900MHz微波輻射對(duì)大鼠晝夜節(jié)律的影響.pdf

1、目的：以具有晝夜節(jié)律的大鼠為生物模型，研究900MHz微波輻射對(duì)大鼠晝夜節(jié)律的影響，包括：（1）自發(fā)活動(dòng)的晝夜節(jié)律變化；（2）褪黑素分泌水平的晝夜節(jié)律變化；（3）松果體中NAT基因表達(dá)水平的晝夜節(jié)律變化，初步探討其可能的機(jī)理，為進(jìn)一步了解移動(dòng)通訊微波輻射的生物效應(yīng)和健康影響提供實(shí)驗(yàn)資料。
　　方法：(1)動(dòng)物的篩選和分組：清潔級(jí) SD雄性大鼠，在光暗周期為12h:12h（光照時(shí)間為7點(diǎn)到19點(diǎn)）的光制下飼養(yǎng)8周培養(yǎng)晝夜節(jié)律性，光照

2、強(qiáng)度為300 Lux，隨后放入自發(fā)活動(dòng)視頻分析系統(tǒng)進(jìn)行24h自發(fā)活動(dòng)觀測(cè)，以平均速度為觀測(cè)指標(biāo)。數(shù)據(jù)經(jīng)余弦分析軟件獲取節(jié)律性參數(shù)并擬合為相位響應(yīng)曲線（phase response curves, PRCs)，對(duì)振幅作F檢驗(yàn)，確定是否存在晝夜節(jié)律性。篩選出具有明顯晝夜節(jié)律性的大鼠，按完全隨機(jī)設(shè)計(jì)將動(dòng)物分為對(duì)照組、光照組、ZT3組和ZT15組。（2）微波和可見(jiàn)光照射：ZT3組和ZT15組分別在自發(fā)活動(dòng)的谷值時(shí)點(diǎn)（ZT3點(diǎn)）和峰值時(shí)點(diǎn)（ZT1

3、5點(diǎn)）接受40μw/cm2，900MHz微波輻射，1h/d，連續(xù)14d。光照組在峰值時(shí)點(diǎn)（ZT15點(diǎn)）接受強(qiáng)度為300 Lux的光照，1h/d，連續(xù)14d。對(duì)照組放入GTEM室，但不接受輻射。（3）節(jié)律參數(shù)獲取：照射前后采集自發(fā)活動(dòng)的平均速度；照射后每只大鼠每隔4h心臟取血，ELISA法測(cè)定血漿褪黑素濃度；照射后各實(shí)驗(yàn)組每隔4h采集3只大鼠松果體，共采集6個(gè)時(shí)點(diǎn)，用半定量RT-PCR測(cè)定NAT基因表達(dá)水平。利用余弦節(jié)律軟件，根據(jù)方程式F

4、(t)=M+Acos(ωt+Φ)將各指標(biāo)數(shù)據(jù)擬合為相位響應(yīng)曲線，得出中值（Mesor, M）、振幅（Amplitude, A）以及峰相位時(shí)相（period,Φ）三個(gè)余弦參數(shù)，分析三個(gè)余弦參數(shù)的變化。
　　結(jié)果：1.自發(fā)活動(dòng)的晝夜節(jié)律性變化：（1）對(duì)照組、光照組、ZT3組和ZT15組自發(fā)活動(dòng)在照射前后均顯示出明顯的晝夜節(jié)律性（平均速度的節(jié)律參數(shù)振幅 A經(jīng)F檢驗(yàn)，p<0.05）。（2）與照射前相比，對(duì)照組晝夜節(jié)律 M、A以及Φ三個(gè)余弦

5、參數(shù)未發(fā)生明顯變化，照射前峰值時(shí)點(diǎn)由ZT15.20點(diǎn)變?yōu)閆T15.67點(diǎn)（p>0.05）；與照射前相比，光照組中值、振幅降低（p<0.05），時(shí)相滯后，峰值時(shí)點(diǎn)由ZT15.22點(diǎn)延遲至ZT20.82點(diǎn)（p<0.05）；ZT3組中值、振幅降低（p<0.05），時(shí)相發(fā)生滯后，峰值時(shí)點(diǎn)由ZT15.69點(diǎn)延遲至ZT18.7點(diǎn)（p<0.05）；ZT15組中值、振幅降低（p<0.05），時(shí)相發(fā)生滯后，峰值時(shí)點(diǎn)由ZT15.21點(diǎn)延遲至ZT16.37點(diǎn)

6、（p<0.05）（3）與光照組相比，ZT3組與ZT15組中值、振幅降低程度低于光照組，時(shí)相滯后程度小于光照組。
　　2.血漿褪黑素水平的晝夜節(jié)律性變化：（1）照射后，對(duì)照組、光照組、ZT3組和ZT15組血漿褪黑素濃度的節(jié)律參數(shù)振幅A經(jīng)F檢驗(yàn)，p<0.05，褪黑素水平顯示出明顯的晝夜節(jié)律性。（2）與對(duì)照組相比，光照組的中值、振幅降低（p<0.05），時(shí)相發(fā)生滯后，對(duì)照組峰值時(shí)點(diǎn)為 ZT13.89點(diǎn)，光照組峰值時(shí)點(diǎn)為 ZT20.35點(diǎn)

7、；與對(duì)照組相比，ZT3組中值、振幅降低（p<0.05），時(shí)相發(fā)生滯后，ZT3組峰值時(shí)點(diǎn)延遲至ZT20.08點(diǎn)；與對(duì)照組相比，ZT15組振幅降低（p<0.05），時(shí)相發(fā)生滯后，峰值時(shí)點(diǎn)延遲至ZT16.25點(diǎn)，中值未出現(xiàn)明顯變化（p>0.05）。
　　3. NAT基因表達(dá)水平晝夜節(jié)律變化：（1）照射后，對(duì)照組、光照組、ZT3組和ZT15組大鼠松果體NAT基因表達(dá)水平均呈現(xiàn)出明顯晝夜節(jié)律性。（2）與對(duì)照組相比，光照組的中值、振幅降低（p

8、<0.05），時(shí)相發(fā)生滯后，對(duì)照組峰值時(shí)點(diǎn)為ZT12.83點(diǎn)，光照組峰值時(shí)點(diǎn)延遲至 ZT16.87點(diǎn)（p<0.05）；與對(duì)照組相比，ZT3組中值、振幅降低（p<0.05），時(shí)相發(fā)生滯后，峰值時(shí)點(diǎn)延遲至ZT15.64點(diǎn)（p<0.05）；與對(duì)照組相比，ZT15組時(shí)相發(fā)生滯后，峰值時(shí)點(diǎn)延遲至ZT14.42點(diǎn)（p<0.05），中值與振幅未出現(xiàn)明顯變化（p>0.05）。
　　結(jié)論：1.900MHz微波輻射對(duì)大鼠的自發(fā)活動(dòng)、血漿褪黑素水平以及