膀胱癌中CDH13表達及其啟動子甲基化的意義.pdf

1、目的：研究CDH13在膀胱移行細胞癌組織中的表達及其與患者臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系，為膀胱癌的診斷、惡性行為評估以及預(yù)后判斷提供理論依據(jù)和研究基礎(chǔ)。研究膀胱移行細胞癌組織中CDH13基因啟動子甲基化狀態(tài)，結(jié)合第一部分研究結(jié)果分析CDH13基因啟動子甲基化與其表達減少的相關(guān)性，并結(jié)合臨床病理資料分析CDH13基因啟動子甲基化與膀胱移行細胞癌發(fā)生發(fā)展以及患者預(yù)后的關(guān)系，為膀胱移行細胞癌的診斷、監(jiān)測以及預(yù)后判斷提供新的標志物。研究在膀胱癌56

2、37細胞系中CDH13的表達被特異性地抑制后對細胞的增殖、遷移和侵襲能力的影響。
　　方法：應(yīng)用免疫組化檢測CDH13在37例正常膀胱粘膜組織和113例膀胱移行細胞癌組織中的表達，并與腫瘤的數(shù)目、大小、形態(tài)、復(fù)發(fā)、分級、分期以及患者的年齡、性別和預(yù)后等臨床病理資料相聯(lián)系進行統(tǒng)計學(xué)分析。應(yīng)用甲基化特異性PCR檢測113例膀胱移行細胞癌組織和37例正常膀胱粘膜組織中CDH13基因啟動子甲基化狀態(tài)，結(jié)合第一部分研究結(jié)果分析CDH13基因

3、啟動子甲基化與其表達減少的相關(guān)性，并與腫瘤的數(shù)目、大小、形態(tài)、復(fù)發(fā)、分級、分期以及患者的年齡、性別和預(yù)后等臨床病理資料相聯(lián)系進行統(tǒng)計學(xué)分析。應(yīng)用CDH13siRNA轉(zhuǎn)染膀胱癌5637細胞特異性地抑制CDH13的表達，并應(yīng)用熒光定量PCR和western blot技術(shù)檢測RNA干擾效果，然后進行MTT細胞增殖實驗、Transwell細胞遷移和侵襲實驗，并將結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：(1)CDH13在膀胱移行細胞組織中表達減少，

4、與其在正常膀胱粘膜中的表達相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義；在膀胱移行細胞癌組織中CDH13表達減少與腫瘤生長、復(fù)發(fā)、分化不良以及腫瘤浸潤密切相關(guān)，但與腫瘤數(shù)目、形態(tài)以及患者的年齡和性別無關(guān)；此外，53例CDH13表達正常的患者其5年總生存率為86.7％(46/53)，60例CDH13表達減少的患者其5年總生存率為68.3％(41/60)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。(2)CDH13基因在正常膀胱粘膜組織中未出現(xiàn)甲基化，在膀胱移行細胞癌組織中其甲基化率為54

5、.8％，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；在膀胱移行細胞癌組織中CDH13基因啟動子甲基化與其蛋白表達呈負相關(guān)；CDH13基因啟動子甲基化與腫瘤生長、復(fù)發(fā)、分化不良、浸潤以及患者的不良預(yù)后密切相關(guān)，但與腫瘤數(shù)目、形態(tài)以及患者的年齡和性別無關(guān)。(3)CDH13siRNA轉(zhuǎn)染5637細胞后CDH13的表達明顯減少，與空白對照組和陰性對照組相比CDH13siRNA轉(zhuǎn)染組細胞增殖、遷移和侵襲能力增強，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)論：膀胱移行細胞癌組織中CD

6、H13表達減少并且與腫瘤的生長、復(fù)發(fā)、分化不良、浸潤以及患者的不良預(yù)后密切相關(guān)，這些結(jié)果表明CDH13表達減少是膀胱移行細胞癌發(fā)生發(fā)展和患者預(yù)后不良的一個危險因素。CDH13基因啟動子甲基化與其表達呈負相關(guān)，啟動子甲基化是導(dǎo)致CDH13表達減少的主要原因；并且CDH13基因啟動子甲基化與腫瘤的生長、復(fù)發(fā)、分化不良、浸潤以及患者的不良預(yù)后密切相關(guān)，這些結(jié)果表明膀胱移行細胞癌組織中CDH13基因甲基化是膀胱癌發(fā)生發(fā)展和患者預(yù)后不良的一個標志