硝苯地平對(duì)大鼠內(nèi)皮源性血管活性物質(zhì)晝夜節(jié)律的影響.pdf

1、目的：人體血壓呈周期為24小時(shí)的晝夜節(jié)律(diurnalrhythm)或近日節(jié)律(circadianrhythm)。根據(jù)血壓的晝夜波動(dòng)情況可將其分為四型：①杓型(dippers)：即夜間血壓較日間下降10％～20％；②非杓型(non-dippers)：夜間血壓下降0％～10％；③超杓型或深杓型(over-dippers或extreme-dippers)：夜間下降＞20％；④反杓型(reverse-dippers):夜間血壓水平高于日間者

2、。一般認(rèn)為，晝高夜低的杓型血壓對(duì)于人類是相對(duì)正常健康的。大量研究顯示，血壓節(jié)律是獨(dú)立于血壓水平之外的心血管事件預(yù)測(cè)因子，節(jié)律異常的高血壓患者其靶器官損害和心腦血管事件發(fā)生率顯著增加。
　　 作為早期二氫吡啶類鈣拮抗劑，普通硝苯地平曾是最重要的降壓藥物之一。近年來，鑒于其半衰期短，降壓平穩(wěn)性差等缺點(diǎn)，高血壓指南不推薦其作為首選降壓藥物。然而普通硝苯地平療效顯著、價(jià)格低廉，結(jié)合我國(guó)尚不發(fā)達(dá)的社會(huì)經(jīng)濟(jì)狀況，仍應(yīng)依據(jù)個(gè)人情況在一般高血壓

3、患者中大力推薦使用，尤其是適用于非杓型或晨峰現(xiàn)象顯著的高血壓患者。長(zhǎng)效降壓藥物基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用普通硝苯地平可能是糾正血壓異常節(jié)律的新思路，這對(duì)保護(hù)靶器官免受損傷、預(yù)防心腦血管事件具有重要意義。
　　 研究表明，內(nèi)皮素(ET)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)等物質(zhì)的血漿濃度或活性均存在晝夜節(jié)律現(xiàn)象，且與血壓節(jié)律密切相關(guān)。因此，充分認(rèn)識(shí)其生物節(jié)律，對(duì)于深入理解血管內(nèi)皮功能與血壓節(jié)律的關(guān)系具有重要意義，對(duì)于改善高血壓的治療現(xiàn)

4、狀、減少不良心血管事件的發(fā)生具有重要價(jià)值。目前僅有少數(shù)學(xué)者對(duì)上述物質(zhì)的分子表達(dá)水平的近日節(jié)律作了研究，且普通硝苯地平對(duì)內(nèi)皮系統(tǒng)血管活性物質(zhì)節(jié)律的影響亦尚待深入探討。
　　 在此背景下，本試驗(yàn)通過對(duì)大鼠灌服普通硝苯地平，研究該藥物對(duì)內(nèi)皮源性血管活性物質(zhì)晝夜節(jié)律的影響及其分子生物學(xué)機(jī)制，可以指導(dǎo)我們糾正異常的血壓節(jié)律，這對(duì)高血壓及其靶器官損害的防治有重要意義。
　　 方法：清潔級(jí)健康雄性SD大鼠64只，10周齡，體重250～

5、300克。隨機(jī)分為兩大組：灌藥組(T)，對(duì)照組(N)，每大組各32只。灌藥組每日給予普通硝苯地平6mg/Kg灌胃，對(duì)照組每日給予同等容量的蒸餾水。每大組又隨機(jī)分4小組，每組各8只。按上述方案飼養(yǎng)喂藥4周后，分別于同日24小時(shí)內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)(02:00、08:00、14:00、20:00)處死N組、T組中的各一小組大鼠。分別檢測(cè)大鼠血漿及心肌組織ET-1、血清及心肌組織NO、eNOS的表達(dá)量以及心肌組織eNOS-mRNA的表達(dá)水平。應(yīng)用余弦

6、擬合法分析兩組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清及心肌組織中各指標(biāo)含量的時(shí)間生物學(xué)特征，采用零振幅檢驗(yàn)(zeroamplitudetest)評(píng)價(jià)各檢測(cè)指標(biāo)的近日節(jié)律是否確實(shí)存在，應(yīng)用t檢驗(yàn)方法比較各均值之間差異的顯著性，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1t檢驗(yàn)顯示，血漿、心肌組織中ET-1表達(dá)量的晝夜平均水平：N組高于T組，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。提示硝苯地平可以影響大鼠ET-1的表達(dá)量，灌服硝苯地平大鼠血漿、

7、心肌組織中ET-1水平顯著降低。
　　 2t檢驗(yàn)顯示，血清、心肌組織中NO、eNOS表達(dá)量的晝夜平均水平：T組高于N組，并有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。提示硝苯地平可以影響大鼠NO、eNOS的表達(dá)量，灌服硝苯地平大鼠血清、心肌組織中NO、eNOS水平顯著升高。
　　 3t檢驗(yàn)顯示，大鼠心肌組織eNOS-mRNA表達(dá)量的平均水平：T組高于N組（P＜0.05）。
　　 4余弦擬合分析及零振幅檢驗(yàn)顯示，兩大組大鼠血漿E

8、T-1、血清NO、eNOS及心肌組織中ET-1、NO、eNOS的檢測(cè)值均呈現(xiàn)出典型的晝夜節(jié)律性。N組血漿ET-1、血清NO、eNOS的峰值依次出現(xiàn)于22:43、10:25、07:35；T組血漿ET-1、血清NO、eNOS的峰值依次出現(xiàn)于21:56、08:24、05:29，T組各指標(biāo)的峰值較N組提前出現(xiàn)，兩組血漿ET-1、血清NO、eNOS振幅基本一致。N組心肌組織ET-1、NO、eNOS的峰值依次出現(xiàn)于02:07、14:04、12:39

9、，T組心肌組織ET-1、NO、eNOS的峰值依次出現(xiàn)于01：14、12:57、11:40，T組各指標(biāo)的峰值較N組提前出現(xiàn)。N組與T組心肌組織ET-1、NO、eNOS振幅基本一致。
　　 5余弦擬合分析及零振幅檢驗(yàn)顯示，T組、N組大鼠心肌組織中eNOS-mRNA呈現(xiàn)出典型的晝夜節(jié)律性。N組大鼠心肌組織中eNOS-mRNA的峰值出現(xiàn)于11:45，T組的峰值位于09:05。兩組的振幅沒有明顯變化。
　　 結(jié)論：