)肝細(xì)胞缺血后耐受能力的影響.pdf

1、目的: 探討靶向調(diào)控解偶聯(lián)蛋白-2(uncoupling protein 2，UCP-2)基因的表達(dá)對(duì)肝細(xì)胞耐受缺血再灌注損傷能力的影響。 方法: 構(gòu)建針對(duì)UCP-2基因的正義及干擾質(zhì)粒siRNA，分別轉(zhuǎn)染至正常肝細(xì)胞和脂肪肝細(xì)胞中，建立UCP-2 mRNA過(guò)度表達(dá)及抑制表達(dá)的模型。對(duì)處于UCP-2 mRNA不同表達(dá)狀態(tài)的細(xì)胞進(jìn)行缺血再灌注處理，于再灌注后不同時(shí)間點(diǎn)用Annexin V/PI雙標(biāo)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞壞死率、凋亡率和

2、存活率；同時(shí)收集細(xì)胞檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ATP、ROS、MDA水平，實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)UCP-2 mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果: 缺血再灌注處理后，處于UCP-2 mRNA過(guò)表達(dá)狀態(tài)的肝細(xì)胞內(nèi)對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞內(nèi)ROS、MDA、ATP的水平以及細(xì)胞存活率均顯著低于其它兩組細(xì)胞(P<0.05)，壞死率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；各組細(xì)胞凋亡率無(wú)顯著差異(P>0.05)，而處于UCP-2 mRNA表達(dá)抑制狀態(tài)的脂肪肝細(xì)胞再灌注6 h以后兩組細(xì)胞內(nèi)