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文檔簡介
1、目的:
通過觀察甲醛(FA)對HepG2細(xì)胞內(nèi)外甘油三酯(TG)和游離膽固醇(FC)含量以及脂代謝相關(guān)基因表達(dá)水平的影響,來探討甲醛致肝損傷的可能機(jī)制。
方法:
以0.004、0.02、0.1 mmol/L FA分別處理人肝癌HepG2細(xì)胞24和48 h,采用POD酶法測定細(xì)胞內(nèi)外TG和FC含量,采用QRT-PCR法檢測細(xì)胞內(nèi)與TG代謝相關(guān)基因:固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1(SREBP-1)、二脂酰甘油?;D(zhuǎn)移酶
2、2(DGAT2)、過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAPα)、酯酰肉堿轉(zhuǎn)移酶1(CPT1)、微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(MTTP)、載脂蛋白B100(apoB100)、載脂蛋白E(apoE)、羧酸脂酶3(CES3)、二脂酰甘油酰基轉(zhuǎn)移酶1(DGAT1)、包被蛋白II(COPⅡ)、Sar1b和與FC代謝相關(guān)基因:固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2(SREBP-2)、SREBP裂解激活蛋白(SCAP)、胰島素誘導(dǎo)基因1(Insig1)、羥甲基戊二酰輔酶A還原
3、酶(HMGCR)、低密度脂蛋白受體(LDLR)的表達(dá)水平。
結(jié)果:
第一部分:(1)與陰性對照組相比,甲醛各劑量組染毒48 h可使HepG2細(xì)胞內(nèi)TG含量明顯減少(P<0.05),染毒24 h可使上清中TG含量明顯增加(P<0.05);(2)與陰性對照組相比,染毒48 h,甲醛各劑量組細(xì)胞內(nèi)PPAPα基因表達(dá)水平明顯降低(P<0.05);染毒24 h,0.004 mmol/L FA組或染毒48 h,0.1 mmol/
4、L FA組細(xì)胞內(nèi)CPT1基因表達(dá)水平明顯降低(P<0.05);(3)與陰性對照組相比,染毒24 h,0.004 mmol/L FA組或染毒48 h,甲醛各劑量組細(xì)胞內(nèi)MTTP基因表達(dá)水平明顯升高(P<0.05);染毒24 h,甲醛各劑量組或染毒48 h,0.004 mmol/L FA組細(xì)胞內(nèi)apoB100基因表達(dá)水平明顯升高(P<0.05)。
第二部分:(1)與陰性對照組相比,甲醛各劑量組染毒24和48 h均可使HepG2細(xì)胞
5、內(nèi)FC含量明顯增加(P<0.05),且0.004和0.02 mmol/L FA染毒48 h還可使上清中FC含量明顯減少(P<0.05);(2)與陰性對照組相比,染毒24 h,甲醛各劑量組細(xì)胞內(nèi)HMGCR基因表達(dá)水平明顯升高(P<0.05),染毒48 h,0.1 mmol/L FA組細(xì)胞內(nèi) HMGCR基因表達(dá)水平明顯降低(P<0.05);(3)與陰性對照組相比,染毒48 h,0.02和0.1 mmol/L FA組細(xì)胞內(nèi)LDLR基因表達(dá)水平
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