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文檔簡介
1、低溫貯藏是減輕果蔬采后貯運及物流損失的最有效方式,但很多果蔬特別是熱帶亞熱帶果蔬容易發(fā)生冷害,冷害成為果蔬采后低溫貯運的主要脅迫。黃瓜是典型的冷敏性果實,在貯藏溫度低于10℃時極易產生冷害,主要癥狀表現(xiàn)為果實水漬狀凹陷,失水嚴重,萎蔫變黃,清新氣味消失,從而影響果實的商品價值。ERF是一類植物特有的轉錄因子,在生物及非生物逆境中起著重要的作用,但其與黃瓜果實冷害的關系及其參與調控冷害的機制目前研究較少。為此,本實驗中,我們以“津冬”黃瓜
2、果實為材料,采用轉錄組測序(RNA-Seq)的方法,比較冷害過程中黃瓜果實轉錄水平基因表達的差異,重點關注ERF轉錄因子在黃瓜冷害及減輕冷害的進程中的表達模式,獲得與冷害相關的ERF基因,分離其全長序列,并采用qRT-PCR方法驗證其表達特征,分析了ERF轉錄因子在黃瓜冷害及減輕冷害的進程中的表達模式,同時采用酵母雙雜交的方法篩選與冷害相關ERFs互作的組蛋白去乙?;富騂DACs,并用BiFC的方法進行了體內驗證,期望闡明 ERF轉
3、錄因子在黃瓜果實采后冷害過程中的作用及機制。
主要研究結果如下:
1.15℃冷鍛煉處理2d能夠減輕貯藏8℃條件下的黃瓜果實冷害,提高了黃瓜果實耐冷性。
2.對冷害過程中的黃瓜果實進行了轉錄組測序(RNA-Seq),獲得了337個差異表達基因,其中29個ERF基因表達模式呈現(xiàn)差異,將其命名為CsERF1-29。同時,從NCBI中獲得了黃瓜所有的21個HDA基因家族成員,命名為CsHDA1-21以進行后續(xù)研究。
4、
3.熒光定量分析表明,CsERFs和CsHDAs基因表達水平與黃瓜果實冷害有一定關系。qRT-PCR分析顯示,隨著低溫貯藏時間的延長,CsERF1、14、17、18、24、28、29和CsHDA3、7、8、17、18、21表達水平呈上調趨勢,而CsERF4、7、8、16、27則呈下調。表明,這些基因可能與黃瓜果實冷害相關。
4.采用RT-PCR與RACE相結合的方法,獲得了CsERF4、18、27、29和CsHDA
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