肝細胞癌中ZHX2對AFP表達調控的研究.pdf

1、中山大學博士學位論文肝細胞癌中ZHX2對AFP表達調控的研究姓名：胡少為申請學位級別：博士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：文劍明20070528中山大學博士學位論文肝細胞癌中ZHX2對AFP表達調控的研究持續(xù)升高的BALB／c／J成年小鼠肝組織中ZHX2第一內含子內有逆轉錄病毒的插入，ZHX2基因轉錄異常進而表達降低。綜上所述，我們可以得出以下結論：ZHX2負性調控BALB／c／J成年小鼠肝組織AFP基因的表達。酵母雙雜交和免疫共沉淀

2、實驗證明ZHX2能與NFYA(nuclearfactorYA)結合發(fā)揮轉錄抑制功能。NFYA是NFY的一個亞單位，NFY是一個廣泛存在于真核細胞的調控因子，包含三個亞單位：NFYA、NFYB和NFYC。NFYB和NFYC相互作用形成二聚體，然后結合NFoYA形成三聚體，從而再與DNA啟動子區(qū)的CCAATbox結合，調控相應基因的表達。NFY的三個亞單位不僅能夠形成三聚體與靶基因相結合，而且可以與非DNA結合蛋白相互作用協(xié)同調節(jié)NFY對靶

3、基因的調控作用。2003年，Kawata等人的研究證明ZHX2能夠負性調控NFY下游基因cde25C的表達。由此，我們可以推測ZHX2可以與NFYA相互作用來負性調控NFY下游基因的表達。目前已知ZHX2能夠負性調控成年小鼠肝組織AFP的表達，那么ZHX2在人類HCC組織中的作用如何，它是否也參與了人類AFP基因的轉錄調控，NFYA是否也參與了這一調控過程呢針對以上問題，我們設計了本實驗。全文分為三章：一、肝細胞癌中ZHX2mRNA及蛋

4、白表達的檢測本實驗檢測了63例HCC及對應的癌旁非腫瘤組織中ZHX2mRNA的表達情況，發(fā)現(xiàn)ZHX2mRNA的表達率在HCC及癌旁非腫瘤組織中無顯著性差異。采用組織芯片和免疫組織化學技術檢測了肝組織中ZHX2蛋白的表達情況，發(fā)現(xiàn)在正常肝組織、肝硬化組織及癌旁非腫瘤組織中均未檢測到ZHX2蛋白的表達，在HCC組織中ZHX2蛋白的表達率為195％。ZHX2蛋白在IIIIV級HCC組織中的表達率為313％，明顯高于III級組織中的表達率(16

5、5％)。ZHX2蛋白在發(fā)生轉移的HCC組織中的表達率(247％)明顯高于無轉移組織中的表達率(168％)；在轉移灶中的表達率(455％)也明顯高于原發(fā)灶中的表達率(242％)。通過對HCC組織中ZHX2蛋白的表達情況與術前血清AFP水平進行配對比較，發(fā)現(xiàn)ZHX2蛋白在血清AFP正常的HCC組織中的表達率為379％，明顯高于血清AFP20I_tg／L組織的表達率(136％)；通過統(tǒng)計分析，發(fā)現(xiàn)ZHX2蛋白與血清AFP呈負相關關系。二、肝細