人表皮干細胞分化成成釉細胞的研究.pdf

1、福建師范大學碩士學位論文人表皮干細胞分化成成釉細胞的研究姓名：杜生榮申請學位級別：碩士專業(yè)：發(fā)育生物學指導教師：張彥定20090501中文文摘中文文摘隨著年齡的增長，所有的人都有不同程度的牙齒缺失和缺陷，因此，人類牙齒再生是一項極具市場價值和社會效益的工作。有關牙齒再生的研究已經(jīng)做了很多的工作，將兔子的切牙牙胚上皮和間充質(zhì)打散，植入到雞胚的尿囊絨毛膜培養(yǎng)，可以得到牙齒的結果；將書牙胚打散后，植入到腎囊膜，也可以形成牙齒結構；借助支架技術

2、，把豬的磨牙牙胚細胞打到支架里，也可形成牙齒。牙齒的發(fā)育需要依靠牙上皮細胞和牙間充質(zhì)細胞相互誘導?；谶@個原理，人們用間充質(zhì)來源的干細胞代替牙間充細胞與牙上皮重組，來探討間充質(zhì)干細胞是否能被誘導，參與牙齒再生?，F(xiàn)在研究比較熱的間充干細胞有牙髓干細胞，骨髓干細胞，神經(jīng)干細胞，胚胎干細胞，但是據(jù)目前的報道，間充質(zhì)來源的干細胞只能被誘導為類牙髓樣的結構；而用表皮干細胞代替牙上皮來支持牙齒再生，國際上尚沒有報道，所以本實驗研究目的就是探索表皮干

3、細胞是否能被誘導為成釉細胞，參與牙齒再生，同時也為理解牙齒再生的機理提供實驗數(shù)據(jù)，建立人類再生牙齒的技術模型，對干細胞在組織工程領域中的應運也有普遍意義。本實驗首先建立了表皮干細胞的培養(yǎng)體系，其中成纖維條件培養(yǎng)液可以提供表皮干細胞的所必需的因子，在這種培養(yǎng)體系中表皮干細胞可以增殖，而且克隆邊界很明顯，并且有利于表皮干細胞表型的維持，也間接說明成纖維細胞可以作為相同來源的表皮干細胞的滋養(yǎng)層，為解決表皮干細胞的傳代問題奠定一定的基礎。同時用

4、目前比較常用的表皮干細胞的標記物K15，K19，CD29來檢測表皮干細胞的分布，發(fā)現(xiàn)表皮干細胞都集中分布在皮膚基底層，并且在毛囊中分布比較廣，這與先前文獻報道的一致；同時我們用細胞免疫組化的方法檢測分離的表皮干細胞，發(fā)現(xiàn)其純度可以達到90％，可以作為牙齒組織工程的種子細胞。第二，在FGF8生長因子存在的情況下，用表皮干細胞膜片與E135天的牙間充質(zhì)細胞重組，腎囊膜移植三周，組織學切片，HE染色發(fā)現(xiàn)表皮干細胞被誘導為成釉細胞，并且成釉細胞