常見環(huán)境污染物質(zhì)人體內(nèi)暴露檢測技術(shù)研究.pdf

1、沙丁胺醇、已烯雌酚、雙酚A、甲醛、苯乙烯、苯并(a)芘、多氯聯(lián)苯、鄰苯二甲酸酯、尼古丁等15種環(huán)境污染物因為廣泛的使用，對人體產(chǎn)生嚴重危害，已經(jīng)引起人們的高度關(guān)注。對這一系列人們極易接觸到的污染物進行人體內(nèi)暴露含量的檢測，不僅能夠真實客觀地反映個體污染物質(zhì)的暴露水平，而且可以避免個體差異的影響，直接顯示個體受到各種環(huán)境污染物質(zhì)的綜合危害程度。但目前內(nèi)暴露檢測主要只是針對一種或一類性質(zhì)相近指標進行檢測，而要檢測多種類型環(huán)境污染物內(nèi)暴露劑量

2、，全面系統(tǒng)評價環(huán)境污染物對人的危害程度，存在著技術(shù)瓶頸，即：檢測污染物指標眾多、所測物質(zhì)不是原型而是代謝產(chǎn)物、含量低、檢測指標性質(zhì)各不相同導致樣本前處理難統(tǒng)一等一系列問題，造成檢測服務項目難以推廣。因此，基于內(nèi)暴露的多種類型的環(huán)境污染物檢測技術(shù)亟待研究。
　　 本研究目標在于建立一種能夠同時檢測盡可能多的常見環(huán)境污染物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物的方法。通過參考文獻，根據(jù)檢測指標是否需要衍生化，前處理條件和色譜條件能否統(tǒng)一來盡可能同時檢測污染

3、物指標。本研究采用先通過方便、快捷、高通量的ELISA方法初篩，再色譜方法精確定量檢測的一套集成檢測技術(shù)體系方案。主要對常見污染物人體內(nèi)暴露的精確定量檢測技術(shù)進行了研究，并初步考察了ELISA初篩方法的可行性。重點研究怎樣盡可能的統(tǒng)一前處理條件和色譜條件，利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC/MS)對多項污染物指標進行同時檢測，同時也不排除用HPLC等方法輔助檢測。實現(xiàn)建立基于內(nèi)暴露的多種類型環(huán)境污染物方便、快捷、大通量檢測技術(shù)，直接綜合的評價

4、人類健康狀態(tài)的目標。
　　 1、GC/MS同時檢測苯乙烯和尼古丁含量方法的建立
　　 目的：建立一種同時檢測人尿樣中可的寧(COT)、苯乙醛酸(PA)和苯乙醇酸(MA)含量的GC/MS分析方法。方法：采用GC/MS法，EI檢測器，色譜柱為DB-5MS毛細管柱。進樣前尿樣先經(jīng)過氯仿萃取，吹干后用MSTFA衍生化。結(jié)果：COT在0.0002～3.5μg/mL呈線性關(guān)系，PA和MA在1.25～160μg/mL呈線性關(guān)系，定量限

5、分別為0.0002μg/mL、1.25μg/mL和1.25μg/mL，方法回收率分別為89.5％～102.4％、84.9％～91.4％和83.5％～113.6％。本實驗室建立的方法成功測定了120例正常人尿樣中PA、MA和COT的含量。結(jié)論：本研究建立的方法最低檢測限與已報道的單個污染物檢測方法相當，可用于同時監(jiān)控和測定尼古丁和苯乙烯對人體的危害。
　　 2、GC/MS同時檢測雌激素類似物和沙丁胺醇含量方法的建立
　　

6、目的：建立一種同時檢測人尿樣中雙酚A(BPA)、己烯雌酚(DES)和沙丁胺醇(SAL)含量的GC/MS分析方法。方法：采用GC/MS法，EI檢測器，色譜柱為DB-5MS毛細管柱。進樣前尿樣分別經(jīng)過cleanert PCX和cleanert PEP固相萃取，吹干后衍生化。結(jié)果：BPA在1～200ng/mL呈線性關(guān)系，DES在2～300ng/mL呈線性關(guān)系，SAL在0.01～1.21μg/mL呈線性關(guān)系，定量限分別為1ng/mL、2ng/m

7、L和10ng/mL，方法回收率分別為84.7％～104.9％、87.0％～105.4％和81.8％～96.8％。本實驗室建立的方法成功測定了100例正常人尿樣中BPA、DES和SAL的含量。
　　 結(jié)論：本實驗室建立的方法定量限與已報道的單個污染物檢測方法相當，可用于同時監(jiān)控和測定β-E2、BPA、DES和SAL對人體的危害。
　　 3、GC/MS同時檢測三甲基氯化錫和鹽酸氯丙嗪含量方法的建立
　　 目的：建立一

8、種同時檢測人尿樣中三甲基氯化錫和鹽酸氯丙嗪含量的GC/MS分析方法。方法：采用GC/MS法，EI檢測器，色譜柱為DB-5MS毛細管柱。尿樣先經(jīng)過乙酸乙酯萃取，濃縮后進樣分析。結(jié)果：三甲基氯化錫在0.05～5μg/mL呈線性關(guān)系，鹽酸氯丙嗪在0.01～1μg/mL呈線性關(guān)系，定量限分別為0.05μg/mL和0.01μg/mL，方法回收率分別為87.0％～99.4％和85.9％～105.5％。本實驗室建立的方法成功測定了85例正常人尿樣中三

9、甲基氯化錫和鹽酸氯丙嗪的含量。結(jié)論：本實驗室建立的方法定量限與已報道的單個污染物檢測方法相當，可用于同時監(jiān)控和測定三甲基氯化錫和鹽酸氯丙嗪對人體的危害。
　　 4、其他污染物檢測方法
　　 目的：確定其他7種常見污染物(苯并芘、二惡英、多氯聯(lián)苯、鄰苯二甲酸二丁酯、有機磷、甲苯、甲醛)的檢測方法。方法：通過參照文獻報道，本研究采用HPLC法分別檢測尿液中苯并芘及二惡英代謝產(chǎn)物4，5-二氯鄰苯二酚的含量，GC/MS法分別檢測

10、尿樣中多氯聯(lián)苯、鄰苯二甲酸二丁酯代謝物的含量，氣相色譜法檢測尿液中甲苯、甲醛及有機磷代謝物甲酸含量。結(jié)果：各方法檢測限都與文獻報道檢測限相一致，且這些方法成功測定了85例人尿樣中各相對應的污染物的含量。結(jié)論：本研究中采用的方法可用于監(jiān)控和測定苯并芘、二惡英、多氯聯(lián)苯、鄰苯二甲酸二丁酯、有機磷、甲苯及甲醛對人體的危害。
　　 5、ELISA方法的初篩測定
　　 目的：驗證ELISA方法作為樣本初篩方法的可行性。方法：本研究

11、使用ELISA試劑盒對可的寧、沙丁胺醇、氯丙嗪、己烯雌酚、黃曲霉素M1進行了測定。參照試劑盒檢測步驟，對35例正常人尿樣樣本進行了檢測。結(jié)果：各污染物在樣本中都有被檢出，且通過檢測結(jié)果對比我們發(fā)現(xiàn)GC/MS能檢測到的陽性樣本在ELISA方法中都有檢出。結(jié)論：用ELISA進行樣本的初篩測定是可行的。
　　 綜上所述：
　　 本研究對15種常見環(huán)境污染物的人體內(nèi)暴露劑量檢測方法進行了探索，提出了先ELIsA初篩再色譜定量檢測

12、的方案。成功完成了對苯乙烯、尼古丁、雌激素類似物等污染物的GC/MS檢測方法的分批合并，確定了其余7種污染物。HPLC、頂空氣相等精確定量檢測方法及尼古丁、沙丁胺醇、己烯雌酚和氯丙嗪的ELISA初篩方法。并且本研究對大量樣本進行了測定，其高檢出率充分表明了環(huán)境污染物內(nèi)暴露檢測的必要性，也進一步驗證了該系列方法方案是科學合理且可行的。本研究方法的建立可以在不降低檢測準確度的情況下，能夠有效降低檢測工作量，并有效降低檢測成本，為能快速、高效