不同壓力下高壓氧預處理對大鼠腦缺血-再灌注損傷的保護作用.pdf

1、目的：用改進的Zea-Longa法建立大鼠大腦中動脈阻斷缺血-再灌注模型(MCAO)，觀察大鼠腦缺血-再灌注24小時后神經行為學、腦梗塞體積、缺血半暗帶氧化應激反應水平和缺血半暗帶組織神經元凋亡的變化，給予安全范圍內不同壓力高壓氧(HBO)預處理后，觀察其對上述指標的影響，并探討HBO預處理對腦缺血組織保護作用的可能機制。
　　 方法：48只WISTAR大鼠，體重250-300g，雌雄各半，隨機分為3組：假手術組(n=8)；對照

2、組：MCAO組(n=8)；實驗組：HBO-PC+MCAO組(n=32)。實驗組再按不同的HBO預處理壓力分為1.5 ATA(0.15MPa)、2.0ATA(0.20MPa)、2.5ATA(0.25MPa)和3.0ATA(0.30MPa)4個亞組，每組8只。按不同預處理壓力，每次吸氧1 h、隔天1次、共5次10天連續(xù)完成。最后一次HBO預處理后24h根據(jù)改進的Zea-Longa線栓法制作MCAO-再灌注損傷模型，模型成功的標志為大鼠手術麻

3、醉清醒后Zea-Longa5分制評分＞2分，評分＜2分者剔除并立刻補充。缺血2小時再灌注24h后取大腦皮層缺血半暗帶組織進行以下檢測：(1)采用Zea-Longa5分制評定大鼠神經功能缺損情況和TTC染色法測量腦梗塞體積。(2)測定脂質過氧化物產物丙二醛(MDA)含量、同時測總超氧化物歧化酶(總SOD)和過氧化氫酶(CAT)等抗氧化酶的活力。(2)用TUNEL法和免疫組織化學法檢測大鼠腦皮層缺血半暗帶神經細胞凋亡水平和凋亡促進酶Casp

4、ase-3及凋亡抑制蛋白bcl-2的表達水平。假手術組和MCAO組不進行HBO或常壓氧治療，10d后處理同實驗組。
　　 結果：與對照組比較(1)各實驗組動物行為改善，腦梗塞灶體積縮小。(2)各實驗組MDA含量均不同程度下降，總SOD和CAT水平均不同程度的增高。(3)各實驗組腦缺血半暗帶凋亡細胞數(shù)和Caspase-3陽性細胞數(shù)不同程度降低，bcl-2表達不同水平增高，與對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。而在2.0A

5、TA和2.5ATA壓力條件下相比較1.5ATA和3.0ATA上述檢測指標差異亦有顯著性(P＜0.05)；并且2.0 ATA和2.5 ATA間，1.5ATA和3.0ATA間差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 結論：(1)高壓氧預處理可能通過上調抗氧化酶活性減輕局灶性腦皮層缺血-再灌注缺血半暗帶的自由基損傷和神經元凋亡。(2)另外高壓氧預處理可能通過下調皮層缺血半暗帶神經元線粒體水平的凋亡反應減輕大鼠腦缺血-再灌注損傷。1.