柴樸湯對(duì)哮喘大鼠HIF-1α和TGF-β1的動(dòng)態(tài)表達(dá)影響.pdf

1、目的:觀察HIF-1α和TGF-β1在哮喘大鼠中表達(dá)水平的動(dòng)態(tài)變化,分析兩者與氣道重塑的關(guān)系,探討兩者在哮喘氣道重塑中的作用,為臨床檢測(cè)氣道重塑提供新的思路;探討柴樸湯治療哮喘氣道重塑的可能作用機(jī)制。
　　方法:將健康SD大鼠70只隨機(jī)分成3組,即哮喘A組(30只,分為哮喘二周A1組、四周A2組、八周A3組各10只),柴樸湯B組(30只,分為柴樸湯二周B1組、四周B2組、八周B3組各10只),正常對(duì)照C組(10只)。A、B組以腹腔

2、注射OVA致敏及反復(fù)霧化激發(fā)建立大鼠哮喘模型,B組激發(fā)前30min以柴樸湯1.5g/kg灌胃,各組分別在末次激發(fā)24h內(nèi)處死大鼠。常規(guī)病理切片觀察肺組織及氣道粘膜中炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)情況;運(yùn)用圖像分析軟件測(cè)定Pbm、Wat、Wai、Wam,將Wat、Wai、Wam用Pbm標(biāo)準(zhǔn)化;RT-PCR檢測(cè)HIF-1α、TGF-β1 mRNA的表達(dá)水平;免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)HIF-1α、TGF-β1蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、大鼠氣道

3、重塑情況
　　正常對(duì)照組大鼠氣道平滑肌層均勻,周圍無(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),無(wú)杯狀細(xì)胞增生及黏液分泌;哮喘二周組支氣管壁及氣道平滑肌增厚,黏膜下水腫,氣道黏膜皺襞增多,氣道上皮受損、脫落,氣道周圍支氣管黏膜下有大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn);哮喘四周組與哮喘二周組相比,氣道平滑肌明顯增厚,上皮下纖維化明顯,基底膜增厚且不規(guī)則,管腔內(nèi)可見粘液栓形成,管腔相對(duì)狹窄,Wat/Pbm、Wai/Pbm、Wam/Pbm差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);哮喘八周組與哮

4、喘四周組相比,氣道平滑肌增厚更明顯,上皮下纖維化更明顯,大量粘液栓形成,管腔更狹窄, Wat/Pbm、Wai/Pbm、Wam/Pbm差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);經(jīng)柴樸湯干預(yù)后,與相同時(shí)間段的哮喘二周組、哮喘四周組、哮喘八周組比較,氣道重塑情況均較哮喘組輕,Wat/Pbm、Wai/Pbm、Wam/Pbm差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);而柴樸湯二周組與正常對(duì)照組相比,Wat/Pbm、Wai/Pbm、Wam/Pbm差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

5、>0.05)。
　　2、大鼠支氣管肺組織HIF-1α、TGF-β1mRNA和蛋白的表達(dá)水平
　　哮喘二周組支氣管肺組織中HIF-1α、TGF-β1mRNA和蛋白表達(dá)水平已經(jīng)升高,哮喘四周組HIF-1α、TGF-β1mRNA和蛋白表達(dá)水平進(jìn)一步升高,兩者相比,有顯著性差異(P<0.05);哮喘八周組其表達(dá)水平升高更明顯,與哮喘四周組相比,有顯著性差異(P<0.05);經(jīng)柴樸湯干預(yù)后,與相同時(shí)間段的哮喘二周組、哮喘四周組、哮喘八