鵝源優(yōu)勢菌群及纖維素分解菌的分離鑒定.pdf

1、機體內(nèi)正常菌群(normalflora)，亦稱正常微生物菌群(normalmicrobiologicalflora)，指在動物、人類和植物的內(nèi)環(huán)境(包括體內(nèi)和體表)存在的一層微生物或微生物層(microbiolzone)，在正常情況下即動物處于健康狀態(tài)時，并未出現(xiàn)異?；蛑虏‖F(xiàn)象，它與機體的免疫、營養(yǎng)、腫瘤、生物拮抗、急性與慢性感染等都有著非常密切的聯(lián)系。從目前研究進展來看，對豬、兔、雞以及反芻動物和馬屬動物等體內(nèi)正常微生物群的研究已有相

2、當(dāng)多的報導(dǎo)，但對鵝腸道內(nèi)微生物的研究卻很少，且僅限于對鵝盲腸內(nèi)某種微生物的研究或?qū)Ω髂c段總菌數(shù)的研究，而對正常菌群在各腸道的分布情況國內(nèi)外至今尚無報道。因而有必要對鵝腸道正常菌群進行研究，為鵝微生態(tài)學(xué)的研究奠定基礎(chǔ)。 纖維素是地球上最豐富、來源最廣泛的有機物質(zhì)。由于技術(shù)等諸多原因，這一類寶貴資源，不僅未得到充分利用，而且有相當(dāng)大部分還被廢棄，成為環(huán)境污染物之一。目前國內(nèi)外對分解纖維素能力較強的真菌及其產(chǎn)酶活力研究很多，但絕大多數(shù)

3、都是從土壤、腐爛物以及糞便中分離所得，然而至今未見從家禽體內(nèi)分離纖維素分解菌的報道。為了提高纖維素資源的利用率，進行鵝腸道纖維素分解菌的分離鑒定顯得尤為必要。 本論文通過在日糧中添加不同比例的羊草，初步探明成年鵝腸道中正常微生物區(qū)系，并對其理化特性進行了研究，同時利用纖維素剛果紅培養(yǎng)基初篩，濾紙失重試驗結(jié)合FPA測定試驗復(fù)篩的試驗方案進行纖維素分解菌的分離，主要獲得如下研究結(jié)果： 1.不同含量CF對鵝腸道中正常菌群有重大

4、影響，日糧中CF含量為9％時，優(yōu)勢菌群數(shù)量較多(P＜0.01)，說明鵝能夠較快地適應(yīng)日糧CF含量的變化，以維持鵝腸道菌群平衡。另外，各腸段食糜pH均為CF9％組低于CF5％組(P＜0.01)，說明在日糧中增加羊草粉含量能夠降低腸道pH，形成的酸性環(huán)境有利于腸道微生物發(fā)酵。 2.通過稀釋滴種的細(xì)菌定量方法，研究了不同CF水平日糧對成年鵝腸道的四個部位(十二指腸、空腸、回腸、盲腸)內(nèi)容物中正常菌群的數(shù)量變化，確定了鵝腸道中的優(yōu)勢菌群

5、為雙歧桿菌(8.21±0.8個/g)、梭菌(7.98±0.4個/g)和乳酸桿菌(7.33±0.4個/g)。盲腸內(nèi)細(xì)菌數(shù)顯著高于其它腸段(P＜0.01)。葡萄球菌和擬桿菌的分離率最低。各腸段內(nèi)細(xì)菌總數(shù)CF9％組高于CF5％組(P＜0.01)，公鵝高于母鵝(P＜0.05)。本試驗中鵝腸道內(nèi)容物中細(xì)菌總數(shù)為106～108個/g，與豬、雞腸道內(nèi)總菌數(shù)1011個/g有較大差別，而與兔盲腸內(nèi)總菌數(shù)107～108個/g相似。 3.利用纖維素剛

6、果紅培養(yǎng)基初篩，濾紙失重試驗和酶活測定試驗復(fù)篩，從高纖維組鵝盲腸中篩選到1株纖維素分解能力較強的真菌F67。經(jīng)中國科學(xué)院微生物研究所實驗室鑒定，F(xiàn)67為草酸青霉(PenicilliumoxalicumCurrie&Thom)。該菌在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)液中，28℃振蕩培養(yǎng)8d，能夠使濾紙纖維素失重率達(dá)28.53％，濾紙酶活力(FPA)可達(dá)449.79U/g。 4.試驗結(jié)果表明，在鵝的腸道中，真菌分解纖維素的能力最強，放線菌次